トレニアin vitro重複受精系を用いた2つの精細胞の動態解析

利用Torenia体外双受精系统对两个精子细胞进行动态分析

基本信息

  • 批准号:
    12740453
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.41万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2000 至 2001
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

昨年度までに、花粉管の先端が胚嚢内部の適切な位置で破裂して内容物を放出し始めると(初速12,000μm3/s)、片側の助細胞が平均わずか0.6sで崩壊して花粉管内容物を受け取るようすを明らかにしてきた(Higashiyama et al. 2000 Plant Physiol.)。そこでさらに、精細胞を核酸染色色素SYTOX Greenによって生体染色し、その動態を明らかにすることを目的とした。受精過程の観察は、胚嚢が観察のための励起光で予想以上にダメージを受けやすく、困難を極めているが、高感度ICCDカメラを導入し、これまでの冷却カラーCCDカメラよりもさらに高感度で観察できるようになった。蛍光を肉眼では見えないほどまで絞込んだ状態で、花粉管内部における精細胞核および花粉管核、さらにはその内部における染色体や核小体の挙動までも、100倍対物レンズで連続的に観察できるようになった。そして、胚嚢内部に放出された2つの精細胞が、花粉管内部での挙動とは異なり、それぞれ離れて独立に動く様子が明確になってきた。また、受精の瞬間の様子を明らかにするには、どの胚嚢で受精が起こるか推測することが重要であったが、これまで明確ではなかった。そこで培地の改変により受精率を向上させるとともに、花粉管を誘引する細胞をレーザー細胞除去により同定し、卵細胞のわきにある2つの助細胞が花粉管を誘引することを解明した(Higashiyama et al. 2001)。確実に受精が起こる胚嚢を予測できるようになり、現在、受精の瞬間の様子について明らかにすべく、さらに解析を続けている。また、当初の計画に基づき、GFPによる生殖細胞の観察やトランジェントアッセイを行うため、アグロバクテリウムによるin planta形質転換の試みを開始した。
Yesterday annual ま で に, pollen tube の apex が embryo 嚢 internal の appropriate な position で burst し て contents を release beginning し め る と (velocity mu 12000 m3 / s), the piece side の synergid が average わ ず か 0.6 s で collapse 壊 し て contents を pollen tube by け take る よ う す を Ming ら か に し て き た (Higashiyama et al. 2000 Plant Physiol. そ こ で さ ら に, sperm cells を nucleic acid dye pigment SYTOX Green に よ っ て body dyeing し, そ の dynamic を Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. Fertilization の 観 は, embryo 嚢 が 観 examine の た め の wound up light で to think above に ダ メ ー ジ を by け や す く, difficult を め て い る が, Gao Gan ICCD カ メ ラ を import し, こ れ ま で の cooling カ ラ ー CCD カ メ ラ よ り も さ ら に Gao Gan degrees で 観 examine で き る よ う に な っ た. 蛍 light を macroscopic で は see え な い ほ ど ま で ground 込 ん だ で, pollen tube internal に お け る pure nucleus お よ び pollen tube nucleus, さ ら に は そ の internal に お け る chromosome や nucleosome の 挙 dynamic ま で も, 100 times polices レ ン ズ で even 続 に 観 examine で き る よ う に な っ た. そ し て, embryo 嚢 internal に release さ れ た 2 つ の が sperm cells, pollen tube internal で の 挙 dynamic と は different な り, そ れ ぞ れ from れ て independent に く others child が clear に な っ て き た. ま た, fertilization の instant の others child を Ming ら か に す る に は, ど の embryo 嚢 で fertilization が up こ る か speculation す る こ と が important で あ っ た が, こ れ ま で clear で は な か っ た. そ こ で petty の change - に よ り fertilization rate upward を さ せ る と と も に, pollen tube を decoys す る cells を レ ー ザ ー cells to remove に よ り with し, egg の わ き に あ る 2 つ の synergid が pollen tube を decoys す る こ と を interpret し た (Higashiyama et al. 2001). Indeed be に fertilization が up こ る embryo 嚢 を be で き る よ う に な り, now, fertilization の instant の others child に つ い て Ming ら か に す べ く, さ ら に parsing を 続 け て い る. ま た, の original plan に づ き, GFP に よ る germ cell の 観 examine や ト ラ ン ジ ェ ン ト ア ッ セ イ を line う た め, ア グ ロ バ ク テ リ ウ ム に よ る in planta form quality planning in の try み を began し た.

