自己免疫性肝炎肝内浸潤Vβ7陽性細胞の病的意義の解明と認識自己抗原の同定

阐明自身免疫性肝炎肝内浸润Vβ7阳性细胞的病理学意义并鉴定公认的自身抗原

• 批准号: 12770282
• 负责人: 奥秋 靖
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770282/
• 关键词: 自己免疫性肝炎; T細胞受容体; 肝内浸潤T細胞; 自己抗原; HCA DR4; Vβ7

本研究の目的はHLA-A24-DR4陽性の活動性AIH症例の肝内で共通して認められるVβ7陽性T細胞のAIH発症、病態進展におよぼす意義の解析、Vβ7陽性T細胞クローンCDR3領域に共通なアミノ酸配列が認識する疾患特異的自己抗原の同定である。患者に検体の一部を本研究に用いることを説明し承諾を得て採取した検体を用い検討し以下の結果を得た。§生検肝組織由来TCR Vβ7鎖陽性T細胞クローンの樹立と性状、機能分析生検肝組織よりT細胞を分離、IL-2添加培養により増殖させVβ7鎖陽性T細胞をモノクローナル抗体を用いて選別、IL-2添加培養し生検肝組織より分離凍結保存しておいた肝細胞をフィーダーとして添加、抗原再刺激を行いクローンを樹立した。このクローンのフェノタイプ、サイトカイン産生プロファイル解析を施行したところ、CD4、CD8陽性クローンがそれぞれ60%、40%であり、またサイトカイン産生プロファイルはクローンによりさまざまで一定の傾向は認めなかった。§Far-Western法によるT細胞クローン認識抗原スクリーニングこのクローンのCDR3領域シーケンス解析を行い、クローン間で共通して認められるユニークなVβ鎖CDR3領域遺伝子産物をGSTとの結合蛋白として作成しプローブとし、抗原として肝細胞のcDNAライブラリー由来タンパクを使用しFar-Western法によりクローンの認識抗原のスクリーニングを試みた。しかし残念ながらクローン間で共通して認められるユニークなVβ鎖CDR3領域が得られなかった。§CHC患者由来肝組織移植SCIDマウスへのAIH由来T細胞クローン移入実験HLA A24-DR4陽性CHC症例の生検肝組織を移植したSCIDマウスにAIH症例の肝内浸潤T細胞クローンを移入した場合のAIH様肝病変の発症、進展を検討し、AIHの肝内浸潤T細胞認識抗原がCHCの肝細胞にも表出しているか検討したが、このモデルではAIH様の肝病変は認めなかった。

The purpose of this study was to analyze the meaning of Vβ 7 T cell AIH syndrome, V β 7 T cell AIH syndrome, V β 7 T cell disease, and CDR3 domain common active AIH disease. In this study, the results of the following results were obtained by using the results of the following results. The origins of TCR V β 7 phenotypic T cells were isolated, the functional analysis was performed, the T cells were isolated, the antibodies against V β 7 negative T cells were selected by IL-2 addition, the IL-2 was added, the liver tissue was isolated, the liver cells were isolated, and the antibodies were added. The antigen then stimulates the behavior of the mice. Please tell me that you need to use the following information: CD4, CD4, CD8, and so on. Please tell me that you have to pay attention to the health problems. In the Far-Western method, the combination of antigens, anti Antigens were isolated from cDNA cells of the liver. The Far-Western method was used to identify the antigen. I don't know what to do. I don't know what to do. I don't know what to do in the field of V β CDR3. In CHC patients with liver transplantation, SCID