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腸管出血性大腸菌O157のLEE遺伝子群の発現調節機構

肠出血性大肠杆菌 O157 中 LEE 基因表达的调控

基本信息

批准号：
12770148
负责人：
伊豫田淳
金额：
$ 1.28万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770148/
关键词：
腸管出血性大腸菌 LEE領域発現調節

项目摘要

腸管出血性大腸菌O157の宿主への接着過程に必須な遺伝子群は、LEE : Locus for Enterocyte Effacementにコードされている。LEE遺伝子群の発現制御を行っていると考えられる遺伝子を含むDNA断片をいくつか単離し、その塩基配列を解析したところ、そのうちの一つに機能の詳細が不明な、転写制御因子と部分的に相同性を示す遺伝子が存在することが明らかとなった。この遺伝子にカナマイシン耐性遺伝子を挿入した突然変異遺伝子をin vitroで構築して染色体上に戻し、突然変異体を単離した。LEE領域内にコードされる宿主作用因子の一つをコードするespB遺伝子の活性を測定したところ、上記の突然変異によってespBの転写発現が減少することが明らかとなった。EspBに対するモノクローナル抗体を用いてEspBの分泌量及び合成量を測定したところ、上記の突然変異の効果が再確認された。LEE遺伝子群のセントラルレギュレーターとして機能しているler遺伝子の転写発現量における上記の突然変異の効果を解析する目的で、ler遺伝子の転写調節領域を1コピーのプロモーター検出ベクターに挿入したブラスミドを作製した。このプラスミドを持たせたO157株中において上記の突然変異を導入したところ、その転写量が低下することが明らかとなった。従って、上記の突然変異によるespB遺伝子の砿写発現量の低下はler遺伝子を介した効果であることが判明した。LEE遺伝子群の発現制御を行っていると考えられる他のDNA配列を同定したところ、perC遺伝子を含むDNA断片が存在した。perCは、腸管出血性大腸菌と同じくLEE遺伝子群を保有する腸管病原性大腸菌においてlerの正の転写制御遺伝子としてすでに特徴付けがなさているが、腸管出血性大腸菌においてもlerの転写活性を正に制御していることが示唆された。

E. coli O157 must be transmitted to the host during the process of infection. LEE : Location for Enterocyte Effaction. The LEE gene group contains DNA fragments, DNA sequences, DNA sequence analysis, DNA sequence analysis, DNA sequence analysis This gene is called a mutant gene. It is called a mutant gene. It is called a mutant gene. The host action factor in LEE domain was determined by measuring the activity of espB gene, and the sudden change in espB gene expression was reduced. EspB secretion and synthesis were determined by using EspB antibody. The function of LEE gene group is to analyze the effect of sudden change in the expression quantity of LEE gene, and to control the expression of LEE gene in the expression regulation field. This is the first time I've ever seen a woman in my life. The results of the study show that the number of the negative effects of the negative effects of The DNA sequence of LEE gene group was determined by DNA fragment analysis. PerC is a member of the intestinal pathogenic E. coli family, which is characterized by the presence of LEE gene subgroup and the presence of LEE gene subgroup.