神経芽腫腫瘍抗原に対する人工免疫グロブリンレセプターを利用した新規免疫療法の開発

使用人工免疫球蛋白受体对抗神经母细胞瘤肿瘤抗原开发新型免疫疗法

• 批准号: 16659269
• 负责人: 土屋 滋
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659269/
• 关键词: 神経芽細胞腫; 人工抗原提示; 細胞障害性T細胞; 人工抗原提示細胞

神経芽細胞腫は極めて難治性の小児固形腫瘍であり、今まで抗癌化学療法に種々の工夫がなされて来たが、未だ確固たる治療法が存在しない。新たな発想による治療法の工夫が求められている所以である。われわれは、この小児悪性腫瘍に対する細胞療法の可能性を探るために、神経芽細胞腫の表面抗原として我々が発見したB2D抗原を利用した細胞療法の基礎実験を行った。得られた結果についてまとめる。1.胞障害性T細胞のモデル実験系として、EBウイルス感染自己B細胞株(自己B-LCL)に対するT細胞の応答系の作製を試みた。2x10^6/mlの末梢血に対し2分の1量の放射線照射自己B細胞を添加することで抗原刺激とし、2週後にIL-2を100u/ml添加し細胞障害を観察した。しかし、この方法による自己B-LCLに対する細胞障害性T細胞の誘導は確認されなかった。非自己同種B-LCL刺激による末梢血T細胞増殖には問題がないことから、至適培養条件確立は、間近と思われた。2.標的細胞のアポトーシス誘導の検出系としてcaspase3あるいはannexin Vとpropidium iodideを使用した場合のいずれが感度良くアポトーシスを検出可能かを検証したところ、caspase3の方が感度良くアポトーシスを検出する事がわかった。3.マウスIgG抗体をまぶしたダイナビーズに、抗CD3単クローン抗体、抗CD28単クローン抗体、B2D単クローン抗体を精製し、濃度を調整の上ダイナビーズに単独あるいは同時に結合させた。神経芽腫細胞に対する人工抗原提示細胞としての作用を期待している抗体・ダイナビーズ複合体であり、まず人末梢血リンパ球に対する増殖誘導能を検討した。培養3日目でIL-2を添加し、7日目まで細胞数を算定したところ、対照群に比較し3抗体を同時に結合させた群で約5倍の細胞数の増加が認められた。今後この現象の詳細な解析、実際の神経芽腫患者の末梢血での反応性、細胞障害活性などを検討する必要性が示唆された。

Neuroblastoma is extremely refractory to small solid tumors, and anti-cancer chemotherapy has been used to treat them for many years. The new treatment method is to seek the best treatment. To explore the possibility of cell therapy for these small tumors, we should explore the use of B2D antigen in cell therapy. The result is that you have to pay attention to it. 1. The study on the regulation of T cell response to EB virus infection in human B cell line (human B-LCL) 2 x 10^6/ml of peripheral blood was added to the B cells after 2 minutes of radiation exposure. 2 weeks later, IL-2 was added to the B cells to detect cell damage. This method was used to confirm the induction of cytotoxic T cells in B-LCL. The proliferation of peripheral blood T cells stimulated by non-allogeneic B-LCL is a problem until the appropriate culture conditions are established 2. The target cell is sensitive to the presence of an inhibitor, such as caspase-3, which can be detected when the inhibitor is used. 3. IgG antibody purification, concentration adjustment and simultaneous binding of anti-CD3 antibody, anti-CD28 antibody and B2D antibody Antibodies, antigen-induced immune complexes, and immune responses to human peripheral blood lymphocytes were investigated. The number of cells was calculated at day 3 and day 7 of culture, and the number of cells was increased by about 5 times compared with the number of cells bound by antibody at the same time. In the future, the detailed analysis of this phenomenon, the adverse reaction of peripheral blood and the necessity of cell damage activity in patients with neuropathy are discussed.

项目成果

Fludarabine- and cyclophosphamide-based nonmyeloablative conditioning regimen for transplantation of chronic granulomatous disease : possible correlation with prolonged pure red cell aplasia

用于慢性肉芽肿病移植的基于氟达拉滨和环磷酰胺的非清髓性预处理方案：可能与长期纯红细胞再生障碍性贫血相关

• 发表时间: 2004
• 期刊: Int J Hematol 79
• 作者: Uchiyama T;Kumaki S;Fujiwara M;Nishida Y;Hakozaki I;Imai K;Du W;Yoshinari M;Sasahara Y;Tsuchiya S.;Lan L;Yoshinari M;Jo EK;Dupre L;Fujiwara T
• 通讯作者: Fujiwara T

Characterization of a novel nonsense mutation in the interleukin-7 receptor α gene in a Korean patient with severe combined immunodeficiency

• DOI: 10.1532/ijh97.04026
• 发表时间: 2004-11-01
• 期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF HEMATOLOGY
• 影响因子: 2.1
• 作者: Jo, EK;Kook, H;Kumaki, S
• 通讯作者: Kumaki, S

Application of HSVtk suicide gene to X-SCID gene therapy : ganciclovir treatment offsets gene corrected X-SCID B cells.

HSVtk自杀基因在X-SCID基因治疗中的应用：更昔洛韦治疗抵消了基因校正的X-SCID B细胞。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Biochem.Biophys.Res.Commun. 341
• 作者: Uchiyama;H.Tanaka N.ほか
• 通讯作者: H.Tanaka N.ほか

X-linked severe combined immunodeficiency syndrome : the first Korean case with gamma c chain gene mutation and subsequent genetic counseling

X连锁严重联合免疫缺陷综合症：韩国首例伽马c链基因突变病例及后续遗传咨询

• 发表时间: 2004
• 期刊: J Korean Med Sci 19
• 作者: Uchiyama T;Kumaki S;Fujiwara M;Nishida Y;Hakozaki I;Imai K;Du W;Yoshinari M;Sasahara Y;Tsuchiya S.;Lan L;Yoshinari M;Jo EK;Dupre L;Fujiwara T;Jo EK
• 通讯作者: Jo EK

Lentiviral vector-mediated gene transfer in T cells from Wiskott-Aldrich syndrome patients leads to functional correction

• DOI: 10.1016/j.ymthe.2004.08.008
• 发表时间: 2004-11-01
• 期刊: MOLECULAR THERAPY
• 影响因子: 12.4
• 作者: Dupré, L;Trifari, S;Roncarolo, MG
• 通讯作者: Roncarolo, MG