長期間制御可能な炎症特異的遺伝子導入による慢性腎炎治療法の開発

开发可长期控制的炎症特异性基因转移治疗慢性肾炎的方法

• 批准号: 12770597
• 负责人: 横尾 隆
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770597/
• 关键词: 慢性糸球体腎炎; 遺伝子治療; 炎症; 骨髄幹細胞; 糸球体腎炎; Cre; loxPシステム

我々は造血幹細胞を用い、炎症系球体に遺伝子を導入することで腎炎治療が可能であるか検討してきた。まず造血幹細胞のうち単核球系に分化した細胞は、炎症部位に発現するICAM-1などの接着分子を目標に集族し活性化する性質を持つため、この特性を利用し、骨髄細胞よりICAM-1のリガンドを有する細胞を樹立し、抗炎症性サイトカイン遺伝子を導入後マウスに移植した.このマウスに実験腎炎を惹起したところ明らかな改善効果が確認された。このシステムはこれまでの遺伝子導入法と比較し、末梢血管からアクセスできることや、自家移植による低免疫源性などの利点を有し、臨床応用が期待される。そこでさらに臨床に近づけるために次に罹患糸球体のみに抗炎症効果を持たせる目的でスイッチシステム(Cre/loxP system)を導入し炎症特異性の向上が可能となることを示した。この体外分化誘導式ではアデノウイルスを用いているため非常に強い発現効率を持ち急性炎症に応用可能と判断されるが、一過性発現のため慢性炎症に対する適応を考えた場合不十分であり、長期間の導入制御可能なシステムの開発が必要となる。そこで次に造血幹細胞を自己複製、分化能を維持したままレトロウイルスを用いて抗炎症性の遺伝子を導入し、これを移植することにより骨髄を改変し担体細胞を持続的に供給するシステムの開発した。このシステムにより抗炎症性サイトカインを持った骨髄由来細胞が糸球体の炎症局所に持続的に供給され糸球体障害の進展を4ケ月間にわたって抑制しうることが証明された。これらのシステムは糸球体腎炎のみならず間質性腎炎や、腎臓以外の疾患にも応用可能と考え、広くステロイドや免疫抑制剤を連用しなければコントロールできない炎症性疾患の新たな治療戦略となりうると期待される。

I 々 を use い は hematopoietic stem cells, inflammation is a sphere に heritage 伝 son を import す る こ と が で nephritis treatment may で あ る か beg し 検 て き た. ま ず hematopoietic stem cells の う ち 単 nuclear ball is に differentiation し は た cells and inflammation に 発 now す る ICAM - 1 な ど の then target を に set し activeness す る nature を hold つ た め, こ の features using を し, bone marrow cells よ り ICAM - 1 の リ ガ ン ド を have す る cells を し, anti inflammatory サ イ ト カ イ ン heritage 伝 son を マ after import ウ ス に transplantation し た. こ の マ ウ ス に be 験 nephritis を provoked し た と こ ろ Ming ら か な improve working fruit が confirm さ れ た. こ の シ ス テ ム は こ れ ま で の heritage 伝 と compare し import method, peripheral vascular か ら ア ク セ ス で き る こ と や, their transplantation に よ る low immune source sex な ど の tartness を し, clinical 応 が expect さ れ る. そ こ で さ ら に clinical に nearly づ け る た め に に times suffer from si sphere の み に anti-inflammatory unseen fruit を hold た せ る purpose で ス イ ッ チ シ ス テ ム (Cre/loxP system) を import し inflammation specificity の が up may と な る こ と を shown し た. こ の differentiation in vitro induction で は ア デ ノ ウ イ ル ス を with い て い る た め very strong に い に を hold ち 発 now working rate of acute inflammation may と 応 use to judge さ れ る が, transient 発 is の た め chronic inflammation に す seaborne る optimum 応 を exam え た occasion not quite で あ り, long-term の import suppression may な シ ス テ ム の open 発 が necessary と な る. そ こ で に hematopoietic stem cell を し they copy, can divide を maintain た ま ま レ ト ロ ウ イ ル ス を with い て anti inflammatory の heritage 伝 を import し, こ れ を transplantation す る こ と に よ り bone marrow を change - somatic を し bear hold 続 に supply す る シ ス テ ム の open 発 し た. こ の シ ス テ ム に よ り anti inflammatory サ イ ト カ イ ン を hold っ た inflammation cells of bone marrow origin が si sphere の bureau に hold 続 に supply さ れ si sphere handicap of の progress を ケ 4 months に わ た っ て inhibit し う る こ と が prove さ れ た. こ れ ら の シ ス テ ム は si sphere nephritis の み な ら ず interstitial nephritis や, kidney viscera beyond の disorders に も 応 with possible と え, hiroo く ス テ ロ イ ド や immunosuppression laparoscope, usually connected to a tonic を し な け れ ば コ ン ト ロ ー ル で き な い inflammatory disorders の new た な treatment 戦 slightly と な り う る と expect さ れ る.

项目成果

Takashi Yokoo: "Anti-GBM glomerulonephritis in mice lacking IL-1β-converting enzyme(ICE)"Clinical Experimental Nephrology. 4. 114-118 (2000)

Takashi Yokoo：“缺乏 IL-1β 转换酶（ICE）的小鼠的抗 GBM 肾小球肾炎”临床实验肾病学。 4. 114-118（2000）。

Takashi Yokoo: "Inflamed glomeruli-specific gene activation using recombinant adenovirus with Cre/loxP system"Journal of American Society of Nephrology. 11. 2330-2337 (2001)

Takashi Yokoo：“使用具有 Cre/loxP 系统的重组腺病毒激活炎症肾小球特异性基因”美国肾脏病学会杂志。

Takashi Yokoo: "Genetically modified-bone marrow continuously supplies anti-inflammatory cells and suppresses renal injury in mouse Goodpasture syndrome"Blood. 98. 57-64 (2001)

Takashi Yokoo：“转基因骨髓持续供应抗炎细胞并抑制小鼠古德帕斯彻综合征的肾损伤”血液。

Takashi Yokoo: "Genetically modified-bone marrow continuously supplies anti-inflammatory cells and supresses renal injury in mouse Goodpasture syndrome"Blood. (in press).

Takashi Yokoo：“转基因骨髓持续供应抗炎细胞并抑制小鼠古德帕斯彻综合征的肾损伤”血液。

Takashi Yokoo: "Transplantation-based gene therapy for chronic inflammation : Focus on the glomerulonephritis"Current Gene Therapy. 1. 227-235 (2001)

Takashi Yokoo：“基于移植的慢性炎症基因疗法：关注肾小球肾炎”当前的基因疗法。