休眠発育の分子的実体解明のこころみ

努力阐明休眠发育的分子实质

基本信息

批准号：
15658018
负责人：
石川幸男
金额：
$ 2.11万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

タマネギバエDelia antiquaの冬休眠(WD)および夏休眠(SD)の分子的実態の解明のため、休眠蛹で特異的に発現している遺伝子のスクリーニングと、特異的遺伝子のノーザン解析及び定量PCRによる発現解析を行った.ディファレンシャルディスプレー法による解析の結果、休眠に特異的な遺伝子DaTrypsinを発見した.cDNAの全長は1379bpで、384a.a.をコードしており、分子量は43,005Da.と推定された.DaTrypsinタンパク質は20-a.a.の分泌シグナルペプチドとトリプシン様の活性を示すと考えられるタンパク質から構成されてた.DaTrypsinの転写活性はWDとSDの両方で上昇していたが、WDの方がmRNA量は多かった.ヒートショックはWDとSD両者の転写量をさらに増加させたが、コールドショックはSDのDaTrypsinの転写を抑制し、WDの転写には影響を与えなかった.SDでは、DaTrypsinの転写産物は休眠の進行やヒートショックに伴い蓄積量が増えたが、WDでは、DaTrypsinのmRNA量は休眠導入の当初及びヒートショックの直後にレベルが高く、時間の経過とともに低下していく傾向がみられた.DaTrypsinは休眠時に発現していることが初めて示されたセリンプロテアーゼであるとともに、SDとWDの両方で転写量が増大していることが示された初めての遺伝子である.この遺伝子は、休眠蛹の免疫防御に関与している可能性があるほか、休眠を維持する機能を保有している可能性がある.

洋葱飞delia为了阐明Antiqua的冬季休眠（WD）和夏季休眠（SD）的分子现实，我们筛选了在休眠pupae中专门表达的基因，以及对特定基因和定量PCR的北部分析。由于使用差分显示方法分析，我们发现了一个特异性特异性基因datrypsin。 cDNA的总长度为1379 bp，编码384a.a.，估计的分子量为43,005 da。 Datrypsin蛋白由20-A.A的分泌信号肽组成。以及一种被认为表现出胰蛋白酶样活性的蛋白质。在WD和SD中，Datrypsin的转录活性都增加了，但WD的mRNA量较高。尽管WD和SD的转录量进一步增加，但冷冲击抑制了SD中Datrypsin的转录，对WD的转录没有影响。在SD中，Datrypsin转录本以休眠进展和热量冲击积累，但是在WD中，在休眠开始时和热休克之后，Datrypsin中的mRNA量很高，并且随着时间的推移趋于减少。 datrypsin是在休眠期间要表达的第一个丝氨酸蛋白酶，它是第一个已显示在SD和WD中转录增加的基因。该基因可能参与休眠pa的免疫防御，并且可能具有保持休眠状态的功能。