オリゴデンドロサイトにおける内向き整流性カリウムチャネルの制御と細胞死との関連

少突胶质细胞内向整流钾通道的调节及其与细胞死亡的关系

基本信息

批准号：
11780594
负责人：
飛田秀樹
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

中枢神経の髄鞘形成細胞オリゴデンドロサイト(OLGs)において、TNFレセプターへのリガンド結合によってスフィンゴミエリナーゼが活性化され、セラミドが作られることによって細胞死が誘発される。我々は、アポトーシス過程においてp38MAPKの活性化が重要であることを証明し、またセラミドによるRas-Raf-1を介した内向き整流性カリウム電流(I_<Kir>)の抑制メカニズムを明らかにしてきた。近年MAPKレベル(p38/ERK)とチャネルとの相互作用が報告されているので、セラミドによるI_<Kir>抑制とp38MAPKの活性化との関係、及びOLGsにおいてI_<Kir>抑制がどのように細胞死メカニズムに関与しているのかを解析した。p38MAPK阻害剤のSB203580前処置によりセラミドのI_<Kir>抑制作用が減弱し、またアンチセンスオリゴヌクレオチド(antisense-ODNs)を処置し蛋白発現を抑制させたところセラミドによるI_<Kir>の抑制は認められなかった。またERK2阻害剤やantisense-ODNsを用いた同様な実験ではI_<Kir>抑制は認められなかったので、OLGsにおいてp38MAPKの活性化がI_<Kir>抑制メカニズムに関与していることを明らかにした。一方、Ba^<2+>の細胞外投与によるI_<Kir>抑制によりOLGsのアポトーシスが誘発されることがTUNNEL染色により明らかになった。細胞外K^+の上昇によっても同程度のアポトーシスが誘発されるので、細胞の脱分極によってもアポトーシスが誘発されることが考えられた。Ba^<2+>により30分間脱分極刺激を与えたときにもアポトーシスが誘導されたことから短時間の脱分極によりアポトーシスのシグナルが動くことがわかった。以上よりOLGsにおけるセラミドによるアポトーシス過程において、p38MAPKの活性化とそれによる細胞の脱分極が重要であることがわかった。

在中枢神经髓鞘的细胞少突胶质细胞（OLGS）中，与TNF受体的配体结合会激活鞘磷脂酶和神经酰胺，从而导致细胞死亡。我们已经证明，p38mapk的激活在凋亡过程中很重要，并且还阐明了抑制Ceramide抑制Ras-Raf-1介导的向内整流钾电流（I_ <KIR>）的机制。近年来，已经报道了MAPK水平（P38/ERK）与通道之间的相互作用，我们分析了Ceramide抑制I_ <KIR> P38MAPK的抑制作用，以及I_ <KIR>抑制与OLGS中的细胞死亡机制有关。用p38mapk抑制剂对SB203580进行预处理，使神经酰胺的I_ <KIR>抑制作用减弱，当治疗反义寡核苷酸（反义核苷酸）以抑制蛋白质表达时，无抑制I_ <kir>。此外，使用ERK2抑制剂和反义 - odns的类似实验显示没有I_ <KIR>抑制作用，并且发现p38mapk的激活参与OLG中的I_ <KIR>抑制机制。另一方面，隧道染色表明，通过细胞外施用BA^<2+>抑制I_ <KIR>会诱导OLG的凋亡。由于细胞外K^+的增加也诱导了相似的凋亡程度，因此人们认为细胞去极化也会诱导凋亡。当通过BA^<2+>给出去极化刺激30分钟时，还诱导了凋亡，发现凋亡信号是通过短期去极化移动的。从上面可以发现，p38mapk和细胞去极化的激活在OLGS中神经酰胺的凋亡过程中很重要。