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遺伝子タギングによる植物の過敏感細胞死関連遺伝子の単離とその機能解析

植物过敏细胞死亡相关基因的基因标记分离及其功能分析

基本信息

批准号：
12760230
负责人：
石川敦司
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Fukui Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12760230/
关键词：
遺伝子タギング過敏感細胞死

项目摘要

申請者は今までに、シロイヌナズナのT-DNAタギングラインをスクリーニングし、病原微生物非存在下で細胞死を発現する細胞死突然変異体(lin : lesion initiation mutant)を単離してきている。現在までにlin1変異体とlin2変異体の原因遺伝子を同定した。LIN1遺伝子は葉緑体に存在するChaperonin 60β(CPN60β)を、LIN2遺伝子は葉緑体に存在するcoproporphyrinogenIII oxidase(CPO)を支配していた。CPN60βは葉緑体内でタンパク質のフォールディングに関与していると考えられている。実際、大腸菌で作成したCPN60βは、in vitroにおいてタンパク質のアグリゲーションを阻害したことから、シャペロン活性を持つことが明らかになった。またlin1変異体を高温で処理すると、野生型植物体よりも早く枯死した。これらのことから、lin1変異体においては,葉緑体におけるシャペロニン活性の低下に伴い、異常なタンパク質の蓄積が起こり、これがストレスとなり細胞死の発現を誘導していると予想された。また、CPOは葉緑体内に存在するポルフィリン合成系の酵素である。lin2変異体においては、T-DNAと融合した異常なCPO mRNAが蓄積していたことから、正常なCPOが作られず、葉緑体内にポルフィリン生合成の中間体が蓄積していると考えられた。これら中間体は、光を吸収して活性酸素を発生することから、lin2変異体においては、葉緑体における活性酸素ストレスが細胞死の発現を誘導していると予想された。

The applicant is currently investigating the presence of a T-DNA mutation and the occurrence of cell death in the absence of pathogenic microorganisms. Now, lin1 is different, lin2 is different, and the reason is different. LIN1 gene is dominated by Chaperonin 60β(CPN60β) and LIN2 gene is dominated by copro phyrinogen III oxidase(CPO). CPN60β is a chloroplast protein. In fact, the production of Escherichia coli CPN60 beta, in vitro, the quality of the release of the drug, the inhibition of the activity of the drug, the maintenance of the drug. The wild type plants died early after high temperature treatment. In addition, the accumulation of abnormal chloroplasts and the induction of cell death are also expected. CPO is an enzyme that exists in chloroplasts. Lin2 heterogeneic, T-DNA fusion, abnormal CPO mRNA accumulation, normal CPO production, chloroplast synthesis, intermediate accumulation The intermediate, light absorption, active acid production, and chloroplast production are expected to be successful.