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難再生性マングローブの細胞培養系開発と細胞融合

难再生红树林细胞培养系统及细胞融合的开发

基本信息

批准号：
15657010
负责人：
笹本浜子
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Yokohama National University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

培養細胞やプロトプラストからの個体再生が困難であった、熱帯・亜熱帯の海岸域に生育するマングローブキ各種の培養系を開発し、細胞融合による育種を可能にするため、1)沖縄西表島において採集した、ヒルギダマシ、マヤプシキ、ヤエヤマヒルギ、オヒルギ、メヒルギなどの無菌の材料を得るための準備として種子の室内育成を行った。2)色々な生育ステージの子葉、葉、芽、花器官等から、カルス誘導のための植物ホルモンや培地塩類等の、種類、濃度の最適条件を明らかにするため、少量液体培地を入れた、多穴シャーレあるいは、透明なカバーを用いた平底サンプル管法(申請者が工夫)を用い、無菌培養したまま、倒立顕微鏡観察する方法により、多数の培地条件の検索を行った。ヒルギダマシで若干の増殖が得られ、初めてマヤプシキ子葉からのサスペンジョンカルチャー系を確立した。3)24穴、96穴などの多穴シャーレを用いて各種細胞壁分解酵素の組み合わせと、浸透圧の最適条件を検討した。購入したウェルスキャナーを付属させた簡易倒立顕微鏡による、効率的観察および、データ処理を行うことにより、3科8種のマングローブ葉プロトプラストが単離可能になり、論文発表した。4)さらに、プロトプラストの簡単な精製法を検討し、いくつかの種について、無菌液体培養を試みた。結果の写真画像処理解析のコンピューターによる効率化を試みた。5)外国産ロッカクヒルギの培養細胞のプロトプラスト培養に対する、4種の塩とpHの影響を調べ、耐塩性の弱いポプラや、草本タバコのプロトプラストと比較し、Naに対する若干の耐性のほかに、MgやCa塩による増殖促進効果の特徴を初めて明らかにし、論文発表した。6)5)を参考にして、ヒルギダマシ、マヤプシキの葉組織からの細胞分裂誘導に対し、NaCl以外に、K、Mg、Ca塩に対する反応性の特徴を初めて明らかにし、学会発表した。

Cultured cells are difficult to regenerate individuals, and hot and hot areas are difficult to regenerate. Fertility is possible through various culture lines and cell fusion breeding. , 1) Okinawa Iriomote Island において collection した, ヒルギダマシ, マヤプシキ, ヤエヤマヒルギ, オヒルギ, メヒルギなどのsterile material をget るためのpreparation として seeds のIndoor cultivation を行った. 2)Colored growth and reproduction of cotyledons, leaves, buds, flower organs, etc., and color-induced plant growth The optimum conditions for the type and concentration of ンやpedic acid, etc., を明らかにするため, a small amount of liquid を入れた, Multi-hole シャーレあるいは, transparent なカバーをいた flat-bottomed サンプルtube method (applicant's skill) をい, sterile culture method, inverted microscopic examination method, most of the cultivation conditions are the same.ヒルギダマシでSome の multiplying が got られ, Initial めてマヤプシThe キキキらのサスペンジョンカルチャー line is established. 3) The 24-hole and 96-hole multi-hole sanitizer uses a combination of various cell wall decomposing enzymes, and the optimal conditions for soaking are used. The purchase of the したウェルスキャナーを comes with the させた simple inverted microscope による, the efficient Observation および, and the データ treatmentを行うことにより, 3 families and 8 species of のマングローブ叶プロトプラストが単になり, thesis 発表した. 4) さらに, プロトプラストの简単なrefining method を検し, いくつかのkind について, sterile liquid culture をtrial みた. Result of photo image processing analysis and efficiency test. 5) Foreign-made ロッカクヒルギののプロトプラスト cultured に対する, 4 kinds of pH-influenced pH-adjusted ones, weak pH-resistant ones, and herbal onesプロトプラストとComparisonし、Naに対するSomeのpatienceのほかに、MgやCa塩によるproliferation promotion effectの特徴を初めて明らかにし、paper発 tableした. 6)5)をReferenceにして,ヒルギダマシ,マヤプシキのleaf tissueからのcell division inductionに対し, N In addition to aCl, K, Mg, Ca 塩に対するReflexive の特徴を初めて明らかにし, 学発表した.