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腸管出血性大腸菌におけるタイプIII蛋白質分泌装置と鞭毛の共役発現制御機構

肠出血性大肠杆菌Ⅲ型蛋白分泌器与鞭毛的耦合表达控制机制

基本信息

批准号：
17790297
负责人：
伊豫田淳
金额：
$ 2.18万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790297/
关键词：
腸管出血性大腸菌 GrlR GrlA 鞭毛遺伝子発現制御 LEE タイプIII 蛋白質分泌装置べん毛病原性 O157

项目摘要

昨年度の研究から、腸管出血性大腸菌(EHEC) O157が保有する病原性遺伝子群であるLEE (locus of enterocyte effacement)の正の発現制御因子であるGrlAは運動器官である鞭毛の発現抑制因子であることが明らかとなった。GrlAの鞭毛レギュロンへの作用点を解析する目的で、鞭毛レギュロンの3つのクラス(クラス1-3)の代表的なオペロン(flhD,flgA,fliC)の転写調節領域とプロモーターを欠くlacZとの融合体をプラスミド上で構築し、その転写発現量をLacZの活性として測定した。その結果、GrlAは鞭毛マスターオペロンの転写抑制に作用していることが明らかとなった。この発現制御の生物学的意義を探るため、転写調節領域を除くflhDオペロン全体(flhDとflhCを含む)を発現可能な低コピープラスミドを構築し、野生型のEHEC O157株に導入した。この組換え体は鞭毛を構成的に発現するが、コントロールベクターで形質転換した野生株と比較すると、培養細胞(HeLa)への接着能が著しく低下し、LEEの機能発現に依存して起こるアクチン凝集塊も全く確認されなかった。したがって、GrlAによる鞭毛発現抑制は、EHECが細胞接着するために必須の遺伝子発現制御であると推定された。GrlAによるLEE遺伝子群の発現活性化はセントラルレギュレーターであるLerの発現上昇を介して起こるが、鞭毛レギュロンの抑制効果はler欠損株でも起こることから、この現象はLerに非依存的に起こるものと結論された。

In the last year's study, intestinal hemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O157 has been identified as a pathogenic gene subgroup, LEE (locus of enterocyte effacement) as a positive control factor, GrlA as a negative control factor, and flagella as a positive control factor in motor organs. To analyze the action point of the flagellum of GrlA, the activity of LacZ was measured in the three groups of the flagellum (1-3), which represented the regulatory domain of LacZ (flhD,flgA,fliC). The result is that GrlA has the effect of inhibiting the growth of plants. The biological significance of this discovery was explored, and the regulatory domain was written except for flhD and flhC, and it was possible to construct and introduce wild-type EHEC O157 strain. The development of the component flagella is dependent on the identification of aggregates in the presence of low molecular weight, low molecular weight, and low molecular weight in cultured cells. EHEC cell growth inhibition and gene growth inhibition are essential for cell growth. The activation of LEE gene expression in GrlA is mediated by the rise of Ler gene expression, and the inhibition of LEE gene expression is mediated by the rise of Ler gene expression in GrlA.