コラーゲン誘発関節炎マウスにおける脳内urocortin発現と関節炎発症との関連

胶原诱导关节炎小鼠脑尿皮质素表达与关节炎发病的关系

• 批准号: 13877250
• 负责人: 大西 英生
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877250/
• 关键词: urocortin; CIAマウス; 脳; 関節

9週齢のDBA1/Jマウスを用い、コラーゲン誘発関節炎(CIA)マウスと対照マウスを作成した。それぞれ3匹に対し、屠殺後脳を摘出した。urocortin(ucn)が局在する視床下部神経核である、視索上核(SON)、室傍核(PVN)および正中隆起(ME)の部分を、ミクロトームで厚さ40μmの連続標本を作成した。ucn抗体を用いてABC法で脳標本の免疫組織染色を行った。MEでのみ染色陽性を示したが、対照群と比較すると差がなかった。次に、脱灰後パラフィン包埋した膝関節の10μm薄切標本をucn抗体で染色した。滑膜組織と軟骨下骨に存在した多数の多核巨細胞に染色陽性が認められたが、対照群との差はなかった。つづいて、近年同定されたurocortinII(ucnII)に着目し、脳および膝関節への分布を検索した。CIAマウス3匹、対照マウス3匹を用い、脳および膝関節の薄切切片を抗ucnII抗体を用いて染色した。CIA群のPVNでわずかに染色陽性を認めたが、その他の脳内神経核、膝関節周囲では対象群と同様に陽性反応はなかった。さらに、アジュバント関節炎ラットを用いてucnの脳での分布を調べた。抗原接種後8日(関節炎発症前)、14日後(発症後)のラットを用いて検討した。脳の40μmの薄切切片をucn抗体で染色した。SONとMEのみ8日、14日後とも両群で染色陽性を示したが、対照群との差はなかった。SONでは細胞周囲の神経繊維が強く染色されていた。現在、膝関節の免疫組織染色を行い、ucnの発現を検討中である。今回免疫組織染色にてucnの存在が確かめられた脳神経核では、今後in situ hybridization法を用いてmRNAレベルで再評価する予定である。

9 weeks ago DBA1/J was created. The three women were killed and the two women were killed. Urocortin(ucn) is located in the hypothalamus, suprachordal nucleus (SON), paraventricular nucleus (PVN) and median eminence (ME). UCN antibody was detected by ABC method. The difference between the positive staining and the negative staining is obvious. Next, after deashing, the 10μm thin cut of the knee joint was embedded and stained with ucn antibody. Most of the multinucleated giant cells in the synovial tissue were positive for the presence of subchondral bone. In recent years, the distribution of urocortin II (ucnII) has been studied. The CIA has three sections, one for each section, and one for each section. CIA group PVN staining positive In addition, the distribution of arthritis is modulated by the use of the medium. 8 days (before arthritis onset) and 14 days (after arthritis onset) after antigen inoculation 40μm thin sections were stained with UCN antibody. After 8 days and 14 days, the positive staining of SON and ME was detected. SON is a cell cycle and a nervous system. Now, the knee joint immune tissue staining process, ucn development process. Immunohistochemical staining was used to confirm the presence of UCN, and in situ hybridization was used to reassess the presence of UCN.