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新規高感度膜電位感受性色素の探索と細胞内染色法の開発

新規高感度膜電位感受性色素の探索と細胞内染色法の開発
寻找新型高灵敏度膜电压敏感染料并开发细胞内染色方法
批准号：
13877365
负责人：
桐野 豊
金额：
$1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2001 至 2002
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877365/
关键词：
膜電位感受性色素光学測定脳神経節ナメクジ軟体動物嗅覚中枢di-4-ANEPPSクマリン

项目摘要

项目成果

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ナメクジの嗅覚中枢である脳神経節前脳には多数の神経細胞が存在し,これらが自発的に膜電位の同期振動を生じている.この自発活動は脳神経節の単離後も長時間安定して持続することから,さまざまな測定法のスクリーニングに適した実験系である.これまでの研究により,市販の膜電位感受性色素di-4-ANEPPSによって前脳全体で同期した周期的蛍光変化が記録されることが明らかになった.この蛍光変化は1%程度であり,生理的状態の神経細胞が示す蛍光変化としては極めて大きく,また安定して長時間記録できることから,本実験系は膜電位感受性色素のスクリーニングに適していることがわかる.リポソーム-バリノマイシン系による予備実験で膜電位依存性を持つことが示されたクマリン系およびロドシアニン系の色素を用いて脳神経節を染色し,一次スクリーニングとして染色の状態と自発的蛍光変化の有無を調べた結果,クマリン系色素が強く脳組織を染色することが示されたが,前脳の膜電位振動に伴う蛍光変化を示す色素は存在しなかった.これは用いたクマリン系色素が極性基を持たず,細胞膜内での配向が一定しないためではないかと考え,これにスルホン酸基を付加した色素を合成した.これを用いて脳神経節を染色すると,脳組織は同様に強く染色されたが,やはり膜電位変化を反映した蛍光変化は得られなかった.本研究の結果,ナメクジの単離脳標本が膜電位感受性色素のスクリーニングに有用であること,膜電位感受性色素として機能するためには少なくとも色素の細胞膜への移行と,細胞膜内での配向という2つの要因が重要であること,またリポソームの実験で膜電位応答性のある色素が必ずしも生体で膜電位応答性を示とは限らず,生体を用いたスクリーニングが必要であることが明らかになった.
期刊论文(70)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Sadaharu Kotani et al.: "Classical eyeblink conditioning in the decerebrate guinea pigs"Eur.J.Neurosci.. 15. 1267-1270 (2002)
Sadaharu Kotani 等人：“去大脑豚鼠的经典眨眼条件反射”Eur.J.Neurosci.. 15. 1267-1270 (2002)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Tsuyoshi Inoue, et al.: "Serotonin and NO Complementarily Regulate Generation of Oscillatory Activity in the Olfactory CNS of a Terrestrial Mollusk"J. Neurophysiol.. 85. 2634-2638 (2001)
Tsuyoshi Inoue 等人：“血清素和一氧化氮互补调节陆生软体动物嗅觉中枢神经系统振荡活动的产生”J。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Kanako Takatsuki et al.: "Hippocampal damage disrupts eyeblink conditioning in mice lacking glutamate receptor subunit δ2"J.Biol.Phys.. 28. 539-547 (2002)
Kanako Takatsuki 等人：“海马损伤破坏了缺乏谷氨酸受体亚基 δ2 的小鼠的眨眼条件反射”J.Biol.Phys.. 28. 539-547 (2002)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Yoshinori Muto, et al.: "Blepharismin, produced by the protozoan, Blepharisma japonicum, form ion-permeable channels in planar lipid bilayer membranes"FEBS Lett. 508. 423-426 (2001)
Yoshinori Muto 等人：“Blepharismin，由原生动物 Blepharisma japonicum 产生，在平面脂质双层膜中形成离子渗透通道”FEBS Lett。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 34 条
    マウス瞬目反射学習に小脳は不要か?
    • 批准号：
      19659010
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.11万
    • 财政年份：
      2007
    • 负责人：
      桐野 豊
    • 依托单位：
      Tokushima Bunri University
    小脳特異的分子欠損マウスを用いた脳システム階層的相互作用の解析
    • 批准号：
      17024016
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $1.54万
    • 财政年份：
      2005
    • 负责人：
      桐野 豊
    • 依托单位：
      The University of Tokyo
    内在性誘導型アンチセンストランスクリプトによる遺伝子調節機構の解明
    • 批准号：
      16659011
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.18万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      桐野 豊
    • 依托单位：
      The University of Tokyo
    ナメクジ嗅覚-味覚連合学習およびマウス瞬目反射連合学習の分子神経機構
    • 批准号：
      13210036
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
    • 资助金额：
      $3.46万
    • 财政年份：
      2001
    • 负责人：
      桐野 豊
    • 依托单位：
      The University of Tokyo
    海外基金