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遺伝子導入によるトランスジェニック家畜の応用に関する基礎的研究

基因导入转基因家畜应用基础研究

基本信息

批准号：
63480078
负责人：
東條英昭
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Toyama Medical and Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至 1990
项目状态：
已结题

项目摘要

平成元年度において,乳腺で特異的に発現するマウスホエ-酸性蛋白(mWAP)遺伝子のプロモ-タ-領域とヒト成長ホルモン(hGH)遺伝子の構造遺伝子領域とを連結したmWAP/hGH融合遺伝子(4.6kb)を,受精卵前核にDNAを注入する方法によって導入したTgマウスを得た。ついで,それらの子孫をとり,雌マウスが10週令時に達した時点で,通常の雄マウスと交配し,妊娠,分娩させ,分娩10〜12日目に,手製のマウス用搾乳器で乳汁を採取した。一方,哺乳中のTgマウスから,血液や乳腺組織を採取した。平成2年度では,採取した試料について,乳汁及び血中のhGH濃度を,ELISA法により測定を試みたが,測定感度等に問題があったため,信頼すべき結果が得られなかった。そこで,測定法をRIA法に変更し測定した。その結果,最初に得られたTgマウスの2匹において,血中hGH濃度がヒト血中濃度の3〜5倍を示した。現在,乳汁中のhGH濃度について測定準備中である。一方,乳腺組織におけるmWAP/hGH遺伝子の転写レベルでの発現を調べるために,乳泌中の乳腺組織からmRNAを抽出し,ノ-ザン法によって解析をすすめている。現在,種々の試料について測定をすすめている段階であるため,結論的な結果を得るに到っていない。しかし,本年4月下旬頃には,全ての試料の解析を終了する予定である。今後は,当Tgマウスを駆使して,異所性組織におけるホルモンの分泌機構についても解析をすすめる計画である。さらに,導入する遺伝子の構造遺伝子として、成長ホルモン遺伝子以外のものについても検討する計画である。

During the whole year, the breast cancer cell was successfully injected into the fertilized egg by the method of injecting DNA into the zygote Tg fusion cell (4.6kb), which was successfully injected into the prezygote nucleus of the fertilised egg. When the time of 10 minutes is too late, the time for women to mate, pregnancy, pregnancy, delivery, 10-12 days of delivery, and the age of 10-12 days of delivery. On the one hand, the breast-feeding Tg was damaged, and the breast tissue was collected from the blood. During the year of Pingcheng, we collected the concentration of hGH in milk and blood, ELISA method to determine the temperature, sensitivity and other problems. the results showed that the results were satisfactory. The RIA method is used to determine the accuracy of the test. The results showed that there were 2 Tg titers in the first time, and the blood hGH concentration was 3 to 5 times higher than that in the blood. Now, the hGH concentration in milk is in preparation for determination. On one side, the breast tissue