悪性脳腫瘍におけるリボザイムを用いた薬剤耐性遺伝子の発現制御

使用核酶调节恶性脑肿瘤中的耐药基因表达

• 批准号: 12770742
• 负责人: 高橋 和孝
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Akita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770742/
• 关键词: MGMT; O^6-benzylguanine; ACNU; 薬剤耐性; リボザイム

ACNUなどのアルキル化学療法剤で形成したアルキル基の修復酵素であるMGMTを腫瘍組織内で局所抑制することを目的として、O^6-benzylguanineに徐放効果を与えて投与し、in vivoにおけるMGMTの発現制御とニトロソウレア剤に対する感受性変化の検討を行った。生後7週齢のオスヌードマウスにラットグリオーマ株C6細胞皮下腫瘍モデルを作成し、皮下腫瘍の体積が1000mm^2を超えた時期に腹腔内麻酔下で皮下腫瘍の一部を摘出し、摘出腔にO^6-benzylguanineを溶解したフィブリン糊を移植した。実験ではO^6-benzylguanineのみの移植モデルであるcontrol群とO^6-benzylguanineとACNUとの併用療法で治療した群で比較した。O^6-benzylguanineとACNUを併用した群で移植腫瘍の成長が鈍化し、フィブリン移植部位では周囲の腫瘍増殖抑制がみられ、腫瘍はドーナツ状を呈したものの、腫瘍体積では統計学的には有意差は得られなかった。経時的なMGMT活性の変化を観察して、フィブリン溶解O^6-benzylguanineの徐放性確認を免疫組織化学法でMGMT染色を行って検討しているが結論は得られておらず、今後の課題となった。また、リボザイムを用いた薬剤耐性遺伝子の発現制御実験では最も効率的にMGMTmRNAを切断する転写開始部位に対するハンマーヘッド型リボザイムを自己切断型への改良中である。

ACNU's chemotherapeutics have been used to investigate the formation of MGMT, its inhibition in tumor tissues, and the effects of O6-benzylguanine on the formation of MGMT in vivo. At 7 weeks after birth, the subcutaneous tumor of C6 cells was prepared, and the volume of subcutaneous tumor was 1000 mm^2. At the time of overgrowth, a part of subcutaneous tumor in abdominal cavity was extracted and dissolved by O^6-benzylguanine. The combination therapy of O^6-benzylguanine and ACNU was used to compare the therapeutic effects of O^6-benzylguanine and ACNU. The combination of O^6-benzylguanine and ACNU resulted in a significant increase in tumor growth and tumor volume at the graft site. The activity of MGMT was examined by immunohistochemistry, and the activity of O^6-benzylguanine was confirmed by immunohistochemistry. The expression of MGT mRNA is the most efficient in the development of MGT mRNA.