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脂肪酸不飽和化酵素の発現を調節する中間代謝分子の検索

寻找调节脂肪酸去饱和酶表达的中间代谢分子

基本信息

批准号：
12760091
负责人：
佐藤匡央
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

食事脂肪酸の種類と量は各種の生活習慣病の防御機構と密接な関係を有していることから、報告者は細胞内脂質バランスにおける脂肪酸の防御機構に注目してきた。脂肪酸は調節分子として、核内のレセプターと結合して遺伝子の発現に大きく関わっていることが指摘されており、またプロスタグタンジンおよびトロンボキサンといった細胞間情報伝達物質の前駆体でもある。従って、脂肪酸の諸機能を見いだすために、各種脂肪酸の合成酵素の特徴および発現の調節機構を明らかにすることは栄養学的に重要であると考えられる。報告者は、リノール酸、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸および対照として飽和脂肪酸を多く含む食事を高コレステロール血症ラットに与え、動脈硬化症状が飽和脂肪酸を与えたラットより改善されていることと、肝臓脂肪酸組成から多価不飽和脂肪酸摂食ラットでは長鎖不飽和化が遅れ、それは長鎖不飽和化酵素の律速酵素であるの活性やmRNA量の多価不飽和脂肪酸間での応答の違いによることを明らかにした。すでに報告されているがラット肝臓のΔ6不飽和化酵素mRNAは2本バンドが確認できた。また、ラツトΔ6不飽和化酵素のアミノ酸N末端配列の10残基のペプチド(BLASTの検索では相同な配列はラツトΔ6不飽和化酵素のみ存在)を合成して抗体を作成し、その抗体を用いてラット肝臓ミクロソーム中の酵素タンパク質量を測定したところ、ウェスタンブロティングにより明確な2本のバンドが得られた。このバンドを別々に解析するためにミクロソームをデオキシコール酸により可溶化し、イオン交換カラムクロマトグラフィーを用いて52kDaと46kDaのタンパク質を分離している。確認のためにΔ6不飽和化酵素mRNA量が増加する報告されているクロフィブレート系薬剤であるジェンフィブロジル投与したところmRNA量およびタンパク質量も10培増加した。さらにΔ6不飽和化酵素活性はジェンフィブロジル投与で2〜3倍有意に増加し、また抗Δ6不飽和化酵素抗体を反応させ、活性を測定すると、30%程度活性が減少した。従って本抗体はΔ6不飽和化酵素に結合していることが明らかとなった。

Food Fatty Acid Category quantity check all kinds of daily life disease prevention mechanisms are closely linked with each other, and those who report them pay close attention to the intracellular lipid metabolism and fatty acid defense mechanisms. The molecular weight of fatty acid, the molecular weight of The performance of fatty acid synthesis enzymes, fatty acid synthesis enzymes, and fatty acid synthesis enzymes is very important in the study of fatty acid synthesis enzymes. Reports of acid, fatty acid, acid, fatty acid, fatty acid, The fatty acid composition of the liver is stable and the fatty acid diet is stable and the fatty acid diet is stable, the fatty acid diet is stable, the fatty acid composition is stable and the fatty acid composition is stable. In this report, please confirm that the liver is not sensitive to Δ 6 and the enzyme mRNA. The N-terminal alignment of 10 residues (BLAST, Δ 6 and enzyme), the synthesis of antibodies, the production of antibodies, the determination of enzymes in the N-terminal of enzyme, enzyme and enzyme in the N-terminal configuration of 10 residues and the presence of enzymes in the N-terminal of the enzyme. Please make sure that you can read two copies of this book clearly. In this case, we should use the 52kDa 46kDa to separate the products from each other. Make sure that there is no change in the amount of enzyme Δ 6 and that the amount of enzyme mRNA is higher than that of the report, so that you can increase the amount of your mRNAs. The concentration of anti-Δ 6 and enzyme activity was 3 times higher than that of anti-Δ 6, anti-Δ 6 and anti-enzyme antibody, activity test and activity test. 30% of the activity is less. This antibody Δ 6 is sensitive to the combination of enzyme and enzyme.