肝細胞癌におけるp53遺伝子の機能異常と生物学的特性

肝细胞癌中p53基因的功能异常及生物学特性

• 批准号: 12770269
• 负责人: 中島 智樹
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770269/
• 关键词: 肝細胞癌; yeast functional assay; p53タンパク; transdominance assay; 免疫組織化学; Yeast functional assay; P53蛋白; 増殖活性; アポトーシス; in situ end-labeling法

Yeast functional assayとtransdominance assayを行い、最終的に肝癌症例計50例についてp53タンパクの機能解析を行った。また変異型p53タンパクの発現を調べるため、従来から行われている免疫組織化学を行い、機能異常との関係についても検討した。また機能異常と診断した症例についてはdirect sequenceを行い変異の詳細を調べた。結果1.yeast functional assayの成績50例のうち21例(42%)に20%以上の赤コロニーがみられyeast functional assayのうえではp53タンパクの機能異常があるものと診断された。赤コロニーの4ケ所からDNAを抽出してシークエンスしたところナンセンス変異が4例、フレームシフト変異5例、ミスセンス変異13例(1例には単一アレルにナンセンス変異とフレームシフト変異)がみられた。2.免疫組織化学との対比ミスセンス変異の症例は全例で変異型p53タンパクが陽性であった。ナンセンス変異やフレームシフト変異の症例ではすべて陰性であった。3.transdominance assayの成績変異型p53のうち17例はrecessive mutantで、残り5例にトランスドミナンス活性があった。この5例についてはyeast functional assay上では機能異常と診断されたがtransdominance assayもあわせて考えるとタンパク全体としては機能を保持しているものと思われる。またナンセンス変異とフレームシフト変異の症例はすべてrecessive mutantであった。結論免疫組織化学でとらえられた変異型p53タンパクはすべてp53タンパクとしての機能が消失していると考えられた症例であり、免疫組織化学でとらえられなかった変異についてはなおp53タンパクの機能を保持している可能性が考えられた。

Yeast functional assay and transdominance assay are performed, and the final liver cancer case is 50 cases. Immunohistochemical examination of abnormal p53 expression, functional abnormality and relationship The diagnosis of functional abnormalities is based on a direct sequence. Results 1. The results of yeast functional assay were 50 cases, 21 cases (42%) and 20% above. 4. DNA was extracted from 4 cases, 5 cases, 13 cases (1 case). 2. Immunohistochemical analysis showed that all cases were positive for p53. The symptoms of the disease are different. 3. The transdominance assay results vary from p53 to 17 cases of recessive mutant to 5 cases of residual activity. 5 cases of abnormal function on the functional assay, diagnosis, transdominance assay, function, etc. The symptoms of the disease are recessive mutant. Conclusion Immunohistochemical examination of abnormal p53 expression suggests that the function of abnormal p53 expression is lost.