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Functional linkage of oxytocin and TRP channels in chronic pain states.

慢性疼痛状态下催产素和 TRP 通道的功能联系。

基本信息

批准号：
22K09389
负责人：
大西英生
金额：
$ 2.66万
依托单位：
University of Occupational and Environmental Health, Japan
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

オキシトシン（OXT）を改変赤色蛍光タンパク（mRFP1）で標識したｍRFP1トランスジェニック（Tg）ラットを用いて線維筋痛症（FM）モデルラットにおけるOXTの発現動態、痛覚閾値やうつ様行動の評価を行った。雄性8週齢のOXT-mRFP1 Tgラットを用いて、レセルピン（1mg/kg）を3日間連日皮下投与しFMモデル（FM群）を作成した。FMモデル作成前後でのvon Frey testによる後肢の痛覚閾値ならびに強制水泳テストによる不動時間の経時変化を記録した。強制水泳テストではビデオ・トラッキング・ソフトウェアによる自動行動解析システムを用いたが、ラットを認識できなかったため、不動時間を手動で計測を行った。FM群の痛覚閾値はコントロール群と比較して注射終了後1、3、5、7、10、14及び17日で有意に低下した。FM群の不動時間はコントロール群と比較して注射終了後1、3及び5日で有意に延長した。さらに、注射終了後6日にラットを灌流固定し、SON、PVN、DR及びLCを含む脳切片と第5腰髄（L5）レベルの脊髄切片を作成した。SON、PVNにおけるOXT-mRFP1蛍光輝度ならびにL5脊髄後角I-II層におけるOXT-mRFP1陽性顆粒数を蛍光顕微鏡で観察し評価した。結果、FM群のSON、PVNにおける蛍光輝度はコントロール群と比較して有意差はなかったが、L5脊髄後角I-II層におけるOXT-mRFP1陽性顆粒数は、コントロール群と比較して有意に増加していた。下行性疼痛抑制系の評価として、背側縫線核(DR)は抗トリプトファンヒドロキシラーゼ（TPH)抗体、青斑核（LC)は抗チロシンヒドロキシラーゼ(TH)抗体による免疫組織化学的染色（IHC）を行い、IHC陽性細胞数を計数した。結果、注射終了後6日において、FM群のDRにおけるTPH陽性細胞数、LCにおけるTH陽性細胞数は、コントロール群と比較して有意に減少していた。

OXT (OXT) changes to red light (mRFP1), identifies mRFP1, changes to Tg (Tg), changes to FM (FM), changes to OXT occurrence dynamics, pain threshold, and action evaluation. OXT-mRFP1 Tg was produced by subcutaneous administration of 1mg/kg to males at 8 weeks of age for 3 days. The pain threshold of hind limbs and the time variation of immobility were recorded before and after the preparation of FM. The stress water swimming time is measured manually by automatic action analysis. The pain threshold of FM group was intentionally lowered on the 1st, 3rd, 5th, 7th, 10th and 17th day after injection. FM group's motionless time was intentionally prolonged 1, 3 and 5 days after injection 6 days after injection, perfusion fixation, SON, PVN, DR and LC were performed. The number of OXT-mRFP1 positive particles in layers I-II of SON, PVN and L5 ridge was evaluated by optical microscopy. The results showed that the number of OXT-mRFP1 positive particles in SON and PVN of FM group increased significantly compared with that of L5 ridge. Evaluation of descending pain suppression system: dorsal suture nucleus (DR) anti-TPH antibody, leukoplakia nucleus (LC) anti-TH antibody, immunohistochemical staining (IHC), IHC positive cell count. Results: 6 days after injection, the number of TPH positive cells in FM group and TH positive cells in LC group decreased significantly.