Antigen affinity-dependent regulation of B cell antigen receptor signaling

B 细胞抗原受体信号传导的抗原亲和力依赖性调节

• 批准号: 20K05231
• 负责人: 金山 直樹
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K05231/
• 关键词: DT40; affinity; antibody; B cell receptor; 抗体; 抗原レセプター; カルシウムシグナル; 親和性

本研究では、抗原レセプターと抗原との親和性に依存したシグナル調節機構を明らかにして、生体内の抗体産生系の新規な細胞選択機構を見し、これを応用して抗原レセプターシグナルの強度を細胞生存シグナルの強度に変換し、生体内での高親和性抗体の高効率な選択機構を模倣する技術を開発する。本研究では、DT40細胞を用いて抗原への親和性に依存した抗原レセプターシグナル調節機構を解明し、この知見を利用した有用な目的抗体の高効率選択技術を開発する。抗原レセプター刺激に依存して誘導されるNR4A1 (nuclear receptor 4A1)の転写に必要なシグナル経路ついて、プロモーターに蛍光タンパク質遺伝子を連結したレポーターを用いて前年度に引き続いて詳細に関与するシグナル伝達経路について探索した。その結果、前年度までに明らかにしていたカルシニューリンだけでなく、PKC下流のMAPK経路も関与していることを明らかにした。最終的な遺伝子の発現調節領域の同定とシグナル経路の関与も解析を進めている。抗原レセプター刺激に依存して発現される遺伝子について、公的データベース上のDT40細胞を用いた関連研究のトランスクリプトーム解析データから絞り込んだ遺伝子群を、本研究の実験系において検証して発現誘導される候補遺伝子を同定した。前年度までに、これらの発現誘導には、カルシウムシグナル下流の異なるシグナル経路関与していることを見出していたが、BCRの刺激強度の違いによっても用いるシグナル経路の寄与が変化することを見出した。今後、これらの遺伝子のレポーター系を構築して、BCRの親和性認識の検出に有用な遺伝子を決定する。

This study aims to clarify the regulatory mechanism for antigen affinity, to identify new cell selection mechanisms for antibody production systems in vivo, and to develop techniques for mimicking high affinity antibody selection mechanisms in vivo by changing the intensity of antigen affinity and cell survival mechanisms. In this study, we developed a high efficiency selection technique for CD40 cells that uses antigen-dependent affinity and antigen-dependent regulatory mechanisms. Antigen stimulation depends on induction of NR4A1 (nuclear receptor 4A1), and it is necessary to develop a new pathway, and a new pathway. The results of the previous year showed that the PKC downstream MAPK pathway was closed and closed. Finally, the evolution of the gene regulatory domain is determined by the relationship between the gene and the pathway. Antigen stimulation is dependent on the development of the gene, and the public data on DT40 cells are used to study the relationship between the gene and the gene. The candidate genes for the development of the gene in this study are identified. In the past year, the occurrence and induction of BCR were different, and the stimulation intensity of BCR was different. In the future, we will construct a system for identifying and identifying useful genes for BCR affinity.

项目成果

B細胞抗原レセプターシグナル誘導性分子の発現に必要なシグナル伝達経路

B细胞抗原受体信号诱导分子表达所需的信号转导途径

• 发表时间: 2022
• 作者: 安福 希 ; 伊藤 雄大 ; 小野 和奏 ; 大塚 里美 ; 曲 正樹 ; 波多野 直哉 ; 徳光 浩 ; 金山 直樹
• 通讯作者: 金山 直樹

抗原レセプターシグナル依存的に発現するオーファンレセプターNR4A1のB細胞における発現制御機構の解明

阐明 B 细胞中以抗原受体信号依赖性方式表达的孤儿受体 NR4A1 的表达控制机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 伊藤 雄大 ; 野田 凌太郎 ; 長門 直希 ; 安福 希 ; 大塚 里美 ; 曲 正樹 ; 波多野 直哉 ; 徳光 浩 ; 金山 直樹
• 通讯作者: 金山 直樹

188抗原レセプターシグナル依存的に発現するオーファンレセプターNR4A1のB細胞における発現制御機構の解明

阐明 B 细胞中以 188 抗原受体信号依赖性方式表达的孤儿受体 NR4A1 的表达控制机制

• 发表时间: 2020
• 作者: 秋山 美咲;大森 晴斗;梶浦 雄也;石橋 朋之;久原 亜弓;曲 正樹;波多野 直哉;徳光 浩;金山 直樹;野田凌太郎，曲 正樹，徳光 浩，金山直樹
• 通讯作者: 野田凌太郎，曲 正樹，徳光 浩，金山直樹

Conformation-Dependent Reversible Interaction of Ca2+/Calmodulin-Dependent Protein Kinase Kinase with an Inhibitor, TIM-063

Ca2/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶与抑制剂 TIM-063 的构象依赖性可逆相互作用

• DOI: 10.1021/acs.biochem.1c00796
• 发表时间: 2022
• 期刊: Biochemistry
• 影响因子: 2.9
• 作者: Araya Kibrom Desta;Shuji Ohira;Ismail Arai;Kazutoshi Fujikawa;Satomi Ohtsuka;Taisei Okumura;Yuna Τabuchi;Tomoyuki Miyagawa;Naoki Kanayama;Masaki Magari;Naoya Hatano;Hiroyuki Sakagami;Futoshi Suizu;Teruhiko Ishikawa;Hiroshi Tokumitsu
• 通讯作者: Satomi Ohtsuka;Taisei Okumura;Yuna Τabuchi;Tomoyuki Miyagawa;Naoki Kanayama;Masaki Magari;Naoya Hatano;Hiroyuki Sakagami;Futoshi Suizu;Teruhiko Ishikawa;Hiroshi Tokumitsu

転写および翻訳段階におけるAID発現調節機構の解析

转录和翻译阶段AID表达调控机制分析

• 发表时间: 2021
• 作者: Yoko Matsumoto;Hideaki Ichihara;Keiji Kuwabara;大森晴斗，秋山美咲，梶浦雄也，石橋朋之，久原亜弓，大柳昇，曲正樹，波多野直哉，徳光浩，金山直樹
• 通讯作者: 大森晴斗，秋山美咲，梶浦雄也，石橋朋之，久原亜弓，大柳昇，曲正樹，波多野直哉，徳光浩，金山直樹