哺乳類胚輸送における透明帯分子の役割に関する萌芽的研究

透明带分子在哺乳动物胚胎运输中作用的探索性研究

• 批准号: 13876061
• 负责人: 東條 英昭
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13876061/
• 关键词: マウス; 胚; 卵管輸送; 透明帯; ZP; ZP抗体; IVF

本研究は、哺乳類卵管内における胚の輸送がどのような分子機構によって支配されているのかの手がかりを得るために行ったものである。1)マウスの卵管膨大部から1細胞期胚を採取し体外で発生させた2細胞期胚、屠畜卵巣卵胞から採取し、体外成熟、体外受精、体外発生させた2細胞期のウシ胚である。これらの胚を、精管結紮雄に交配後約12時間経た偽妊娠ICRマウスの卵管口にキャピラリーを用いて移植した。移植後5日ないし7日に卵管および子宮を摘出し、卵管-子宮接合部の数ミリ上部を切断・分離し、かん流した後、顕微鏡下で回収された胚の種類と数を観察ならびに測定した。移植したウシ胚の子宮への到達率を調べた計23回の実験の結果、ウシ胚を移植して、卵管から平均60±23%が、一方、子宮からは平均4±10%が回収され、ほとんどのウシ胚が卵管に留まっていることが認められた(P<0.001)。2)このようなウシ胚の卵管内滞留が、移植操作による物理的ストレスに起因している可能性も考えれることから、つぎに、2細胞期のマウス胚とウシ胚とを混合して卵管に移植し、それらの子宮への到達率を調べた。その結果、卵管かん流により、平均52±35%のウシ胚が、また、平均5±0%のマウス胚がそれぞれ回収された。これに対して、子宮かん流からは、2±6%のウシ胚と平均35±31%のマウス胚ならびに着床痕が確認された。3)これらの異種胚の卵管輸送の違いの分子機構を知るために、ZP抗体をマウス胚に作用させた実験を行った結果、マウス透明帯に発現しているZP-2や糖質(グルシド)が種特異的胚の輸送に重要な役割を果たしていることが認められた。

This study は, mammals egg tube に お け る embryo の conveying が ど の よ う な molecular institutions に よ っ て dominate さ れ て い る の か の hand が か り を must る た め に line っ た も の で あ る. 1) マ ウ ス の egg tube) department か ら phase 1 cells in vitro embryo を take し で 発 raw さ せ た 2 cell stage embryos, tu animal eggs 巣 follicle か ら し, in vitro maturation, in vitro fertilization (ivf), in vitro 発 さ せ た phase 2 cells の ウ シ embryo で あ る. こ れ ら の を, deferent duct ligation mated male に about 12 time 経 た pseudo pregnancy ICR マ ウ ス の eggs nozzle に キ ャ ピ ラ リ ー を with い て transplantation し た. 7 5 after transplantation な い し に egg tube お よ び uterine を pick out し, egg number of - uterine joints の ミ リ upper を cut separation し, か ん flow し た, 顕 micro mirror after で back 収 さ れ た embryo number の kinds と を 観 examine な ら び に determination し た. Transplant し た ウ シ embryo の uterus へ の arrival rate を adjustable べ た meter back to 23 の be 験 の results, ウ を シ embryo transplantation し て, egg か ら average 60 plus or minus 23% が, one party, uterus か ら は 4 + / - 10% on average が back 収 さ れ, ほ と ん ど の ウ シ embryo が egg tube に leave ま っ て い る こ と が recognize め ら れ た (P < 0.001). 2) こ の よ う な ウ シ germ tube stranded が の eggs, migration に よ る physical ス ト レ ス に cause し て い る possibility も exam え れ る こ と か ら, つ ぎ に, 2 cell stage の マ ウ ス embryo と ウ シ embryo と を mixed し て eggs し に transplantation, そ れ ら の uterus へ の arrival rate を adjustable べ た. そ の results, egg か ん flow に よ り 52 plus or minus 35%, average の ウ シ が, ま た, average 5 plus or minus 0% の マ ウ ス embryo が そ れ ぞ れ back 収 さ れ た. こ れ に し seaborne て, uterus か ん flow か ら は, 2 + / - 6% の ウ シ embryo と average 35-31% の マ ウ ス embryo な ら び に implantation mark が confirm さ れ た. 3) こ れ ら の heterogeneous embryos の eggs pipe の violations い の molecular institutions を know る た め に, ZP antibody を マ ウ ス embryo に role さ せ た be 験 を line っ た results, マ ウ ス transparent 帯 に 発 now し て い る ZP - 2 や sugar (グ ル シ ド) が species specific embryo の conveying important な に "を cut fruit た し て い る こ と が recognize め ら れ た.

项目成果

Kubo J: "Expression of the gene of interest fused to the EGFP-expressing gene in transgenic mice drived from selected transgenic embryos."J.Exp.Zool.. 293. 712-718 (2002)

Kubo J：“在由选定的转基因胚胎驱动的转基因小鼠中，与 EGFP 表达基因融合的感兴趣基因的表达。”J.Exp.Zool.. 293. 712-718 (2002)

Nishino K: "Matrix metalloproteinases regulate mesonephric cell migration in developing XY gonads which correlates with the inhibition of tissue inhibitor of metalloproteinase-3 by Sry"Dev Growth Differ.. 44. 35-43 (2002)

Nishino K：“基质金属蛋白酶调节发育中的 XY 性腺中的中肾细胞迁移，这与 Sry 对金属蛋白酶-3 组织抑制剂的抑制有关”Dev Growth Differ.. 44. 35-43 (2002)

Yokouchi K: "Stage-specific regulatory element of mouse Sry gene"Mol Reprod Dev. 64. 389-396 (2003)

Yokouchi K：“小鼠 Sry 基因的阶段特异性调控元件”Mol Reprod Dev.

∪ekita T.: "Expression of membrane-type 1 matrix metalloproteinase (MT1-MMP) mRNA in trophoblast and endometrial epithelial cell populations of the synepit heliochorial placenta of goats(Capra hircus)"Arch Histollogical Cytology. 64. 411-424 (2001)

∪ekita T.：“山羊 (Capra hircus) 胎盘滋养层和子宫内膜上皮细胞群中膜型 1 基质金属蛋白酶 (MT1-MMP) mRNA 的表达”Arch 组织学细胞学 64. 411-424 (2001)。 ）

Ito M: "In vitro Cre/loxP system using the cells from developing gonads : Investigation of the Sry promoter"Develop Growth Differ.. 44. 549-557 (2002)

Ito M：“使用发育中性腺细胞的体外 Cre/loxP 系统：Sry 启动子的研究”Develop Growth Differ.. 44. 549-557 (2002)