血管傷害の新しいバイオマーカーの探索と診断法の開発

寻找新的血管损伤生物标志物并开发诊断方法

基本信息

  • 批准号:
    16659195
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.05万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2004
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2004 至 2005
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究では、血管疾患の新しい血液診断マーカーの探索研究のシーズとして、血管傷害の血液診断マーカーを探索し、アッセイ系を開発し、臨床応用への基盤となる研究を行うことが目的である。そのために、血管傷害時に血管壁から血中に放出される蛋白質を単離・同定し、さらにその知見をもとに診断アッセイを開発するための研究基盤ならびに技術を構築する。質量分析計で血中蛋白質を単離同定する。単に血液サンプルを質量分析計で包括的に解析するのではなく、differential proteomics法という二つのサンプルを分画しながら差を検討する方法を用いる。上記検討を実施した。検討には、SELDI TOF-MS機ならびにMALDI-TOF-MS機を用いた。SELDI TOF-MS機は、血清を種々の表面加工された測定用マトリックス(プロテイン・チップ)にアプライし、分画することが可能である。陽イオン、陰イオン等、クロマト担体様に加工されたプレートにサンプルをアプライし、また吸着、洗浄方法を複数設定することで256通り以上の条件について検討した。血管傷害のモデルを用いたが、血管傷害時に出現するピーク、減少するピークを複数同定することに成功した。しかしながら、これらのピークは個人間の多様性の程度と比し、判別困難な面があった。条件設定を含めて、ヒトサンプルを用いた際の多様性の問題を克服するために、種々の検討を行ったが、決定的なデータが得られる段階までは残念ながら至らなかった。今後、方法論をさらに改良する必要がある。一方、上記の包括的なアプローチの他に、焦点を絞った狙い撃ち的なアプローチも導入した。血管壁に存在し、血管傷害時に血中に流出されると考えられる蛋白質を選択し、これらに対するイムノアッセイ等を開発した。過去に平滑筋ミオシン重鎖に対する測定系を開発し、大動脈解離症の診断において有用であることを示したが、他マーカーについても検討した結果、臨床応用が期待できるマーカーを同定できた。
This study で は, vascular disease の new し い blood diagnostic マ ー カ ー の explore の シ ー ズ と し て, vascular damage diagnosis マ の blood ー カ ー を exploring し, ア ッ セ イ started を 発 し, clinical 応 へ の base plate と な る を line う こ と が purpose で あ る. そ の た め に, vascular damage blood vessels to に か ら blood に release さ れ る protein を 単 leaves, with し, さ ら に そ の knowledge を も と に diagnosis ア ッ セ イ を open 発 す る た め の research base plate な ら び を に technology to construct す る. The mass analyzer で the protein in the blood を単 dissociation is determined by する. 単 に blood サ ン プ ル を quality analysis meter で including に resolution す る の で は な く, differential proteomics method と い う two つ の サ ン プ ル を points draw し な が ら poor を beg す 検 を る method with い る. The above record 検 asks を to perform the ritual of た. Youdaoplaceholder0 seek に, SELDI TOF-MS machine ならびに, MALDI-TOF-MS machine を use 検 た. SELDI TOF - MS machine は, serum を 々 の surface processing さ れ た determination with マ ト リ ッ ク ス (プ ロ テ イ ン · チ ッ プ) に ア プ ラ イ し, painting す る こ と が may で あ る. Yang イ オ ン, Yin イ オ ン, ク ロ マ ト supporter others に processing さ れ た プ レ ー ト に サ ン プ ル を ア プ ラ イ し, ま た sorption, incorporated methods を plural setting す る こ と で above 256 tong り の conditions に つ い て beg し 検 た. Vascular damage の モ デ ル を with い た が, vascular injury す に appear when る ピ ー ク, reduce す る ピ ー ク を plural with fixed す る こ と に successful し た. The degree of <s:1> multiplicity <e:1> among individuals と is more difficult than that of <s:1> and discrimination な. Conditions set contains を め て, ヒ ト サ ン プ ル を with い た interstate の multiple others の を overcome す る た め に, kind of 々 の 検 line for を っ た が, decided to な デ ー タ が have ら れ る Duan Jie ま で は remnants read aloud な が ら to ら な か っ た. In the future, methodology をさらに improvement する is necessary がある. Down on the side, の including な ア プ ロ ー チ の he に, focus を ground っ た previously い shock of ち な ア プ ロ ー チ も import し た. Vessel wall に し, vascular damage に blood flow に さ れ る と exam え ら れ る protein を sentaku し, こ れ ら に す seaborne る イ ム ノ ア ッ セ イ を such as open 発 し た. The past に smooth muscle ミ オ シ ン heavy lock に す seaborne る determination started を 発 し, の artery dissociation disease diagnosis に お い て useful で あ る こ と を shown し た が, he マ ー カ ー に つ い て も beg し 検 た results, clinical 応 が expect で き る マ ー カ ー を with fixed で き た.

项目成果

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