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トランスジェニックマウスの成熟B細胞を用いた代替軽鎖の機能解析系の構築と応用

转基因小鼠成熟B细胞替代轻链功能分析系统的构建及应用

基本信息

批准号：
12750704
负责人：
金山直樹
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12750704/
关键词：
免疫学 B細胞 V(D)J遺伝子再構成代替軽鎖 RAG

项目摘要

本年度は、平成12年度に確立したin vitro代替軽鎖発現系を用いて、トランスジェニックマウスのB細胞での代替軽鎖の発現について検討し、また、発現細胞の由来について野生型マウスを用いて検討して、以下のような成果が得られた。1.B細胞レパトアが限定されたトランスジェニックマウスの脾臓B細胞を単離し、anti-CD40抗体およびIL-7で刺激したところ、λ5およびRAG2の発現がRT-PCR荷よって確認された。したがって、in vitroでの代替軽鎖はRAG2の発現は、マウスの系統やB細胞レパトアの大きさに関係なく起こる現象であり、トランスジェニックマウスを用いたin vitroの解析系は代替軽鎖およびRAGの機能解析に適していることが示された。2.脾臓細胞中において代替軽鎖を発現する細胞集団を同定するため、未熟B細胞に発現する抗原を認識する493抗体でB細胞を分画して、代替軽鎖の発現を検討した。単離細胞中に最初から存在する代替軽鎖発現細胞は、多くが未熟B細胞である可能性が示されたが、それらを除去したB細胞においても、in vitro刺激に依存して代替軽鎖の発現が確認されたことから、末梢成熟B細胞において代替軽鎖が発現していることが示唆された。今後、このトランスジェニックマウスを用いた代替軽鎖解析系を用いて、末梢B細胞における抗体遺伝子再構成の機構について詳細な検討をする予定である。

本年度研究，平均12个年度的体外替代造血干细胞系应用模型，替代造血干细胞系应用模型，替代B细胞系应用模型，替代造血干细胞系应用模型，替代造血干细胞系应用模型，替代造血干细胞系应用模型，以及以下替代造血干细胞系应用模型。1.B细胞免疫荧光定量分析仪检测B细胞荷瘤小鼠，抗CD 40抗体检测IL-7刺激免疫荧光，λ5抗原检测RAG2特异性RT-PCR扩增。体外分析系统中的替代疗法包括：免疫抑制剂、体外分析系统中的替代疗法RAG2、体外分析系统中的替代B细胞中的大部分肿瘤细胞产生的免疫抑制剂、体外分析系统中的替代疗法RAG。2.免疫球蛋白细胞中的抗肿瘤活性剂替代免疫球蛋白细胞集抗原同定抗体，未检测到B细胞的抗肿瘤原抗体，493抗体标记B细胞分划抗体，替代免疫球蛋白抗体。体外替代细胞中的初始替代存在替代B细胞的替代肿瘤细胞，多克隆未分化B细胞的替代可能性表现为肿瘤坏死因子，体外替代去分化B细胞的替代肿瘤细胞，体外刺激依赖于替代肿瘤细胞的替代肿瘤细胞，九成分化B细胞的替代肿瘤细胞，替代肿瘤细胞的替代肿瘤细胞，表现为肿瘤坏死因子。此外，B类细胞免疫抗体检测子再生成免疫原性。