アポトーシス耐性能付与による、人工臓器に適した新規有用動物細胞株の創製

通过赋予细胞凋亡抗性来创建适用于人造器官的新的有用动物细胞系

基本信息

  • 批准号:
    12750700
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.41万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2000 至 2001
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

長期間持続して利用できるハイブリッド型人工肝臓の実現を目指した。ハイブリッド型人工肝臓では、肝細胞系の細胞が用いられており、人工肝臓が長期の利用に耐えれない原因の一つにアポトーシスという細胞死を想定した。そこで、アポトーシスを抑制する遺伝子をヒト肝細胞株に導入することでアポトーシスを抑制し、肝機能の持続を目指した。前年度はBc1-2遺伝子導入で細胞死抑制を目指したが、今年度はさらなる効果を期待して、アポトーシス進行で重要な役割を果たしている酵素カスパーゼに対して、阻害的に作用するウイルス由来のタンパク質を用いて検討した。研究は、次のように実施した。肝ガン細胞株HepG2にバキュロウイルス由来のp35あるいはカウポックスウイルス由来のcrmAをリポフェクチン法で導入した。その結果、次の結果を得た。アポトーシス耐性は、温熱で誘導したアポトーシスの抑制で検討したが、p35導入株・crmA導入株いづれもアポトーシスを抑制し、その効果はBc1-2発現株を大きく上回っていた。さらに、肝機能の評価については、チトクロームP450-1A1についての薬剤除去能力を検討したところ、p35導入株は約二倍程度まで高まっていた。しかしながら、薬剤除去に関する持続性についてはBc1-2発現株が勝っていた。さらに、もう一つの重要な肝機能であるタンパク合成能としてアルブミン産生を検討したところ、やはりp35導入株は二倍以上高いアルブミン産生を示した。以上のように、ハイブリッド型人工肝臓のための有効な細胞株を樹立できた。
Over a long period of time, 続 て were used with で るハ るハ ブリッド ブリッド artificial liver to simulate を finger た. ハ イ ブ リ ッ ド type artificial liver viscera で は が の cell, liver cell lines with い ら れ て お り, artificial liver perforatien が long-term の resistance using に え れ な い reason の つ に ア ポ ト ー シ ス と い う cell death を scenarios し た. そ こ で, ア ポ ト ー シ ス を inhibit す る posthumous son 伝 を ヒ ト liver cell lines に import す る こ と で ア ポ ト ー シ ス を inhibit し, liver function の 続 を refers し た. Before annual は Bc1-2 heritage 伝 son import で cell death inhibiting を refers し た が, our は さ ら な る unseen fruit を expect し て, ア ポ ト ー シ ス で important な "を cut fruit た し て い る enzyme カ ス パ ー ゼ に し seaborne て, resistance against に す る ウ イ ル ス origin の タ ン パ ク qualitative を with い て beg し 検 た. Study ように, then ように practice た. Liver ガ ン cell line HepG2 に バ キ ュ ロ ウ イ ル ス origin の p35 あ る い は カ ウ ポ ッ ク ス ウ イ ル ス origin の crmA を リ ポ フ ェ ク チ ン method で import し た. Youdaoplaceholder0 the result of そ and the next <s:1> result of を is た. ア ポ ト ー シ ス patience は, tepid で induced し た ア ポ ト ー シ ス の inhibit で beg し 検 た が, p35 import seedlings い · crmA import づ れ も ア ポ ト ー シ ス を し, そ の unseen fruit は Bc1-2 発 strains を now big き く last っ て い た. さ ら に, liver function の 価 に つ い て は, チ ト ク ロ ー ム P450 1 a1 に つ い て の 薬 tonic ability to remove を beg し 検 た と こ ろ, p35 import strains は about double degree ま で high ま っ て い た. し か し な が ら, 薬 tonic to remove に masato す る hold 続 sex に つ い て は Bc1-2 発 now strains が wins っ て い た. さ ら に, も う a つ の important な liver function で あ る タ ン パ ク synthesis can と し て ア ル ブ ミ ン produce を beg し 検 た と こ ろ, や は り p35 import two times and high plant は い ア ル ブ ミ ン produce を shown し た. The above <s:1> ように and ハ ブリッド ブリッド artificial liver ブリッド ため <s:1> effective な cell lines を establish で た た た.

项目成果

期刊论文数量(17)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
生物工学会編集: "生物工学実験書"培風館(in press).
生物工程学会主编:《生物工程实验书》百福刊(正在出版)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
M.Kawahara: "Lysozyme-dependent proliferation switch : hematopoietic and hybridoma cell growth control with the use of antibody/gp130 chimera"Animal Cell Technology : Basic & Applied Aspects. (in press).
M.Kawahara:“溶菌酶依赖性增殖开关:使用抗体/gp130嵌合体控制造血和杂交瘤细胞生长”动物细胞技术:基础
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
S.Terada wa al.: "Establishment novel hepatoma cell line for bioartficial liver"Animal Cell Technology : From Target to Market. 541-544 (2001)
S.Terada wa al.:“建立用于生物人工肝的新型肝癌细胞系”动物细胞技术:从目标到市场。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Satoshi Terada : "Establishment novel cell line for artificial liver"Animal Cell Technology : Basic & Applied Aspects. (in press).
寺田聪:“建立新型人工肝细胞系”动物细胞技术:基础
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
K.Matsuura et al.: "Synthesis and Release of Erythropoietin by Human Amniotic Epithelial Cells"Journal of Tokyo Medical College. 59. 38-44 (2001)
K.Matsuura等人:“人羊膜上皮细胞合成和释放促红细胞生成素”东京医科大学学报。
  • DOI:
  • 发表时间:
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    0
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