项目成果

期刊论文数量(11)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Higashiyama t, Yabe S, Sasaki N, Nishiyama T, Miyagishima S, Kuroiwa H, Kuroiwa T: "Pollen tube attraction by the synergid cell"Science. 293. 1480-1483 (2001)
Higashiyama t、Yabe S、Sasaki N、Nishiyama T、Miyagishima S、Kuroiwa H、Kuroiwa T:“助细胞对花粉管的吸引力”科学。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Higashiyama T,Kuroiwa H,Kawano S,Kuroiwa T: "Explosive discharge of pollen tube contents in Torenia."Plant Physiology. 122. 11-13 (2000)
Higashiyama T,Kuroiwa H,Kawano S,Kuroiwa T:“Torenia花粉管内容物的爆炸性排放。”植物生理学。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Higashiyama T: "Plant Electron Microscopy and Cytochemistry."Dashek WV ed., Humana Press, USA.. 300 (2000)
Higashiyama T:“植物电子显微镜和细胞化学。”Dashek WV ed.,Humana Press,美国.. 300 (2000)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
東山哲也: "植物の受精の仕組みを解明"遺伝. (印刷中). (2002)
Tetsuya Higashiyama:“阐明植物受精机制”(出版中)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
東山哲也, 黒岩晴子: "受精"植物オルガネラの分化と多様性(仮題) 秀潤社 植物細胞工学シリーズ. (印刷中). (2002)
Tetsuya Higashiyama,Haruko Kuroiwa:“受精”植物细胞器的分化和多样性(暂定名称)Shujunsha植物细胞工程系列(2002年)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
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    0
  • 作者:
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東山 哲也其他文献

「レーザー細胞操作により発見された花粉管ガイダンスペプチド」
“通过激光细胞操作发现花粉管引导肽”
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Doi;Shimazaki;東山 哲也
  • 通讯作者:
    東山 哲也
“もっとも単純な体の脊索動物” をもちいて生物学の新たな領域を開拓する.
使用“最简单的脊索动物”探索生物学的新领域。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    笹部 美知子;桧垣 巧;西田 結花;石橋 奈々子;栗原 大輔;東山 哲也;西浜 竜一;伊藤 正樹;馳澤 盛一郎;町田 泰則;小沼健
  • 通讯作者:
    小沼健
二光子イメージングによる一対一受精機構の解明
使用双光子成像阐明一对一受精机制
  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
    水多 陽子;栗原 大輔;東山 哲也
  • 通讯作者:
    東山 哲也
顕微鏡を基盤とした初期発生におけるmRNA分解機構の比較解析
使用显微镜比较分析早期发育过程中 mRNA 降解机制
  • DOI:
  • 发表时间:
    2016
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    元村 一基;丸山 大輔;栗原 大輔;熊倉 直祐;渡邊 雄一郎;東山 哲也
  • 通讯作者:
    東山 哲也
Custom panel sequencing as a multi-faceted platform for cance genomics
定制面板测序作为癌症基因组学的多方面平台
  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    鈴木 千晴;矢部 あやか;栗原 大輔;佐藤 良勝;東山 哲也;西川 周一;Yutaka Suzuki
  • 通讯作者:
    Yutaka Suzuki

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  • DOI:
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  • 发表时间:
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Principles of Molecular Action Mechanisms in Two-Step Ovular Guidance for the Pollen Tube
花粉管两步卵引导的分子作用机制原理
  • 批准号:
    22H04980
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
Key-Molecule-Network in Plant Reproduction
植物繁殖中的关键分子网络
  • 批准号:
    22K21352
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Fund for the Promotion of Joint International Research (International Leading Research )
ブラシノステロイドの未知受容体の同定から探るステロイドホルモンの誕生と進化
通过鉴定油菜素类固醇的未知受体探索类固醇激素的诞生和进化
  • 批准号:
    21K18235
  • 财政年份:
    2021
  • 资助金额:
    $ 1.41万
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    Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
Action mechanism of bioactive sugar chain AMOR in pollen tube guidance of Torenia
生物活性糖链AMOR在蓝猪耳花粉管引导中的作用机制
  • 批准号:
    19F19091
  • 财政年份:
    2019
  • 资助金额:
    $ 1.41万
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    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
新規生理活性糖AMORの受容体同定による植物糖鎖シグナリング研究の展開
通过鉴定新型生物活性糖AMOR的受体来开展植物糖链信号传导研究
  • 批准号:
    15F15388
  • 财政年份:
    2015
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
生殖細胞の形成と受精、および初期発生の生理分子機構
生殖细胞形成、受精和早期发育的生理和分子机制
  • 批准号:
    17027006
  • 财政年份:
    2005
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
花粉管の反応性獲得を誘起する糖タンパク質の発見に基づく花粉管成熟機構の先駆的研究
基于诱导花粉管反应性获得的糖蛋白的发现,对花粉管成熟机制进行开创性研究
  • 批准号:
    17657022
  • 财政年份:
    2005
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
生殖細胞の形成と受精、および初期発生の生理分子機構
生殖细胞形成、受精和早期发育的生理和分子机制
  • 批准号:
    15031206
  • 财政年份:
    2003
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
高等植物における生殖細胞の形成と受精、および初期発生の生理分子機構
高等植物生殖细胞形成、受精和早期发育的生理和分子机制
  • 批准号:
    14036208
  • 财政年份:
    2002
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
in vitro重複受精と顕微細胞操作による高等植物の受精・初期胚形成機構の解析
利用体外双受精和微细胞操作分析高等植物的受精和早期胚胎发生机制
  • 批准号:
    13017204
  • 财政年份:
    2001
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)

