骨髄移植及び短期免疫抑制剤併用によるラット心移植の寛容誘導に関する研究

骨髓移植联合短期免疫抑制药物诱导大鼠心脏移植耐受的研究

基本信息

批准号：
02670545
负责人：
中田精三
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ドナ-抗原特異的な免疫学的寛容を誘導する方法を死体臓器移植にも応用すべく、移植当日にドナ-の骨髄細胞を投与し、同時に短期間の免疫抑制剤FK506を併用すると著明なグラフトの延長効果が認められる。そこでそのメカニズムについて検討した。動物モデルはラット異所性心移植であり、ドナ-の骨髄細胞(BM)を術当日に静脈内投与した。免疫抑制剤FK506(FK)は1mg/kgを-1,0,1日と3日間筋肉内投与した。一部のgroupには、FKを9,10,11または骨髄細胞をさらに3日間投与した。グラフトの生着延長したレシピエントの脾細胞を用いて限界希釈法(LDA)を行った。また、IL2産生のヘルパ-T細胞頻度;f(Thp)はCTLL2を用いたproliferation assayにより、細胞傷害性T前駆細胞頻度;f(Tcp)は^<51>Cr release assayによりPoisson分布の法則に従って計算した。各Groupは、G1:無処置群、G2:FKの3日間単独投与群、G3:FK投与とBUFのBMを投与、G4:FK投与と2回のBUFのBM投与、G5:2回のFK投与と2回のBUFのBM投与である。G2とG3の移植後10日目の脾細胞を用いてLDAを行った。f(Thp)において、G3では1/3617とG2の1/2003に比して低値を示した。なおG1でのそれは1/1720であった。またG3にはCD4^+サプレッサ-T細胞が認められた。一方、f(Tcp)はG2及びG3でそれぞれ1/1174及び1/1255と差を認めなかった。次にG5において、移植後60日目の脾細胞におけるf(Tcp)は1/7498と著明な低下を示した。同時に測定した正常ラット脾細胞では1/1884であり、グラフト拒絶後の脾細胞では1/350であった。同時期の脾臓には、CD4^+,CD8^+サプレッサ-T細胞が認められた。従って、FK/BM投与を受けたレシピエントの脾細胞において、移植後10日目、IL2産生のヘルパ-T細胞のクロ-ンサイズの有意な減少が認められた。また、移植後60日目には、FK/BM群において、細胞傷害性T前駆細胞のクロ-ンサイズの縮小が認められた。以上に加え、今回は同様の動物モデルに免疫抑制剤Deoxyspergualinを投与し,細胞傷害性活性とIL2産生能を検討した。

为了采用一种诱导多纳 - 抗原特异性免疫耐受性对分解代谢器官移植的方法，在植入当天施用多纳 - 传播骨髓细胞，并同时使用短期免疫抑制剂FK506同时使用，这是一种明显的延长效应。因此，我们检查了机制。动物模型是大鼠异位心脏移植物，在手术当天静脉内服用Donna传播的骨髓细胞（BM）。免疫抑制剂FK506（FK）以1 mg/kg的肌肉内施用-1、0和1天，持续3天。一些组额外接受了9、10、11 FK或骨髓细胞3天。使用具有延长移植物的受体的脾细胞进行极限稀释（LDA）。此外，IL2产生的辅助-T细胞频率； F（THP）通过使用CTLL2和细胞毒性T-progogenit细胞频率来计算F（THP）。 F（TCP）由 ^<51> cr释放分析根据泊松分布定律计算。每个组都是G1：未经处理的组，A单独使用G2：FK 3天，G3：FK给药和BM给药，G4：FK给药：FK给药和BUF 2 BM给药，G5：2 fk：2 fk给药，并使用BUF给药2 bm。 G2和G3植入后10天使用脾细胞进行LDA。在F（THP）中，G3中的值较低，而G2中的1/3617和1/2003。此外，在G1中是1/1720。在G3中也观察到CD4^+抑制-T细胞。另一方面，F（TCP）分别从1/1174和1/1255之间没有差异。接下来，在植入后60天后，在G5中，脾细胞中的F（TCP）显示出明显的1/7498降低。正常大鼠脾细胞的结果为1/1884，移植物排斥后的脾细胞为1/350。 CD4^+，CD8^+抑制-T细胞同时在脾脏中发现。因此，在植入后第10天接受FK/BM给药的受体的脾细胞中观察到了产生IL2辅助辅助T细胞的克隆大小的明显降低。此外，在植入后的第60天，在FK/BM组中观察到细胞毒性T祖细胞的克隆大小。除上述内容外，我们现在还将免疫抑制剂脱氧蛋白施用到类似的动物模型，以检查其细胞毒性活性和IL2生产能力。