活性型酵素への変換を目的とした人工分子シャペロンの開発

开发用于转化为活性酶的人工分子伴侣

• 批准号: 13877382
• 负责人: 小池 透
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877382/
• 关键词: 生体機能制御分子; プロテオーム; 人工酵素; リン酸化タンパク質; 人工シャペロン; プオテオーム; 不溶性タンパク質

ヒトゲノム解析がほぼ完了した現在,それらがコードする個々のタンパク質の機能解析が次のターゲットとなっている。その解析には一定量の純粋なタンパク質が必要となるため,主に大腸菌を宿主としたタンパク質発現系が繁用されている。しかし,ヒトのタンパク質(酵素など)を大腸菌で作らせる場合,タンパク質の折りたたみシステムが異なるため,インクルージョンボディと呼ばれるタンパク質の凝集体(非天然型構造のタンパク質,不活性型酵素など)が生成する場合が多い。本研究は,それらタンパク質の凝集体を,本来の活性を持つタンパク質へ変換する人工分子シャペロン(タンパク質三次構造の再構築介添分子)を開発するものである。研究期間内に亜鉛イオンを分子内に二つもつ新規の亜鉛化合物群を合成した。それらの亜鉛化合物の構造とアニオンやチオール物質との相互作用について,NMR,pH滴定,各種分光分析法により検討した。その結果,アニオン種の内特にリン酸基をもつ分子とナノモル濃度で結合することを世界で初めて発見し,それらの分子がリン酸化プロテオーム解析試薬として有用であることが明らかとなった。合成した二核亜鉛化合物は,タンパク質のチオール基やフェノール基と1:1の複合体を形成することも明らかとなった。

Finished ヒ ト ゲ ノ ム parsing が ほ ぼ し た now, そ れ ら が コ ー ド す る a 々 の タ ン パ ク qualitative analytical が の function second の タ ー ゲ ッ ト と な っ て い る. そ の parsing に は の certain amount of pure 粋 な タ ン パ ク qualitative が necessary と な る た め, Lord に coliform を host と し た タ ン パ ク qualitative 発 now is が numerous use さ れ て い る. し か し, ヒ ト の タ ン パ ク mass (enzyme な ど) を coliform で as ら せ る occasions, タ ン パ ク qualitative の fold り た た み シ ス テ ム が different な る た め, イ ン ク ル ー ジ ョ ン ボ デ ィ と shout ば れ る タ ン パ ク qualitative の coagulation collective (unnatural type structure の タ ン パ ク qualitative, not type active enzyme な ど) が generated す が い more る occasions. This study は そ れ ら タ ン パ ク の coagulate collective を, originally の active を hold つ タ ン パ ク qualitative へ variations in す る artificial molecules シ ャ ペ ロ ン (タ ン パ ク qualitative three tectonic の add molecules to build interfaces) を open 発 す る も の で あ る. During the research period, に亜 lead bulk, <s:1> を を を を, intramolecular に, <s:1>, <s:1>, <e:1>, new rules for <s:1>, 亜, lead compound group を, synthesis, た. そ れ ら の 亜 lead compounds の tectonic と ア ニ オ ン や チ オ ー ル material と の interaction に つ い て, NMR, pH titration, various spectral analysis に よ り beg し 検 た. そ の results, ア ニ オ ン kind の nate に リ ン acid radical を も つ molecular と ナ ノ モ ル concentration で combining す る こ と を め the early で て 発 し, そ れ ら の molecular が リ ン acidification プ ロ テ オ ー ム resolution 薬 と し て useful で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. Synthetic し た two nuclear は 亜 lead compounds, タ ン パ ク qualitative の チ オ ー ル base や フ ェ ノ ー ル formed と 1:1 の complex を す る こ と も Ming ら か と な っ た.

项目成果

Tohru Koike: "Synthesis and characterization of the zinc(II)-fluorophore, 5-dimethylamino-naphthalene-1-sulfonic acid [2-(1,5,9-triazacyclo-dodec-1-yl)-ethyl]-amide and its zinc(II) complex"J. Chem. Soc., Dalton Transactions. 1764-1768 (2002)

Tohru Koike：“锌(II)-荧光团、5-二甲氨基-萘-1-磺酸[2-(1,5,9-三氮杂环十二-1-基)-乙基]-酰胺和

Emiko Kikuta: "A novel procedure for simple and efficient genotyping of single nucleotide Polumorphisms by using the Zn-cyclen complex"Nucleic Acid Research. 30. e126(1)-e126(6) (2002)

Emiko Kikuta：“利用 Zn-cyclen 复合物对单核苷酸多态性进行简单有效的基因分型的新方法”核酸研究。

Hironori Takeda: "Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry of phosphorylated compounds by using a novel phosphate capture molecule"Rapid Communications in Mass Spectrometry. 17. 2075-2081 (2003)

Hironori Takeda：“使用新型磷酸盐捕获分子对磷酸化化合物进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱分析”质谱快速通讯。

Emiko Kikuta: "Controlling gene expression by zinc(II)-macrocyclic tetraamine complexes"Journal of Inorganic Biochemistry. 79. 253-259 (2001)

Emiko Kikuta：“通过锌(II)-大环四胺复合物控制基因表达”无机生物化学杂志。

Tohru Koike: "Synthesis and characterization of the zinc(II)-fluorophore, 5-dimethylamino-naphthalene-1-sulfonic acid [2-(1, 5, 9-triazacyclo-dodec-1-yl)-ethyl]-amide and its zinc(II) complex"J.Chem.Soc., Dalton Transactions. (in press). (2002)

Tohru Koike：“锌(II)-荧光团、5-二甲氨基-萘-1-磺酸[2-(1, 5, 9-三氮杂环十二-1-基)-乙基]-酰胺的合成和表征以及