癌抑制遺伝子産物Tobによる細胞増殖制御機構と細胞の癌化・老化機構の解析

抑癌基因产物Tob分析细胞增殖控制机制及细胞癌变/衰老机制

基本信息

  • 批准号:
    15770123
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2003
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2003 至 2004
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

増殖抑制因子Tobは生理的レベルでは細胞が静止期を維持することに寄与しており、その増殖抑制活性はMAP kinaseファミリーのErkI/2によるリン酸化で制御されていることを明らかにしてきた。さらに増殖制御の分子機構を明らかにするためにTobをbaitにしたyeast two-hybrid screeningを行った。Tobのリン酸化状態に応じて相互作用が変化する因子の同定も踏まえて、baitにはTobのリン酸化型変異体、非リン酸化型変異体を利用した。その結果、転写抑制に関わる分子や新規リン酸化酵素などを単離し、実際に細胞内の過剰発現の系で相互作用することを明らかにした。今回同定した分子は、リン酸化型Tob、非リン酸化型Tobのどちらとも結合するという結果であったが、いずれの分子もTobの増殖制御とかかわりが深いと考えられ、さらに解析を進めた。Tobと転写抑制に関わる分子は細胞の増殖を強調的に抑制するということがわかった。さらに、その転写抑制に関わる分子が結合するモチーフがTobのアミノ酸配列上にも存在することが分かり、その領域に点変異を導入したTob変異体は相互作用が顕著に弱くなることが分かった。また、これらTob上の点変異はすでに相互作用することを示しているCaf1やHADCなどの分子との相互作用にも強く影響することがわかった。他方、新規リン酸化酵素との関わりでは、TobはIn vitro、及びIn vivoで新規リン酸化酵素の自己リン酸化を抑制するということ、新規リン酸化酵素のキナーゼ活性は細胞増殖抑制に必要であることを明らかにした。
Rights colonization inhibitory factor Tob は physiological レ ベ ル で は cells が telogen を maintain す る こ と に send し て お り, そ の raised colonization inhibitory activity は MAP kinase フ ァ ミ リ ー の ErkI / 2 に よ る リ ン acidification で suppression さ れ て い る こ と を Ming ら か に し て き た. さ ら に raised colonization suppression の molecular institutions を Ming ら か に す る た め に Tob を bait に し た yeast two hybrid - screening line を っ た. Tob の リ ン acidification condition に 応 じ て が interaction - the す with fixed も step ま る factor の え て, bait に は Tob の リ ン acidification model - variants, non リ ン acidification model - variant を using し た. そ の results, planning to write suppression に masato わ る molecular や new rules リ ン acidification enzyme な ど を 単 し, be interstate の に cell through turning 発 is の is で す interaction る こ と を Ming ら か に し た. Today in a fixed し た molecular は, リ ン acidification Tob, non リ ン acidification model Tob の ど ち ら と も combining す る と い う results で あ っ た が, い ず れ の molecular も Tob の raised colonization suppression と か か わ り が deep い と exam え ら れ, さ ら に parsing を into め た. Tob と planning write inhibit に masato わ る molecular は を emphasize に inhibiting cell の raised colonization す る と い う こ と が わ か っ た. さ ら に, そ の planning write inhibit に masato わ る molecular が す る モ チ ー フ が Tob の ア ミ ノ acid column deserve に も exist す る こ と が points か り, そ に の field points - different を import し た Tob - variant は interaction が 顕 the に weak く な る こ と が points か っ た. ま た, こ れ ら Tob - の points on different は す で に interaction す る こ と を shown し て い る Caf1 や HADC な ど の molecular と の interaction に も strong く influence す る こ と が わ か っ た. Fang, new rules リ ン acidification enzyme と の masato わ り で は, Tob は In vitro, and び In vivo で new rules リ ン acidification enzyme の himself リ ン acidification を inhibit す る と い う こ と, new rules リ ン acidification enzyme の キ ナ ー ゼ inhibition に は cells raised colonization necessary で あ る こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

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