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甲状腺形成プロセスに関する分子形態学的研究-濾胞形成遺伝子の探索-

甲状腺形成过程的分子形态学研究 - 寻找卵泡形成基因 -

基本信息

批准号：
12740455
负责人：
鈴木雅一
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Shizuoka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

まず、魚類における散在性甲状腺の分布をメダカ成魚を用いて形態学的に解析した。ニワトリチログロブリン抗体を用いた免疫組織学的染色などにより、甲状腺濾胞は腹大動脈、動脈球、心臓の背側の間充織中に比較的高密度で分布すること、さらに、甲状腺濾胞は心臓背側から側方後背部にわたっても分布し、横から見ると鰓蓋の後端に沿う様に弓状に散在していることを確認した。次に、魚類甲状腺cDNAライブラリーを作成するため、大型のシロサケとニジマスを用いて甲状腺濾胞のみの採取を試みたが、散在する甲状腺濾胞をcDNAライブラリーを作成するのに十分量採取するのは困難であることが判明した。そこで、甲状腺濾胞を腹大動脈と共に採取してcDNAライブラリーを作成することとした。クローニングの結果、甲状腺に特異的な遺伝子の転写に必須な甲状腺転写因子Nkx2.1のcDNAが3種類(a, b, c)得られた。これらのNkx2.1には特徴的なホメオドメイン、TNドメイン、NK2ドメインが保存されていた。アミノ酸配列の相同性は得られた3種類のNkx2.1の間では74.0%から89.0%であった。In situ RT-PCR法により細胞レベルでのNkx2.1 mRNAの局在を調べると、甲状腺の濾胞上皮細胞にシグナルが検出された。さらにRT-PCR法によりニジマスにおける組織分布を調べると、甲状腺以外にも、濾胞様の構造をとる下垂体、鰓後腺、生殖腺等でNkx2.1 mRNAの発現が検出された。Nkx2.1は濾胞形成に関与している可能性があり、より詳細な研究が必要である。

The distribution of thyroid gland in fish is analyzed morphologically. Immunohistochemical staining of the thyroid filter cells revealed a relatively high density in the ventral arteries, arterioles, and mesenchyma of the dorsal part of the heart. The distribution of thyroid filter cells in the dorsal part of the heart, lateral posterior dorsal part, transverse part, and posterior part of the operculum was confirmed. In addition, it is difficult to identify the large and small thyroid gland cDNA fragments. The thyroid gland is composed of two parts: one part is the thyroid gland, the other part is the thyroid gland. Three types (a, b, c) of cDNA for thyroid transcription factor Nkx2.1 were identified. The Nkx2.1 version of the NK2 version is available. The identity of the acid sequence was 74.0% and 89.0% respectively. Nkx2.1 mRNA expression In thyroid epithelial cells was detected by RT-PCR. The expression of Nkx2.1 mRNA in pituitary gland, retrogill gland and gonad was detected by RT-PCR. Nkx2.1 filter cell formation and the possibility of detailed research is necessary.