癌抑制遺伝子産物Tobによる細胞増殖制御機構と細胞の癌化・老化機構の解析

抑癌基因产物Tob分析细胞增殖控制机制及细胞癌变/衰老机制

基本信息

  • 批准号:
    15770123
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2003
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2003 至 2004
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

増殖抑制因子Tobは生理的レベルでは細胞が静止期を維持することに寄与しており、その増殖抑制活性はMAP kinaseファミリーのErkI/2によるリン酸化で制御されていることを明らかにしてきた。さらに増殖制御の分子機構を明らかにするためにTobをbaitにしたyeast two-hybrid screeningを行った。Tobのリン酸化状態に応じて相互作用が変化する因子の同定も踏まえて、baitにはTobのリン酸化型変異体、非リン酸化型変異体を利用した。その結果、転写抑制に関わる分子や新規リン酸化酵素などを単離し、実際に細胞内の過剰発現の系で相互作用することを明らかにした。今回同定した分子は、リン酸化型Tob、非リン酸化型Tobのどちらとも結合するという結果であったが、いずれの分子もTobの増殖制御とかかわりが深いと考えられ、さらに解析を進めた。Tobと転写抑制に関わる分子は細胞の増殖を強調的に抑制するということがわかった。さらに、その転写抑制に関わる分子が結合するモチーフがTobのアミノ酸配列上にも存在することが分かり、その領域に点変異を導入したTob変異体は相互作用が顕著に弱くなることが分かった。また、これらTob上の点変異はすでに相互作用することを示しているCaf1やHADCなどの分子との相互作用にも強く影響することがわかった。他方、新規リン酸化酵素との関わりでは、TobはIn vitro、及びIn vivoで新規リン酸化酵素の自己リン酸化を抑制するということ、新規リン酸化酵素のキナーゼ活性は細胞増殖抑制に必要であることを明らかにした。
Proliferation inhibitory factor TobはPhysiological レベルではcell quiescent phase をmaintenance することに Send and しており, そのproliferation inhibitory activity はMAP KinaseファミリーのErkI/2によるリンacidificationでcontrolされていることを明らかにしてきた.さらに multiply controlのmolecule mechanismを明らかにするためにTobをbaitにしたyeast two-hybrid screeningを行った. Tob のリリン acidification state に応じて interaction が変化するfactor の同定もstep まえて, bait には Tob のリリン acidification type divergence, non-リン acidification type 変 isomer を utilization した.そのRESULTS, 転WRITE INHIBITION に switch わるmolecule や リン acidifying enzyme などを単leave し, 実 boundary に in the cell の 剰発 の system で INTERACTION することを明らかにした. This time, we will combine the results of the same molecular は, リン acidified type Tob, and non-リン acidified type Tob.あったが, いずれのmolecule もTobのproliferation control とかかわりが深いと考えられ, さらにanalytic を进めた. Tobと転WRITE inhibits the proliferation of molecules and cells and emphasizes the inhibition of するということがわかった.さらに, その転WRITE INHIBITION に关わるmolecule がcombination するモチーフがTobのアミノacid arrangement on にもexistent することが分かり、その区にPoint変differentを ImportしたTob変variantはInteractionが顕在に weakくなることが分かった.また、これらTob上の点変differentはすでにInteractionすることをshowしているCa f1やHADCなどのmolecule and interactionにもstrongくeffectすることがわかった. Other prescriptions, new regulations of リン acidifying enzyme, TobはIn vitro, andびIn Vivo's new regulation リン acidifying enzyme の own リン acidification を inhibition するということ, new regulation リThe activity of acidifying enzyme is necessary for inhibiting cell proliferation.

项目成果

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  • 资助金额:
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