アルツハイマーAβペプチドの新規自己開裂・閉環現象の解明と応用

阿尔茨海默病Aβ肽新型自裂解和闭环现象的阐明和应用

• 批准号: 16650077
• 负责人: 定金 豊
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Kyushu University of Health and Welfare
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16650077/
• 关键词: アミロイドペプチド; 異性化; ジケトピペラチン; アスパラギン酸; 神経細胞; アルツハイマー病; ペプチド合成; 開裂と閉環

アルツハイマー病は凝集性の高いβアミロイドペプチドが、脳内で長い時間をかけて凝集・沈着することが原因で引き起こされると考えられている。我々はこのペプチド断片が非酵素的に自己開裂および自己閉環することを見出した。まず、自己開裂と閉環がどのようなメカニズムでおこるのか、βアミロイドペプチドの6〜10番目のアミノ酸配列HDSGYをもとにアミノ酸を置換した様々なペプチドを製作して調べた。自己開裂は末端の2残基のアミノ酸がジケトピペラジンを形成して、開裂することを、質量分析およびプロトンNMRにより確認した。HASGY、ADSGY、HdDSGY、HNSGYのペプチドではHDSGYとほぼ同じ速度で自己開裂がおこるものの、HDAGYおよびHisoDSGYでは全く起こらなかった。これらから、自己開裂はN末端のアミノ基と,3残基目のSerのOH基が相互作用でおこり、サクシイミドの形成を必要としないことが明らかになった。また、自己閉環は末端の2つのアミノ酸がジケトピペラジン構造をとっていることを明らかにした。HNSGY》HisoDSGY》HDAGY、ADSGY、HdDSGY》HASGYの順でおこることから、自己閉環には2残基目のAspが必須であり、サクシイミド形成が自己閉環を促進することが明らかになった。次に、自己開裂と閉環現象が生体内でもおこりえるのか確認した。ラット海馬初代培養神経細胞またはマウス不死化視床下部神経細胞の培養液にβアミロイドペプチド断片を静置した結果、βアミロイドペプチドの6残基目のHisの露出が起こることを確認した。このHisの露出が自己開裂・閉環に必須であり、この切断を細胞レベルで確認した。閉環型βアミロイドペプチド断片をコンビケム固相合成装置で大量に合成し、それに対する抗体の製作を試みたが特異性が確認できなかった。

The reason for this is that there is a high level of aggregation in the disease. I want to see the results of this research. In addition, it is necessary to prepare a series of acid matching HDSGY from the 6 ~ 10 groups of acid matching HDSGY. The formation of the two residues in the cleavage site was confirmed by mass spectrometry and NMR. HASGY, ADSGY, HdDSGY, HNSGY are the same speed as HDSGY, so they can open their own doors, HDAGY and HisoDSGY. The interaction of Ser and OH groups at the N-terminal of the cleavage site is necessary for the formation of the cleavage site. 2. The structure of the closed loop is not clear. HNSGY> HisoDSGY> HDAGY, ADSGY, HdDSGY> HASGY> HASGY> H Second, the phenomenon of self-cracking and closed-loop is born in the body. In the culture medium of hippocampal primary cultured neurons, the β-subunit fragment was allowed to stand still, and the β-subunit fragment was exposed to the 6 residues. This is the first time that I've ever seen a person who's been exposed to the outside world. The closed-loop beta fragment was synthesized in large quantities by a solid-phase synthesis device, and the specificity of the antibody was confirmed by the production test.

项目成果

A Cleavable Photophore for Identification of Peptides Forming the Ligand-Binding Region of Receptor Protein : Resistance of Streptavidin-Bound Peptide to Cleavage of Disulfide Linkage

用于鉴定形成受体蛋白配体结合区域的肽的可裂解发光体：链霉亲和素结合肽对二硫键裂解的抗性

• 发表时间: 2003
• 期刊: Photomedicine and Photobiology 25
• 作者: Sadakane Y.;Hatanaka Y.
• 通讯作者: Hatanaka Y.

Identification of disulfide bonds and site-specific glycosylation in chicken alphal-acid glycoprotein by matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry.

通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法鉴定鸡α-酸性糖蛋白中的二硫键和位点特异性糖基化。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Anal.Biochem 331
• 作者: H.Matsunaga;Y.Sadakane;J.Haginaka
• 通讯作者: J.Haginaka

Zinc homeostasis and neuronal death.

锌稳态和神经元死亡。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Trace Nutrients Research 21
• 作者: K.Konoha;Y.Sadakane;M.Kawahara
• 通讯作者: M.Kawahara

Chemical Genomics (分担著書:p199-214)

化学基因组学（合著者：p199-214）

• 发表时间: 2004
• 作者: Y.Sadakane;Y.Hatanaka
• 通讯作者: Y.Hatanaka

Synthesis of Diazirinyl Photoprobe Carrying a Novel Cleavable Biotin

携带新型可裂解生物素的二氮丙啶光探针的合成

• 期刊: Chem Bio Chem (In press)
• 作者: JJ.Park;Y.Sadakane;K.Masuda;T.Tomohiro;T.Nakano;Y.Hatanaka
• 通讯作者: Y.Hatanaka