炎症性腸疾患モデルマウス(サイトカインγ鎖欠損)を用いた腸炎の免疫学的解析

使用炎症性肠病模型小鼠（细胞因子γ链缺陷）进行肠道炎症的免疫学分析

• 批准号: 15659296
• 负责人: 中田 精三
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659296/
• 关键词: γ_c^<-; Y>マウス; colitis; CD4^+T細胞; IL-6; IBD; IL-2Rγchain欠損マウス; Th2; CD4+Tcell; TCRVβ14

〔実験1〕【対象・方法】colitisを発症した生後12週齢のγ_c^<-/Y>マウスを用い,colitisを発症していない生後6週齢のγ_c^<-/Y>マウスを対照として,組織学的検討,大腸lamina propria lymphocyte (C-LPL)におけるcell populationの解析,ELISA法によるC-LPLにおけるサイトカイン産生の解析,細胞内サイトカインFACSによるサイトカイン産生の解析を行った.【結果】colitisを発症したγ_c^<-/Y>マウスでは対照マウスに比し,crypt depthの伸長,Goblet cellの減少,粘膜下層における炎症性細胞浸潤がより顕著に認められた.C-LPLにおけるcell populationの解析では有意なCD4^+T細胞の増加を認めた.C-LPLにおけるサイトカイン産生ではIL-6の無刺激下での産生を有意に認めた.細胞内サイトカインFACSではCD4^+T細胞のIL-6産生を認めた.〔実験II〕【対象・方法】colitisを発症したγ_c^<-/Y>マウスでは,病態形成によってIL-6を産生するCD4^+T細胞の関与が示唆されたため,以下の実験にてその検討を行った.colitis未発症の生後8週例のγe^<-/Y>マウスに抗IL-6 receptor(IL-6R)モノクローナル抗体を投与し,colitis発症が抑制されるかをisotype control抗体を投与した群を対照として比較検討した.colitisを発症したγ_c^<-/Y>マウスよりCD4^+T細胞を分離しC, B,17 SCIDマウスの腹腔内に移入,colitis発症が認められるか否かをγ_c^<-/Y>マウスより分離した細胞を移入した群と比較検討した.【結果】抗IL-6R抗体を投与されたγ_c^<-/Y>マウスはisotype control抗体を投与された対照群に比し,炎症は軽度にとどまっており,抗IL-6R抗体を投与することにより,colitis発症が抑制された.Colitisを発症したγ_c^<-/Y>マウスよりCD4^+T細胞を移入したSCIDマウスには,対照群に比し,炎症は高度で,病態形成性CD4^+T細胞を移入することによりSCIDマウスにcolitis発症が認められた.【結語】γ_c^<-/Y> mouseにおけるcolitis発症の病態形成にはIL-6を発症するCD4^+T細胞が関与していた.

