セルラーゼはセルロースミクロフィブリルを修復する酵素である

纤维素酶是一种修复纤维素微纤维的酶

• 批准号: 15658032
• 负责人: 林 隆久
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15658032/
• 关键词: セルラーゼ; ミクロフィブリル; UDP-グルコース; セロオリゴサッカライド; Outer membrane

セルロース合成菌(Acetobacter xylinum)の膜画分をUDP-[^<14>C]グルコースとインキュベートすることにより、ビトロでのセルロース合成を試みた。セルラーゼ遺伝子が破壊された変異株は、野生株に対して、約3分の1の合成量を示すことが認められた。合成酵素反応系にリコンビナントセルラーゼを加えて取り込みをみたところ、約2倍量の増加が認められた。この反応物を電気泳動に供したところ、Nativeゲルでも、[^<14>C]グルコースの取り込みとウェスタンブロットによるセルラーゼの挙動は一致していた。このことから、セルラーゼがセルロース生合成のプライマーとして機能していることが示された。次に、UDP-[^<14>C]グルコースからセルロースを合成して反応生成物をSDS/PAGEに供した。^<14>Cラベルはオートラジオグラフィで、セルラーゼはウェスタンブロットで検出した。その結果、一部のラベル(反応生成物)はゲルの中に入った。反応液中にセルラーゼを添加すると、ラベルがセルラーゼ(46kDa)と同じ挙動を示した。すなわち、セルラーゼが[^<14>C]グルコースでラベルされることを発見した。セルラーゼのシグナルがスミヤーになることから、グルコース部分は重合度が高いことが推察された。現在、最適条件でリコンビナントセルラーゼをプライマーとして初発反応を行い、反応生成物(セロオリゴ糖/セルラーゼ複合体)を抗体カラムによって単離するとともに、得られた複合体をゲルろ過カラム及び電気泳動に供してセルラーゼとセロオリゴ糖が同じ挙動であることを示し、セロオリゴ糖の重合度をメチル化分析によって決定している。

The membrane separation of Acetobacter xylinum was studied by UDP-[^ C]. The membrane separation of Acetobacter xylinum was studied by UDP-[^<14>C]. The amount of synthetic protein in the wild and mutant plants was about 3 minutes. Synthase reaction system: increase in enzyme activity by about 2 times. This is the first time that the United States has been involved in the war against terrorism<14>. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone else. Next, UDP-[^<14>C] was added to the SDS/PAGE. <14>C. The result is that a part of the product (anti-product) is not included in the product. In the reaction solution, the reaction temperature is 46kDa, and the reaction temperature is 45 kDa. [^<14>C] The number of people in the village is 1,000. Now, the optimum conditions are: initial reaction, reaction product (2) The detection and determination of the overlap of the antibody and the protein in the complex are carried out in the following ways:

项目成果

Y.Ohmiya, T.Nakai, Y.W.Park, T.Aoyama, A.Oka, F.Sakai, T.Hayashi: "The role of PopCel1 and PopCel2 in poplar leaf growth and cellulose biosynthesis"Plant J. 33. 101-111 (2003)

Y.Ohmiya、T.Nakai、Y.W.Park、T.Aoyama、A.Oka、F.Sakai、T.Hayashi：“PopCel1 和 PopCel2 在杨叶生长和纤维素生物合成中的作用”Plant J. 33. 101-111

Involvement of cellulose in cellulose biosynthesis.

纤维素参与纤维素生物合成。

• 发表时间: 2004
• 期刊: In Biotechnology of Lignocellulose Degradation and Biomass Utilization, Uni Publishers, Tokyo
• 作者: T.Hayashi;Y.W.Park;T.Takeda;S.Nakamura;Y.Ohmiya
• 通讯作者: Y.Ohmiya

林 隆久: "植物におけるグライコミクス"日本農芸化学会誌. 77. 1001-1003 (2003)

Takahisa Hayashi：“植物中的糖组学”日本农业化学学会杂志 77. 1001-1003 (2003)。

Production of transgenic Acacia mangium expressing cellulase gene to enhance growth

表达纤维素酶基因的转基因马占相思的生产以促进生长

• 发表时间: 2004
• 期刊: In Sustainable Production and Effective Utilization of Tropical Forest Resources JSPS
• 作者: E.Sudarmonowati;S.Hartati;R.Hartati;Y.W.Park;T.Hayashi
• 通讯作者: T.Hayashi

J.Shao, T.Hayashi, P.G.Wang: "Enhanced production of α-galactosyl epitopes by metabolically engineered Pichia pastoris"Applied Environmental Microbiology. 69. 5238-5242 (2003)

J.Shao、T.Hayashi、P.G.Wang：“通过代谢工程毕赤酵母增强 α-半乳糖基表位的生产”应用环境微生物学 69. 5238-5242 (2003)。