腸管出血性大腸菌におけるタイプIII蛋白質分泌装置と鞭毛の共役発現制御機構

肠出血性大肠杆菌Ⅲ型蛋白分泌器与鞭毛的耦合表达控制机制

• 批准号: 17790297
• 负责人: 伊豫田 淳
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790297/
• 关键词: 腸管出血性大腸菌; GrlR; GrlA; 鞭毛; 遺伝子発現制御; LEE; タイプIII; 蛋白質分泌装置; べん毛; 病原性; O157

昨年度の研究から、腸管出血性大腸菌(EHEC) O157が保有する病原性遺伝子群であるLEE (locus of enterocyte effacement)の正の発現制御因子であるGrlAは運動器官である鞭毛の発現抑制因子であることが明らかとなった。GrlAの鞭毛レギュロンへの作用点を解析する目的で、鞭毛レギュロンの3つのクラス(クラス1-3)の代表的なオペロン(flhD,flgA,fliC)の転写調節領域とプロモーターを欠くlacZとの融合体をプラスミド上で構築し、その転写発現量をLacZの活性として測定した。その結果、GrlAは鞭毛マスターオペロンの転写抑制に作用していることが明らかとなった。この発現制御の生物学的意義を探るため、転写調節領域を除くflhDオペロン全体(flhDとflhCを含む)を発現可能な低コピープラスミドを構築し、野生型のEHEC O157株に導入した。この組換え体は鞭毛を構成的に発現するが、コントロールベクターで形質転換した野生株と比較すると、培養細胞(HeLa)への接着能が著しく低下し、LEEの機能発現に依存して起こるアクチン凝集塊も全く確認されなかった。したがって、GrlAによる鞭毛発現抑制は、EHECが細胞接着するために必須の遺伝子発現制御であると推定された。GrlAによるLEE遺伝子群の発現活性化はセントラルレギュレーターであるLerの発現上昇を介して起こるが、鞭毛レギュロンの抑制効果はler欠損株でも起こることから、この現象はLerに非依存的に起こるものと結論された。

Last year's cohort study ら, enterohemorrhagic escherichia coli (EHEC) O157が retained する pathogenic progeny 伝 subgroup であるLEE (locus of enterocyte) Effacement の is の 発 suppression factor now で あ る GrlA は sport organs で あ る flagella の 発 inhibitory factor now で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. GrlA の flagella レ ギ ュ ロ ン へ の point を parsing す る purpose で, flagella レ ギ ュ ロ ン の 3 つ の ク ラ ス (ク ラ ス 1-3) の represent な オ ペ ロ ン (flhD flgA, fliC) の planning, regulating field と プ ロ モ ー タ ー を owe く lacZ と の fusion を プ ラ ス ミ ド で on constructing し, そ の planning write 発 を L now acZ <s:1> activity と て て determination of た. そ の results, GrlA は flagella マ ス タ ー オ ペ ロ ン の planning write inhibit に し て い る こ と が Ming ら か と な っ た. こ の 発 now suppression の biological significance を agent る た め, planning, regulating field を except く flhD オ ペ ロ ン all (flhD と flhC を む) を 発 may now な low コ ピ ー プ ラ ス ミ ド を constructing し, wild type の EHEC O157 strains に import し た. こ の set up in え body は flagella を に 発 now す る が, コ ン ト ロ ー ル ベ ク タ ー で form quality planning in し た wild strains と compare す る と, cultured cells (HeLa) へ の can then が the し く し, LEE の function 発 に now dependent し て up こ る ア ク チ ン agglutination block も く confirm all さ れ な か っ た. し た が っ て, GrlA に よ る flagella 発 now は, EHEC が cells then す る た め に must の posthumous son 伝 発 now suppression で あ る と presumption さ れ た. GrlA に よ る LEE heritage 伝 subgroup の 発 now activeness は セ ン ト ラ ル レ ギ ュ レ ー タ ー で あ る Ler の 発 now rising を interface し て up こ る が, flagella レ ギ ュ ロ ン の inhibition of unseen fruit は Ler owe damage strain で も up こ る こ と か ら, こ の phenomenon は Ler に not dependent of に こ る も の と conclusion さ れ た.

项目成果

Detection and characterization of Shiga toxin-producing Escherichia coli in captive non-domestic mammals

• DOI: 10.1016/j.vetmic.2006.07.006
• 发表时间: 2006-11-26
• 期刊: VETERINARY MICROBIOLOGY
• 影响因子: 3.3
• 作者: Leotta, Gerardo A.;Deza, Natalia;Rivas, Marta
• 通讯作者: Rivas, Marta

The GrlR-GrlA regulatory system coordinately controls the expression of flagellar and LEE-encoded type III protein secretion systems in enterohemorrhagic Escherichia coli

• DOI: 10.1128/jb.00352-06
• 发表时间: 2006-08-01
• 期刊: JOURNAL OF BACTERIOLOGY
• 影响因子: 3.2
• 作者: Iyoda, Sunao;Koizumi, Nobuo;Watanabe, Haruo
• 通讯作者: Watanabe, Haruo

Effectiveness of pulsed-field gel electrophoresis for the early detection of diffuse outbreaks due to Shiga toxin-producing Escherichia coli in Japan.

脉冲场凝胶电泳对于早期检测日本产志贺毒素大肠杆菌引起的弥漫性疫情的有效性。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Foodborne Pathogens and Disease 3・1
• 作者: Terajima J;Izumiya H;Iyoda S;Mitobe J;Miura M;Watanabe H
• 通讯作者: Watanabe H

ClpXP protease controls expression of the type III protein secretion system through regulation of RpoS and GrlR levels in enterohemorrhagic Escherichia coli

• DOI: 10.1128/jb.187.12.4086-4094.2005
• 发表时间: 2005-06-01
• 期刊: JOURNAL OF BACTERIOLOGY
• 影响因子: 3.2
• 作者: Iyoda, S;Watanabe, H
• 通讯作者: Watanabe, H

O side chain deficiency enhances sensitivity of Escherichia coli to Shiga toxin 2-converting bacteriophages

• DOI: 10.1007/s00284-006-0139-x
• 发表时间: 2007-01-01
• 期刊: CURRENT MICROBIOLOGY
• 影响因子: 2.6
• 作者: Iguchi, Atsushi;Iyoda, Sunao;Osawa, Ro
• 通讯作者: Osawa, Ro