(be 験 1) colitis, like method, seaborne 】 【 を 発 disease し た born after 12 weeks 齢 の gamma _c ^ / < - > Y マ ウ ス を い, colitis を 発 disease し て い な い 6 weeks after birth 齢 の gamma _c ^ / < - > Y マ ウ ス を polices according to と し て, histological 検 beg, e. lamina propria lymphocyte (C-LPL)におけるcell Population の parsing, ELISA method に よ る C - LPL に お け る サ イ ト カ イ ン の parsing, intracellular サ イ ト カ イ ン both FACS に よ る サ イ ト カ イ ン produce line analytical を の っ た. 【 results 】 colitis を 発 disease し た gamma _c ^ / < - > Y マ ウ ス で は polices according to マ ウ ス に than し, crypt The depth の elongation, Goblet cell の decrease, submucosa に お け る inflammatory cell infiltration が よ り 顕 the に recognize め ら れ た. C - LPL に お け る cell Population の parsing で は intentionally な CD4 + T cells の ^ raised plus を recognize め た. C - LPL に お け る サ イ ト カ イ ン produce で は IL - 6 の stimuli で の produce を intentionally に recognize め た. Intracellular サ イ ト カ イ ン both FACS で は CD4 + T cells の ^ IL - 6 produce を recognize め た. (be 験 II) colitis, like method, seaborne 】 【 を 発 disease し た gamma _c ^ / < - > Y マ ウ ス で は, pathological form に よ っ て IL - 6 を produce す る CD4 + T cells の ^ masato and が in stopping さ れ た た め, the following の be 験 に て そ Line beg を の 検 っ た. Colitis not 発 disease の 8 weeks after birth example の gamma e ^ / < - > Y マ ウ ス に IL - 6 receptor (IL - 6 r) モ ノ ク ロ ー ナ ル antibodies and し を shots, colitis 発 disease が inhibit さ れ る か を isotype Group control antibody を cast with し た を polices according to と し て compare beg し 検 た. Colitis を 発 disease し た gamma _c ^ / < - > Y マ ウ ス よ り CD4 + T cell separation を し C ^, B, 17 SCID マ ウ ス の に move into the abdominal cavity, colitis 発 disease が recognize め ら れ る か no か を gamma _c ^ / < - > Y マ ウ ス よ り separation し を た cells into し た group of beg し と compare 検 た. 【 results 】 IL - 6 r antibodies を cast with さ れ た gamma _c ^ / < - > Y マ ウ ス は isotype Control antibody を cast with さ れ た according to group of seaborne に than し, inflammation は 軽 degrees に と ど ま っ て お り, IL - 6 r antibodies を cast with す る こ と に よ り, colitis 発 disease が inhibit さ れ た. Colitis を 発 disease し た gamma _c ^ / < - > Y マ ウ ス よ り CD4 + T cells を ^ move し た SCID マ ウ ス に は, According to the group of seaborne に than し, inflammation で は height, pathological formative CD4 + T cells を ^ move す る こ と に よ り SCID マ ウ ス に colitis 発 disease が recognize め ら れ た. [conclusion] gamma _c ^ / < - > Y Mouse に お け る colitis の 発 disease pathological form に は IL - 6 を 発 disease す る CD4 + T cells が ^ masato and し て い た.

项目成果

水島恒和, 井上善文, 伊藤壽記, 打越史洋, 松田 暉: "腸回転異常症を伴ったクローン病に対する腹腔鏡補助下手術の1例"日本外科系連合学会誌. 28(6). 1024-1028 (2003)

Tsunekazu Mizushima、Yoshifumi Inoue、Hisaki Ito、Fumihiro Uchikoshi、Akira Matsuda：“腹腔镜辅助手术治疗肠旋转不良的克罗恩病”日本外科联合会杂志 28(6) (2003)。

玉川浩司, 伊藤壽記, 松田 暉: "Bacterial translocationにおける樹状細胞とtight junctionの関与"消化器科. 37(1). 7-13 (2003)

Koji Tamakawa、Hisaki Ito、Akira Matsuda：“细菌易位中树突状细胞和紧密连接的参与”胃肠病学 37(1) (2003)。

Colitis in mice lacking the common cytokine receptor γ chain is mediated by IL-6-producing CD4+ T cells

• DOI: 10.1053/j.gastro.2005.01.013
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: GASTROENTEROLOGY
• 影响因子: 29.4
• 作者: Kai, Y;Takahashi, I;Kiyono, H
• 通讯作者: Kiyono, H

Tamagawa H., Tshukita S., Ito T., Matsuda H., Kiyono H.: "Characteristics of claudin expression in follicle-associated epithelium of Peyer's patches ; Preferential localization of Claudin-4 at the apex of the dome region"Laboratory Investigation. 83(7). 1

Tamakawa H.、Tshukita S.、Ito T.、Matsuda H.、Kiyono H.：“派尔氏斑滤泡相关上皮中 Claudin 表达的特征；Claudin-4 在圆顶区域顶端的优先定位”实验室研究

Mizushima T., Ito T., Nezu R., Kishi D., Kai Y., Tamagawa H., Kiyono H., Matsuda H.: "Therapeutic Effects of a New Lymphocyte Homing Agent FTY720 in Interleukin-10 Gene Deficient Mice with Colitis."Inflammatory Bowel Diseases. 発表予定. (2004)

Mizushima T.、Ito T.、Nezu R.、Kishi D.、Kai Y.、Tamakawa H.、Kiyono H.、Matsuda H.：“新型淋巴细胞归巢剂 FTY720 对白细胞介素 10 基因缺陷小鼠的治疗效果结肠炎。“炎症性肠病。计划发表。（2004 年）