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作物組織における遺伝子発現過程の可視化に関する研究

作物组织基因表达过程可视化研究

基本信息

批准号：
16658008
负责人：
三宅博
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

1・超薄切片の作製が不可能である硬質のイネ完熟種子を用いて、割断面に金コロイド標識抗体を処理し、走査型電子顕微鏡で観察して貯蔵タンパク質の分布を観察する方法を検討しほぼ完成させた。これまでは洗浄を強くすると洗浄中に表面構造が脱落し、洗浄を弱くすると非特異的な標識が起こる問題があったが、抗体希釈液およぴ洗浄液の牛血清アルブミンの濃度を1%に高めることにより、弱い洗浄でも非特異的結合を抑制することができた。この手法によって、プロテインボディIIに局在するグルテリンに対する抗体を、特異的にプロテインボディIIに結合させることができるようになった。2.イネ成熟葉について、in situハイブリダイゼーション法(ISH法)を完成させることができた。イネ葉の成長にともなうRubiscoおよぴLHCIIの遺伝子であるcabあの発現をISH法で調べ、維管束鞘では初期にこれらの遺伝子発現が停止してしまうが、これらのタンパク質は成熟葉でも保持されていることを免疫電子顕微鏡法で明らかにした。またラミナジョイントを欠損している準同質遺伝子系統を用い、野生株と比較することにより、ラミナジョイントでは葉肉組織と維管束鞘組織が備わっているにもかかわらず、光合成遺伝子の発現が抑制されていることを明らかにした。さらに塩ストレスによって齢の進んだ部位から順にRubiscoの遺伝子発現が消失することを明らかにした。3.本研究によって、イネ葉身の成長から老化までの全過程におけるRubisco遺伝子の発現とRubiscoタンパク質の動態を明らかにし、葉緑体の光合成活性の指標であるPAMによる螢光特性との関係を対応づけることができた。

1. It is impossible for the ultra-thin section to be used as a micrograph. It is impossible to use the micrograph, cut the cross-section metal to identify the antibody, and use the electronic microphone to monitor the distribution of the antibody. In the process of washing, the surface will fall off, and the weak will cause problems. The antibody will be used to wash the bovine serum, the concentration of the bovine serum will be 1% higher than that of the control, and the combination of the weak wash and the non-specific will inhibit the sensitivity of the product. In the II department, the antibody was detected, the antibody was detected in the II, and the antibody was detected in the II. two。 The ISH method (ISH method) has been completed in terms of maturity and maturity, and the ISH method has been completed. When you grow up, you need to know that the ISH method is effective, and that in the early stage of the maintenance of the tube sheath, it is possible to stop the Rubisco test, and to ensure that you are mature enough to maintain the performance of the ISH method, the ISH method and the micrometer method. In this paper, we do not know how to prepare for the use of the sub-system, the wild plant, the plant, the tissue, the temperature, the temperature and the temperature. Please tell me that the Rubisco has disappeared in the first place, and that it is clear that it has disappeared. 3. In this study, the whole process of Rubisco aging was detected in the whole process of aging. The results showed that the activity of photosynthesis in the whole process of growth, aging, aging