NK細胞/樹状細胞ハイブリドによる新規癌免疫細胞療法の開発

使用 NK 细胞/树突状细胞杂交体开发新型癌症免疫细胞疗法

• 批准号: 16659289
• 负责人: 松江 弘之
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659289/
• 关键词: 樹状細胞; NK細胞; ハイブリド細胞; 癌免疫療法; Gap Junction

A.NK細胞と樹状細胞(DC)の融合細胞の作成マウス脾臓NK細胞と樹状細胞株の融合細胞(NK-DC Hybrids)の作成A/J(H-2^k)マウス皮膚由来の成熟DC株XS106とA/Jマウス由来脾臓NK細胞をPolyethylene glycol (PEG)法にて癒合させる。我々はすでに、HAT感受性、ネオマイシン耐性のXS106由来の細胞クローン(V2 DC)を樹立している。NK細胞はマウス脾臓細胞からマグネットビーズ(StemStep社)を用いて分離する。NK細胞はHAT耐性、neomycin感受性である。MK-DC Hybridsの選択には我々が開発したdouble selection (HAT+Neomycin)法を用いた。B.NK-DC Hybridsのin vitroの解析Phenotype : DC, NK細胞,NK-DC HybridsにつきphenotypeをFACSで解析し、3者間の発現レベルを検討した。また種々の刺激(LPS, agonistic anti-CD40 Abなど)でそれらの機能分子の発現変化を検討した。抗原提示機能:NK-DC Hybridsは抗原特異的抗原提示能とNK活性がなく、その原因とクローンのスクリーニングをしている。C.Gap juntion(Gj)を介した細胞間相互作用の解析:DCが抗原提示する際に、DC間のGjを介した情報伝達が重要であることを明らかにした。DC-NK Hybridが所属リンパ節内でのDCに抗原を渡し、活性化するのに重要なメカニズムと考え、解析中である。

A.NK cells and dendritic cells (DC) fusion cells and dendritic cells (NK-DC Hybrids) fusion cells and A/J(H-2k) skin derived mature DC strain XS106 A/J derived from spleen NK cells and Polyethylene glycol (PEG) method for healing. XS106 has been established for HAT susceptibility and genetic tolerance. NK cells are isolated from spleen cells by using the StemStep method. NK cells are HAT tolerant and neomycin sensitive. MK-DC Hybrids are selected using the open double selection (HAT+Neomycin) method. B. Analysis of NK-DC Hybrids in vitro Phenotype : DC, NK cells,NK-DC Hybrids The development of functional molecules is discussed in response to LPS, agonistic anti-CD40 Ab. Antigen indication function:NK-DC Hybrids are antigen-specific antigen indication function, NK activity, cause and change. C.Gap juntion(Gj) mediated cell-cell interaction analysis:DC antigen prompt, DC Gj mediated information transmission is important DC-NK Hybrid is an important component of DC antigen transition, activation, and analysis.