ナノテク・フラーレンによるリポ化DNAのアセンブルの変化

纳米技术富勒烯对脂解 DNA 组装的改变

基本信息

批准号：
16659385
负责人：
水野正明
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659385/
关键词：
ナノテクノロジーフラーレンリポソームプラスミドDNA 細胞

项目摘要

本研究では、再生医療、細胞医療、遺伝子医療等の先端医療を支える重要な技術のうち、外来遺伝子による細胞修飾技術の効率化を検討している。効率化を進めるための手段として、まずはナノテクノロジー産物であるフラーレンとDNAの複合体形成能を調べた。昨年度は、フラーレンとDNAの複合体形成能のうち、フラーレンとDNAの複合体形成の最適条件を検討し、1mMフラーレンに対し、10-20μgプラスミドDNAを添加することで、安定してDNAがトラップされることを示した。今年度は、この条件化での遺伝子発現の詳細を調べてみた。はじめに、フラーレンとDNAの複合体をリボソームに包埋したベクターを培養細胞に添加し、外来遺伝子の発現状況を、発現の強度及び発現時間を軸に調べた。その結果、DNAフラーレン包埋リポソームは細胞分裂期には染色体の動きに連動して移動し、核内にとどまり、遺伝子発現に繋がっていることがわかった。そして、その発現強度は、フラーレンとDNAの複合体を形成することで、より強くなり、かつ発現時間も有意に延長することが証明できた。一方、非分裂細胞では核膜近傍の細胞質内に集族していたDNAフラーレン包埋リポソームのうち、わずかなものからフリーのDNAが放出され、これが遺伝子発現に結びつくことが観察された。以上の結果は、ナノテクノロジー産物であるフラーレンとDNAの複合体形成により、外来遺伝子を効率よく、核内に移行させると同時に、外来遺伝子発現を長期化できることがわかった。これは、今後の遺伝子治療において大いに役立つ所見と考えられた。

这项研究是在支持先进医学治疗（例如再生医学，细胞医学和遗传医学）的重要技术中，研究细胞修饰技术的效率。作为提高效率的一种方式，我们首先研究了富勒烯，纳米技术产品和DNA的复杂形成能力。去年，我们研究了富勒烯-DNA复合物形成能力中富勒烯-DNA复合物形成的最佳条件，并表明通过将10-20μg质粒DNA添加到1 mm富勒烯中可以稳定地捕获DNA。今年，我们研究了该条件下基因表达的细节。首先，将富勒烯和DNA络合物嵌入核糖体中的载体被添加到培养的细胞中，并根据表达强度和表达时间检查外源基因的表达状态。结果，发现DNA富勒烯被包裹的脂质体与细胞分裂期间的染色体运动一起迁移，留在细胞核中并导致基因表达。证明，通过在富勒烯和DNA之间形成复合物，表达强度更强，并且表达时间显着扩展。另一方面，观察到，在非分裂细胞中，自由DNA是从少数DNA插入的脂质体中释放出来的，这些脂质体被分组在核膜的细胞质中，这与基因表达有关。以上结果表明，纳米技术产物富勒烯和DNA的复杂形成允许将外源基因有效地转移到细胞核中，同时还延长了外源基因的表达。这被认为是未来基因疗法的一个很好的发现。

项目成果

期刊论文数量（31）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Structure-based design of an agonistic peptide targeting Fas.

基于结构的 Fas 激动肽设计。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Apoptosis 10
影响因子：
0
作者：
小根山千歳;飯野琢也;斎藤一伸;鈴木慶;岡田雅人;篠原彰;Sei-ichi Tanuma;篠原彰;篠原彰;小根山千歳;Sei-ichi Tanuma
通讯作者：
Sei-ichi Tanuma

IFN-beta down-regulates the expression of DNA repair gene MGMT and sensitizes resistant glioma cells to temozolomide.

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Cancer research
影响因子：
11.2
作者：
A. Natsume;Dai Ishii;T. Wakabayashi;Takaya Tsuno;H. Hatano;M. Mizuno;J. Yoshida
通讯作者：
A. Natsume;Dai Ishii;T. Wakabayashi;Takaya Tsuno;H. Hatano;M. Mizuno;J. Yoshida

Susceptibility to exogenously added interferon-beta protein depends on intracellular interferon-beta mRNA level in human glioma cells.

对外源添加的干扰素-β 蛋白的敏感性取决于人神经胶质瘤细胞中细胞内干扰素-β mRNA 的水平。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Cytokine 32
影响因子：
0
作者：
Osawa H;et al.
通讯作者：
et al.

Growth inhibition of human pancreatic cancer cells by human interferon-beta gene combined with gemcitabine.

DOI：
10.3892/ijmm.15.2.277
发表时间：
2005-02
期刊：
International journal of molecular medicine
影响因子：
5.4
作者：
M. Endou;M. Mizuno;T. Nagata;K. Tsukada;Norimoto Nakahara;Takaya Tsuno;Hirokatsu Osawa;Tomohiko Kuno;M. Fujita;M. Hatano;J. Yoshida
通讯作者：
M. Endou;M. Mizuno;T. Nagata;K. Tsukada;Norimoto Nakahara;Takaya Tsuno;Hirokatsu Osawa;Tomohiko Kuno;M. Fujita;M. Hatano;J. Yoshida

Gene therapy for patients with malignant melanoma.

恶性黑色素瘤患者的基因治疗。