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腸管出血性大腸菌におけるタイプIII蛋白質分泌装置と鞭毛の共役発現制御機構

肠出血性大肠杆菌Ⅲ型蛋白分泌器与鞭毛的耦合表达控制机制

基本信息

批准号：
17790297
负责人：
伊豫田淳
金额：
$ 2.18万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790297/
关键词：
腸管出血性大腸菌 GrlR GrlA 鞭毛遺伝子発現制御 LEE タイプIII 蛋白質分泌装置べん毛病原性 O157

项目摘要

昨年度の研究から、腸管出血性大腸菌(EHEC) O157が保有する病原性遺伝子群であるLEE (locus of enterocyte effacement)の正の発現制御因子であるGrlAは運動器官である鞭毛の発現抑制因子であることが明らかとなった。GrlAの鞭毛レギュロンへの作用点を解析する目的で、鞭毛レギュロンの3つのクラス(クラス1-3)の代表的なオペロン(flhD,flgA,fliC)の転写調節領域とプロモーターを欠くlacZとの融合体をプラスミド上で構築し、その転写発現量をLacZの活性として測定した。その結果、GrlAは鞭毛マスターオペロンの転写抑制に作用していることが明らかとなった。この発現制御の生物学的意義を探るため、転写調節領域を除くflhDオペロン全体(flhDとflhCを含む)を発現可能な低コピープラスミドを構築し、野生型のEHEC O157株に導入した。この組換え体は鞭毛を構成的に発現するが、コントロールベクターで形質転換した野生株と比較すると、培養細胞(HeLa)への接着能が著しく低下し、LEEの機能発現に依存して起こるアクチン凝集塊も全く確認されなかった。したがって、GrlAによる鞭毛発現抑制は、EHECが細胞接着するために必須の遺伝子発現制御であると推定された。GrlAによるLEE遺伝子群の発現活性化はセントラルレギュレーターであるLerの発現上昇を介して起こるが、鞭毛レギュロンの抑制効果はler欠損株でも起こることから、この現象はLerに非依存的に起こるものと結論された。

Last year's research showed that enterohemorrhagic coliform (EHEC) O157 has a pathogenic genetic subgroup, LEE (locus of enterocyte). effacement)の正の発appearance inhibitory factor であるGrlAはmotor organ であるflagella の発appearance inhibitory factor であることが明らかとなった. GrlA's flagellum レギュロンへのaction pointをanalysisするpurposeで、flagella レギュロンなオペロン(flhD,flgA) represented by の3つのクラス(クラス1-3) ,fliC)の転WRITING REGULATION FIELDS The structure of the プラスミド was constructed, and the actual amount of LacZ activity was measured.そのRESULTS, GrlAは Flagellation マスターオペロンの転WRITE INHIBITION に Effect していることが明らかとなった. The significance of biological control of この発秺の生をExplorationるため、転WRITING the field of regulation を出くflhDオペロン全(f lhDとflhCをcontainingむ)を発appears that it is possible to construct a low-level EHEC wild-type The O157 strain was imported. The この group and the body and the flagellum are composed of the に発成するが, the コントロールベクターでmorphological change and the wild strain and the comparison すると, cultured cells ( HeLa)'s next ability is low, and LEE's functional appearance is dependent on the function and the agglomerated block is fully confirmed.したがって, GrlA によるflagellar 発appears to suppress は, EHEC がcells follow するために必の缝子発出账速度であると Presumption された. GrlA によるLEE legacy subgroup の発 Now activated はセントラルレギュレーターであるLer の発appears to rise を Introduction してrise こるが, whip The inhibitory effect of hair loss is the result of the loss of the strain and the non-dependent effect of the phenomenon.