大麻ポリケタイド合成酵素の構造機能研究

大麻聚酮合酶的结构与功能研究

• 批准号: 12780441
• 负责人: 田浦 太志
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780441/
• 关键词: 大麻; ポリケタイド; cDNA; クローニング; olivetolic acid; ポリケタイド合成酵素

大麻ポリケタイド合成酵素(OLAS)のcDNAクローニング研究代表者は平成12年度に新規ポリケタイド合成酵素PKS1のcDNAクローニングに成功した。しかしながら大腸菌サイトゾルで発現させた組み換えPKS1は大麻成分のolivetolic acidではなく、その脱炭酸体のolivetolを合成した。この原因として発現システムが不適切であった可能性を考え、本年度は種々の発現システム(大腸菌ペリプラズム、酵母、植物発現系など)を用いて組み換え酵素を調製した。この結果、ペリプラズムで発現したPKS1が効率良くolivetolic acidを合成することを確認し、PKS1をolivetolic acid合成酵素(OLAS)と命名した。本酵素がサイトゾルとペリプラズムで異なる活性を示した原因については現在検討を行っている。OLASの構造機能研究OLASの構造機能研究を行うに当たり、X線解析を行うに十分な量の組み換え酵素が得られなかったため、モデリングにより立体構造の推定を行った。すべての植物ポリケタイド合成酵素に保存された数個のアミノ酸残基がOLASの活性部位と推定される領域に保存されていたことから、これらに点変異を導入してアッセイを行い、これらがOLASの反応にも重要な役割を果たすことを確認した。現在はOLASの活性部位のみに特徴的なアミノ酸への点変異導入を検討しており、これにより反応の特徴を決定するアミノ酸残基を決定する予定である。

The representative of research on hemp synthetic enzyme (OLAS), cDNA synthesis enzyme (PKS1), cDNA enzyme, hemp synthetic enzyme, hemp synthetic enzyme, hemp, cDNA, hemp, hemp. The components of hemp, PKS1, olivetolic acid, and decarbonate, olivetol, synthesize, were detected. The reason for this is that there is a study on the possibility of continuous reduction of bacteria. This year, several kinds of bacteria (strains of bacteria, yeast, and plant strains) have been detected in this year, and the enzyme enzyme has been used in this year. The results showed that the PKS1 positive rate was good, the olivetolic acid synthesis was confirmed, and the olivetolic acid synthesis enzyme (OLAS) was named. This enzyme shows the activity of the enzyme in the presence of various factors. OLAS machine can be used to study OLAS machine. X-ray analysis can be used to determine the amount of enzyme in the system. It can be used to predict the accuracy of stereoscopic imaging. The active parts of several OLAS residues are presumed to be stored in the field of plant chemical synthesis enzymes, and the active parts are presumed to be stored in the field. They are not allowed to enter the health care industry, and the OLAS products are used to ensure that the important products are harvested. Now, in the active part of OLAS, the acid residue is determined by the acid residue determination, the acid residue determination is determined by the acid residue determination.