EGFシグナルによる転写コリプレッサー複合体機能調節機構

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ショウジョウバエ上皮増殖因子(EGF)シグナルは光受容細胞の発生過程に必須なシグナルで、細胞分化、増殖あるいは生存維持など複数の機能をもっている。本研究ではEGFシグナル伝達下で働くEbi/SMRTER/Su(H)転写コリプレッサーの機能を解析した。転写コリプレッサー複合体の機能を調べるため、遺伝学的検索により同定されたtacoと転写コリプレッサー複合体との関係に着目して解析をおこなった。tacoの発現はEbi/SMRTER/Su(H)の転写コリプレッサー複合体によって抑制されていることを予想し、3令期の複眼成虫原基を用いてChromatin immunoprecipitation (ChIP)をおこなった。結果、tacoの転写開始点近傍にEbiとSMRTERがリクルートされることがあきらかになった。さらにNotchの細胞質ドメイン(Notch-ICD)に対する抗体を用いることによりNotch-ICDもコリプレッサー複合体と同じ場所にリクルートされてくることがあきらかになった。次ぎに転写コリプレッサーとNotch-ICDの関係を明らかにする目的でEbiに対する抗体でDNA-タンパク質複合体を単離し再び可溶化後、抗SMRTERあるいは抗Notch-ICD抗体で免疫沈降をおこなったところ、抗SMRTERのみtacoの転写開始点領域が沈降されることがあきらかになった。以上の結果から転写コリプレッサー複合体とNotch-ICDとは異なる複合体でtacoのプロモーター領域にリクルートされることがあきらかになった。TacoはヒトNRSF/REST様因子であることから、本研究からNRSF/RESTの機能はEGF, Notchシグナル伝達により制御されていることが強く示唆された。