相似国自然基金

授粉后短时高温糖代谢紊乱抑制玉米花粉管伸长的机制研究
  • 批准号:
  • 批准年份:
    2024
  • 资助金额:
    15.0 万元
  • 项目类别:
    省市级项目
ABA介导乙烯响应因子CoERF20调控油茶花粉管程序性死亡的机理研究
  • 批准号:
    32301638
  • 批准年份:
    2023
  • 资助金额:
    30 万元
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
酯型儿茶素介导的油茶自交花粉管生长抑制特征研究
  • 批准号:
    32371931
  • 批准年份:
    2023
  • 资助金额:
    50 万元
  • 项目类别:
    面上项目
高温下水稻花粉管伸长受阻的能量代谢调控机制
  • 批准号:
    LZ23C130001
  • 批准年份:
    2023
  • 资助金额:
    0.0 万元
  • 项目类别:
    省市级项目
番荔枝科花粉管跨心皮生长的导向机理
  • 批准号:
    32300193
  • 批准年份:
    2023
  • 资助金额:
    30.00 万元
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
DGK4介导调控梨不亲和花粉管死亡过程中液泡裂变机制
  • 批准号:
    32370340
  • 批准年份:
    2023
  • 资助金额:
    50 万元
  • 项目类别:
    面上项目
受体激酶ZmFERL4调控玉米花粉管完整性的分子机制解析
  • 批准号:
    32300307
  • 批准年份:
    2023
  • 资助金额:
    30 万元
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
Kinesin-13调控花粉管雄性生殖单位迁移的分子机制
  • 批准号:
  • 批准年份:
    2022
  • 资助金额:
    54 万元
  • 项目类别:
    面上项目
自噬相关基因PbrATG5在梨花粉管生长过程中的作用及分子机制研究
  • 批准号:
    32202434
  • 批准年份:
    2022
  • 资助金额:
    30 万元
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
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  • 批准号:
  • 批准年份:
    2022
  • 资助金额:
    30 万元
  • 项目类别:
    青年科学基金项目

相似海外基金

花粉管のリモートコントロールを実現する誘引シグナル創出ダイナミクスの研究
吸引信号产生动力学研究实现花粉管远程控制
  • 批准号:
    23K05815
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
花粉管受精様式の要となる“精細胞―栄養核複合体”輸送の分子機構の解明
阐明“精细胞-营养核复合体”运输的分子机制,这是花粉管受精的关键
  • 批准号:
    22K15147
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
Principles of Molecular Action Mechanisms in Two-Step Ovular Guidance for the Pollen Tube
花粉管两步卵引导的分子作用机制原理
  • 批准号:
    22H04980
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
植物の種認証に関わる花粉管誘引因子の機能解析と植物への新規遺伝子導入法の開発
植物物种鉴定中涉及的花粉管吸引因子的功能分析和新基因导入植物方法的开发
  • 批准号:
    22K06262
  • 财政年份:
    2022
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Mechanisms preventing of self-pollen tube growth in S-RNase-based self-incompatibility
基于S-RNase的自交不亲和性中阻止自体花粉管生长的机制
  • 批准号:
    21K06079
  • 财政年份:
    2021
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
雌蕊のボトルネック構造による花粉管選択メカニズムの解明
基于雌蕊瓶颈结构的花粉管选择机制的阐明
  • 批准号:
    20J01572
  • 财政年份:
    2020
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
A Molecular Role for Plant LINC complexes in Pollen Tube and Guard Cell Function.
植物 LINC 复合物在花粉管和保卫细胞功能中的分子作用。
  • 批准号:
    2023348
  • 财政年份:
    2020
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Standard Grant
Analysis of the molecular basis that modulates signal transduction for the tip growth of the pollen tube
花粉管尖端生长调节信号转导的分子基础分析
  • 批准号:
    20K15817
  • 财政年份:
    2020
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
Investigation of novel pollen tube guidance factors and analysis of functional diversity of guidance factors
新型花粉管引导因子的研究及引导因子功能多样性分析
  • 批准号:
    19K06706
  • 财政年份:
    2019
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Action mechanism of bioactive sugar chain AMOR in pollen tube guidance of Torenia
生物活性糖链AMOR在蓝猪耳花粉管引导中的作用机制
  • 批准号:
    19F19091
  • 财政年份:
    2019
  • 资助金额:
    $ 1.41万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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知道了