正常及び病的表皮(乾癬、皮膚癌)における葉酸受容体の発現と機能の解析

正常和病理表皮(牛皮癣、皮肤癌)中叶酸受体表达和功能的分析

基本信息

  • 批准号:
    05770586
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.7万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1993
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1993 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.葉酸受容体のヒト表皮における発現RT-PCR法により正常ヒト表皮及び乾癬病変部で発現が見られたが、我々の方法では発減量の差は評価できなかった。葉酸受容体に対するポリクローナル抗体を用いた組織染色では角層への被特異的染色により、局在を同定できず角層抗体の吸収などを試みている。2.生理的条件下で細胞増殖に最小限必要な細胞当たりの受容体数の決定葉酸受容体cDNAを含む発現ベクターをPAM212細胞にトランスフェクトし葉酸結合能を指標にし幾つかの葉酸受容体発現クローンを得た。各クローンの結合能(pmole/106cells)は,vector alone PAM212:0.00(surfface),0.04(ineternal),FR-1:0.04,0.11,FR-2:0.19,0.10,FR-3:1.10,0.35であった。これらのクローンにつき現在受容体数を解析中である。また生理的葉酸濃度下における増殖能を解析している。3.各種クローンに対するMTXの感受性の解析vector aloneのMTXに対するLD50は300nMであったのに対し、FR-3では100nMと低下していた。このことはMTXは葉酸受容体を介しても効率的に細胞内に取り込まれていることを示唆している。今後、FR-3のMTX結合能を調べる予定である。
1. Folic acid receptor epidermal development RT-PCR method for the development of normal epidermal and psoriasis parts of the development of a method to reduce the amount of negative evaluation Folic acid receptor specific antibodies are used in tissue staining, and in the same way as in the absorption test for corneal antibodies. 2. Under physiological conditions, the minimum necessary for cell proliferation determines the number of folate receptors in PAM212 cells. pmole/106cells,vector alone PAM212:0.00(surfface), 0.04 (isothermal),FR-1:0.04,0.11,FR-2:0.19,0.10,FR-3:1.10,0.35. The number of containers is now being analyzed. Under physiological folic acid concentration, the growth energy can be analyzed. 3. The sensitivity of MTX to all kinds of drugs was analyzed. The LD50 of MTX was 300nM, and the FR-3 was 100nM. This is the case with MTX receptors. In the future, FR-3 and MTX can be adjusted to a predetermined level.

项目成果

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