免疫染色法による二次壁形成の周期性の確認と物性発現

使用免疫染色法确认次生壁形成的周期性和物理性质表达

• 批准号: 12760116
• 负责人: 吉田 正人
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12760116/
• 关键词: 樹木細胞壁; 二次壁肥; 二次壁形成の周期性; 免疫染色; グルコマンナン; ヘミセルロース; 仮道管; 分化中木部; 二次壁新生面

研究代表者は,樹木の分化中仮道管の二次壁新生面が,夜間は堆積中のセルロースミクロフィブリルを覆う不定形物質が多く見られ,昼間はその不定形物質は少なくセルロースミクロフィブリルが明確に観察されることを明らかにし,本研究を通じて不定形物質の特定と二次壁形成の周期性について研究してきた.本研究によって得られた成果をまとめる.1.ヘミセルロース構成多糖のグルコマンナンを分離・精製し,ウサギを介してこれに対する一次抗体を作成した.この抗体は抗原であるグルコマンナンとのみ特異的に反応することを酵素免疫測定法で確認した.2.電界放出形走査電子顕微鏡を用いた免疫電顕法に最適な観察条件と試料調整法を確立した.これにより,透過電子顕微鏡では観察が難しかった二次壁新生面での免疫電顕法が行えるようになった.3.上記一次抗体と手法を用い,夜間二次壁新生面に多く観察される不定形物質の中にグルコマンナンが多量に含まれていることを明らかにした.4.人工気象室で昼夜を逆転させた苗木においても,照明が暗い時間は二次壁新生面に多くの不定形物質が見られ,明るい時間は不定形物質が少ないことが分かった.以上の結果から,夜間二次壁新生面に観察される不定形物質は,ヘミセルロースを主体とするマトリクスであり,二次壁の肥厚をもたらす壁成分の堆積は日的な周期性を有していることが推察された.また,その周期は概日リズムではなく,光周期に対応したものであることが明らかになった.光合成活動や物質転流と二次壁肥厚の周期は関係があることが予想され,今後の研究によって,二次壁肥厚過程の解明が期待できる.

The representative researchers believe that the second wall of the channel tube in the differentiation of trees is newly formed, and the amorphous material in the accumulation at night is mostly seen, and the amorphous material in the daytime is less clearly observed. This study aims to study the periodicity of the formation of specific second wall of amorphous material. The results of this study were as follows: 1. The primary antibody was prepared by separating and refining the polysaccharide. 2. Determination of the optimal detection conditions by electron microscopy. 3. The first antibody and technique were used, and the second wall was newly discovered at night. 4. The artificial imaging chamber was used to detect the seedlings in the middle of the day and night. The illumination is dark, the time is dark, the second wall is new, the amorphous matter is bright, the time is amorphous, the amorphous matter is bright. As a result, the amorphous matter of the secondary wall was observed in the evening, and the periodic accumulation of the secondary wall components was observed. The period of light is the same as the period of light. The periodic relationship between photosynthetic activity, material flow and secondary wall thickening is expected to be clarified in the future.

项目成果

Yoshida M,Hosoo Y,Okuyama T: "Periodicity as a factor in the generation of isotropic compressive growth stress between microfibrils in cell wall formation during a twenty-four hour period"Holaforschung. 54. 469-473 (2000)

Yoshida M、Hosoo Y、Okuyama T：“周期性是二十四小时内细胞壁形成过程中微纤维之间产生各向同性压缩生长应力的一个因素”Holaforschung。

Yoshida, M., Hosoo, Y., Okuyama, T.: "Periodicity as a factor in the generation of isotropic compressive growth stress between microfibrils in cell wall formation during a twenty-four hour period"Holzforschung. 54. 469-473 (2000)

Yoshida, M.、Hosoo, Y.、Okuyama, T.：“周期性是二十四小时内细胞壁形成过程中微纤维之间产生各向同性压缩生长应力的一个因素”Holzforschung。