レチノイドによる中枢性甲状腺機能低下症の病態生理の解明

阐明类维生素A引起的中枢性甲状腺功能减退症的病理生理学

• 批准号: 12770616
• 负责人: 佐藤 哲郎
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770616/
• 关键词: レチノイド; TSH; TRH; 甲状腺ホルモン; 中枢性甲状腺機能低下症; RAR; mRNA; 転写

皮膚T細胞リンパ腫治療目的に投与されたretinoid X'receptor(RXR)選択的リガンドが、下垂体TSHの合成をTSHβsubunit遺伝子promoter領域に存在すると予測されるnegative regulatory elementを介して転写レベルで抑制することにより二次性甲状腺機能低下症を引き起こすことが報告された。しかし、レチノイドが視床下部TSH放出ホルモン(thyrotropin-releasing hormone ; TRH)の合成、分泌に影響を及ぼすか否か不明であり、生体内でLGD346がTSHβ遺伝子に対する作用のみならず視床下部TRH遺伝子の発現を直接抑制することによって三次性甲状腺機能低下症をきたす可能性も考えられる。本研究では、まずall-trans-retinoic acid(atRA)ならびに9-cis-RAの視床下部TRH合成に及ぼす影響を検討した。8週齢雄マウスに100 μg/kgのall-trans-RAないしは9-cis-RAを14日間腹腔内投与後、血中TSHならびtotal T4レベルをRIA法で測定し、下垂体TSHβ mRNAならびに前視床下部TRH mRNAをNorthern blot法にて解析した。陽性コントロール群として100 μg/kgのtri-iodothyronine(T3)を3日間投与した群について同様に解析した。その結果、atRA群において、有意なTSHならびにT4値の低下を認めた。更に、同群において下垂体TSH mRNAならびに前視床下部TRH mRNAレベルにも有意な減少が認められた。9-cis-RA群においても同様に減少傾向を認めたが、有意差を認めなかった。一方、atRA群のTSH、T4の減少はT3群に比較して弱かった。次に、ヒトTRH遺伝子promoterをluciferase reporterに接続したplasmidをリン酸カルシウム法にてCV-1細胞に遺伝子導入し、そのpromoter活性に及ぼすatRAの影響をRAR発現ベクターをcotransfectionして検討した。-900/+51, -500/+51, -170/+51の3種類のTRH promoter constructにおいてRARのcotransfectionにより、promoter活性が刺激され、100μM atRA添加によりpromoter活性が抑制された。RXRのcotransfectionはpromoter活性を増強したが、9-cis-RAによる抑制効果を認めなかった。また、RARα, β, γによる抑制機能の違いは認められなかった。以上の結果よりatRAは、下垂体TSHに加えて、視床下部TRHの発現も転写レベルで抑制することが示唆され、その抑制効果はT3に比較して明らかに弱いことが判明した。

Skin T cells リ ン パ swelling treatment purpose に cast and さ れ た 'retinoid X receptor (RXR) of sentaku リ ガ ン ド が, synthetic を pituitary TSH の TSH beta subunit heritage 伝 son に promoter field exist す る と be さ れ る negative regulatory Element を interface し て planning write レ ベ ル で inhibit す る こ と に よ り secondary sexual thyroid function lowly disease を lead き こ す こ と が report さ れ た. The TSH in the lower part of the optic bed releases ホ モ モ <e:1> (thyrotropin-releasing hormone). TRH) synthesis and secretion of の に influence を and ぼ す か no か unknown で あ り, born in vivo で LGD346 が TSH beta heritage 伝 son に す seaborne る role の み な ら ず depending on the bed bottom traces of TRH 伝 son の 発 を now directly inhibit す る こ と に よ っ て three sex thyroid function lowly disease を き た す possibility も exam え ら れ る. In this study, で で, まずall-trans-retinoic acid(atRA)ならびに9-cis-RA the synthesis of TRH in the lower part of the <s:1> retinoic bed に and its ぼす effects を検 explore た. Eight weeks 齢 male マ ウ ス に 100 mu g/kg の all - trans - RA な い し は 9 - cis - 14 day after intraperitoneal cast with RA を, serum TSH な ら び total T4 レ ベ ル を で with RIA method し, pituitary TSH beta mRNA な ら び に front bed bottom TRH mRNAをNorthern blot にて analysis of た. Positive コ ン ト ロ ー ル group と し て 100 mu g/kg の tri - iodothyronine (T3) を cast with 3 day し た group に つ い て with others に parsing し た. Youdaoplaceholder0 そ result, atRA group にお て て, intentional なTSHならびにT4 value <s:1> lower を recognition めた. More に, with group に お い て pituitary TSH mRNA な ら び に front bed bottom TRH mRNA レ ベ ル に も intentionally な reduce が recognize め ら れ た. The 9-cis-RA group にお て て に is similar to に reduction tendency を recognition めたが and intentional difference を recognition めな った った. In the atRA group, the <s:1> TSH and T4 groups decreased, while in the T3 group, the に was weaker than the て and った. Youdaoplaceholder0, ヒトTRH remains 伝 promoterをluciferase Reporter に meet 続 し た plasmid を リ ン acid カ ル シ ウ ム method に て CV - 1 cell に heritage 伝 import し, そ の に promoter activity and ぼ す atRA の influence を RAR 発 now ベ ク タ ー を cotransfection し て beg し 検 た. -900/+51, -500/+51 -170/+51 samples of three types of <s:1> TRH promoter constructにお て てRAR <s:1> cotransfectionによ, promoter activity が stimulation され, 100μM atRA added によ <s:1> promoter activity が inhibition された. The activity of RXR <s:1> cotransfection <s:1> promoter is を enhanced by たが, and the inhibitory effect of 9-cis-RAによる is を confirmed by めな った った. The inhibitory function of また, RARα, β, γによる is the most appropriate to められな った. の above results よ り atRA は, pituitary TSH に え て, depending on the bed bottom TRH の 発 も now planning to write レ ベ ル で inhibit す る こ と が in stopping さ れ, そ の inhibition of unseen fruit は T3 に compare し て Ming ら か に weak い こ と が.at し た.

项目成果

Ishizuka T., Satoh T., Monden T., Yamada M., Mori M. et al.: "Human Immunodeficiency Virus Type I Tat Binding Protein-1 Is a Transcriptional Coactivator Specific for TR."Molecular Endocrinology. 15. 1329-43 (2001)

Ishizuka T.、Satoh T.、Monden T.、Yamada M.、Mori M. 等人：“人类免疫缺陷病毒 I 型 Tat 结合蛋白-1 是 TR 特异性的转录辅激活因子。”分子内分泌学。

佐藤 哲郎, 森 昌朋: "Vitamin A, Retinoids and Pituitary-Thyroid Function."ホルモンと臨床、特集 分子甲状腺学の進歩. 50. 157-160 (2002)

Tetsuro Sato，Masatomo Mori：“维生素 A、类维生素A 和垂体甲状腺功能。”特刊：分子甲状腺学进展 50. 157-160 (2002)

Satoh T., Toyoda M., Monden T., Yamada M., Mori M. et al.: "Activation of Peroxisome Proliferator-activated Receptor γ Stimulates the Growth Arrest and DNA-damage Inducible 153 Gene in Non Small Cell Lung Cancer Cell s."Oncogene(in press). (2002)

Satoh T.、Toyoda M.、Monden T.、Yamada M.、Mori M. 等人：“过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 的激活刺激非小细胞肺癌细胞中的生长停滞和 DNA 损伤诱导型 153 基因s.“癌基因（待出版）。（2002）