生体組織再生を目指した糖鎖リソグラフィーの開発

用于生物组织再生的聚糖光刻技术的发展

• 批准号: 17655070
• 负责人: 新倉 謙一
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17655070/
• 关键词: 糖転移酵素; 糖鎖; AFM; ナノバイオ; ナノ材料

生体内に広く存在する糖転移酵素1種であるβ-ガラクトース転移酵素(β-GalT)は、糖鎖生合成だけでなく、細胞表面に発現し受精など細胞間の接着に関与するレクチンとしても知られ生物学的にも医学的見地からも注目を集めている。そこで、本研究ではGalTのレクチン様作用の詳細を調べるため、人工的にGalTがクラスター化した状態をつくりだし、同じくクラスター化したNアセチルグルコサミン(GlcNAc)との結合する際の相互作用の解析を行った。相互作用は直接観察が可能な原子間力顕微鏡(AFM)を用いた。まずGalTとマルトース結合タンパク質との融合体タンパクであるMBP-GalT (Galactose transferase-fused Maltose binding protein)をマルトトリオースを介してAFMプローブに固定化した。 GalTの基質であるGlcNAcは、金薄膜上に自己組織化単分子膜(SAM)を形成させることでクラスター化させた。固定化GalTとクラスター化GlcNAc間のChemical Force測定を種々の条件で行った。MBP-GalTとGlcNAc単分子膜間には平均して95 pNの相互作用が見られた。GlcNAcの無い基板と比較した結果、40pN程度の差が観察された。プローブの形状からGlcNAcと相互作用可能なGalTは、数個程度と考えられる。このようにクラスター化したGalTとクラスター化したGlcNAc間では、相互作用が強く観測されることが分かった。本研究は糖転移酵素と基質との相互作用を直接計測した初めての例である。

Born in vivo に hiroo く exist す る sugar planning one shift enzyme で あ る beta ガ ラ ク ト ー ス planning shift enzyme (beta GalT) は biosynthesis, sugar lock だ け で な く, cell surface に 発 now し fertilization な ど intercellular の then に masato and す る レ ク チ ン と し て も know ら れ biology に も medical advertisements か ら も attention を set め て い る. そ こ で, this study で は GalT の レ ク チ ン others role の detailed を adjustable べ る た め, artificial に GalT が ク ラ ス タ ー change し た state を つ く り だ し, with じ く ク ラ ス タ ー change し た N ア セ チ ル グ ル コ サ ミ ン (GlcNAc) と の combining す る interstate の interaction の parsing line を っ た. Interaction direct 観 observation が possible な interatomic force 顕 micromirror (AFM)を use 観 た た. ま ず GalT と マ ル ト ー ス combining タ ン パ ク qualitative と の fusion タ ン パ ク で あ る MBP - GalT (Galactose transferase - fused Maltose binding protein) を マ ル ト ト リ オ ー ス を interface し て AFM プ ロ ー ブ に immobilized し た.​ GalT の matrix で あ る GlcNAc は, gold membrane に yourself organized 単 molecular membrane (SAM) を form さ せ る こ と で ク ラ ス タ ー change さ せ た. Immobilized GalTと <s:1> ラスタ ラスタ ラスタ と the <s:1> of GlcNAc <s:1> Chemical Force is used to determine を kinds of 々 <s:1> conditions で and った. MBP-GalTとGlcNAc単 intermolecular membrane に られた average <s:1> て95 pN <s:1> interaction が can be seen in られた. GlcNAc <s:1> without <s:1> substrate と comparison of た results, 40pN degree <s:1> difference が観 examination された. Youdaoplaceholder0 プロ ブ ブ プロ shape と らGlcNAcと interaction may なGalT, several degrees と test えられる. こ の よ う に ク ラ ス タ ー change し た GalT と ク ラ ス タ ー change し た GlcNAc between で は, strong interaction が く 観 measuring さ れ る こ と が points か っ た. In this study, the <s:1> glycolic 転 enzyme と matrix と <s:1> interaction を was directly measured by <s:1> た initial めて <s:1> example である.

项目成果

Patterned immobilization of unprotected carbohydrates on the aminooxy polymer-grafted solid surface

未受保护的碳水化合物在氨氧基聚合物接枝固体表面上的图案化固定

• 发表时间: 2007
• 期刊: Bull. Chem. Soc. Jp. (印刷中)
• 作者: Daisuke HORII;Mahito ATOBE;Toshio FUCHIGAMI;Frank MARKEN;跡部 真人;K.Niikura;R.Kamitani
• 通讯作者: R.Kamitani

Specific cell behavior of human fibroblast onto carbohydrate surface detected by glycoblotting films

通过糖印迹膜检测碳水化合物表面上人成纤维细胞的特定细胞行为

• 发表时间: 2006
• 期刊: Biomacromolecules 7
• 作者: Daisuke HORII;Mahito ATOBE;Toshio FUCHIGAMI;Frank MARKEN;跡部 真人;K.Niikura;R.Kamitani;T.Onodera
• 通讯作者: T.Onodera

Molecular Design of Glycoprotein Mimetics: Glycoblotting by Engineered Proteins Having an Oxylamino-Functionalized Amino Acid Residue

糖蛋白模拟物的分子设计：通过具有氧氨基功能化氨基酸残基的工程蛋白质进行糖印迹

• 发表时间: 2005
• 期刊: Chem. Eur.J 11
• 作者: Isobe;H.et al.;国武豊喜 編集;K.Niikura;R.Kamitani;T.Onodera;新倉謙一;N.Matsubara
• 通讯作者: N.Matsubara

Chemical and enzymatic synthesis of glycocluster having seven sialyl lewis X arrays using β-cyclodextrin as a key scaffold material

• DOI: 10.1016/j.tet.2004.12.035
• 发表时间: 2005-02-14
• 期刊: TETRAHEDRON
• 影响因子: 2.1
• 作者: Furuike, T;Sadamoto, R;Nishimura, SI
• 通讯作者: Nishimura, SI

目的物質の核内送達用ベクター

用于核内递送目标物质的载体

• 发表时间: 2006