c-erbB-2産物を分子標的としたHerceptinとRNaseによる新抗癌剤

一种使用赫赛汀和 RNase 的新型抗癌药物，分子靶向 c-erbB-2 产品

• 批准号: 12770667
• 负责人: 宮部 理香
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770667/
• 关键词: conjugate; 乳癌; herceptin; Rvase; c-erbB-2産物

Herceptinはc-erbB2産物を認識するヒト化モノクローナル抗体であり、免疫原性が低く副作用も少ないことが報告されており、米国では乳癌臨床例へも応用されている。しかし、herceptinのみではその効果は未だ満足すべきものではなく今回われわれはherceptinにRNA分解酵素であるRNaseを結合させることによりその効果を増強させることを試みた。今年度は、ロッシュより供与を受けたherceptinとわれわれの共同研究者である岡山大学工学部妹尾助教授により産生・精製されたRNaseにSPDPと3-iminothiolaneによりそれぞれにSH基を導入したのち両者をS-S結合により結合させた。G-25でゲル濾過を行いconjugateとそれぞれの単体を分離・精製した。その後、フィルターにて滅菌して実験に供した。殺細胞効果の検討には乳癌細胞株でc-erbB2過剰発現しているSK-BR-3、MDA-MB-361、低発現株MCF-7等を使用した。効果の判定はMTTアッセイ法にて行った。プレートに培養細胞を一定量散布し3日後に、conjugate、RNaseまたはherceptin単独、RNaseとhercepttin両者の混合物を添加し、その殺細胞効果を測定した。3種類の乳癌細胞株いずれでもconjugateにより殺細胞効果が認められた。SK-BR-3に関しては種々の条件で実験を行った結果、Herceptin単独もしくはRNaseとの共培養でも殺細胞効果は認められたが、conjugateで最も強力であり、RNase単独では全く殺細胞効果は認められなかった。以上、RNaseがherceptinの効果増強に有用であることが示唆された。

Herceptin, c-erbB2 product, recognition, antibody, immune system The original low side effects and side effects of the disease are reported by the company, and the clinical cases of breast cancer in the United States are used by the company.しかし、herceptinのみではその Effect は不だ満足すべきものではなくthis turn われわれはherce ptinにRNA decomposing enzymeであるRNaseをcombinationさせることによりそのeffectを Increase strengthさせることをtestみた. This year's は, ロッシュよりprovided and received けたherceptin とわれわれの co-researcher であるAssistant Professor Meio, Faculty of Engineering, Okayama University, produced and refined されたRNaseにSPDPと3-iminothiolaneによりそれぞれにSH-based を Import したのち両者をS-S combined によりcombination させた. G-25 is filtered and conjugated, separated and refined.その后、フィルターにてSterilizationして実験にSupplyした. The cytocidal effect has been verified by using c-erbB2-containing breast cancer cell lines such as SK-BR-3, MDA-MB-361, and low-risk cell lines MCF-7. The judgment of the effect is based on the MTT method. The cultured cells were dispersed in a certain amount for 3 days, conjugate, RNase herceptin alone, RNase herceptin mixture was added, and the cell killing effect was measured. Three types of breast cancer cell lines are conjugated and have a cytocidal effect. SK-BR-3 is closed, the conditions are the same, the results are the same, Herceptin is the only one, and the RNase is co-cultured and killed. The cell-killing effect is the best, the conjugate is the most powerful, and the RNase is the only one that has the best cell-killing effect. Above, the effect of RNase herceptin is enhanced and it is useful.