減数分裂期組換え体形成過程の解析:一分子染色体の遺伝情報変化検出方法の確立による

减数分裂重组形成过程分析：检测单分子染色体遗传信息变化方法的建立

• 批准号: 17657058
• 负责人: 寺澤 匡博
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Iwate College of Nursing
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17657058/
• 关键词: 減数分裂期組換え; チミジンアナログ; DNA combing; Rad51; Zip1; Mer3; MRDS

酵母に外来遺伝子を導入して、培地に加えたチミジン誘導体をDNAに効率よく取込むことのできる株を作成した。DNAに取込まれたチミジン誘導体は、その誘導体に特異的に反応する蛍光標識した抗体を用いて、それらをfocusとして顕微鏡下で観察することができた。この系を用いて減数分裂期組換えに伴って起こるDNA合成(MRDS:Meiotic Recombination DNA Synthesis)を酵母で初めて検出し、そのMRDSについて以下のことを明らかにした。1.減数分裂期組換え欠損変異株(spo11Δ)と野生型株を対比して、減数分裂期に導入後、3時間以降にチミジン誘導体を培地に添加するとDNA複製とは区別してMRDSを特異的に標識できることを発見した。2.MRDSが行われる時期は、組換えに関与する蛋白質Rad51の解離の後、シナプトネマ複合体形成の直前か形成時であった。3.MRDSの行われる場所は、DNA combing法にFISHを組合わせた方法を用い、(1)DNA二重鎖切断の起こる組換えのホットスポット領域に集中していること、(2)DNA二重鎖切断のどちら側かに存在するか、または切断部位をまたいで存在するものもあることを明らかにした。(3)野生株ではどちらか片側に存在するものが、交叉型組換え欠損株(mer3Δ)において切断部位をまたいで存在するものが多いことを明らかにした。それぞれ交叉型組換え、非交叉型組換え由来のMRDSと考えられ、これらのMRDSの存在様式は、現在主流となっている組換えモデルの直接的な証拠となる。4.野生株のMRDSの長さは、1-2kbのものが大部分であった。また交叉型組換え欠損株(mer3Δ)では1kb程度とMRDSの長さが短いことがわかり、MRDSの長さと組換えの種類の関係を論じることができた。

This is how we can efficiently introduce foreign genes into yeast and add Eta Chi-jin inducers to DNA in culture. The DNA was extracted from the cells and the cells were observed under microscopes. This is the first time that DNA synthesis (MRDS) has been initiated in yeast, and the next time that DNA Synthesis has been initiated in MRDS. 1. In meiosis stage, the mutant (spo11Δ) was replaced by wild-type strain, and in meiosis stage, after introduction, DNA replication was added to the culture, and MRDS was identified. 2. MRDS is related to protein Rad51 dissociation and protein Rad51 complex formation. 3. MRDS can be used in combination with FISH in DNA combining method.(1)DNA double-lock cleavage is concentrated in the field.(2)DNA double-lock cleavage exists in the side. (3)Wild plants have many different types of plants, such as mer3, mer3, mer4, mer5, mer6, mer7, mer8, mer9, mer9 The MRDS of cross type and non-cross type is composed of the MRDS of cross type and non-cross type. The MRDS of cross type and non-cross type is composed of the MRDS of cross type and non-cross type. 4. Wild plants MRDS are long, 1-2kb long and most of them are short. The relationship between the length of MRDS and the type of MRDS is discussed.

项目成果

Condensin loaded onto the replication fork barrier site in the rRNA gene repeats during S phase in a BOB1-dependent fashion to prevent contraction of a long repetitive array in Saccharomyces cerevisiae.

装载到 rRNA 基因复制叉屏障位点上的凝缩蛋白在 S 期以 BOB1 依赖性方式重复，以防止酿酒酵母中长重复阵列的收缩。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Mol Cell Biol. 26(6)
• 作者: Johzuka K;Terasawa M;Ogawa H;Ogawa T;Horiuchi T.
• 通讯作者: Horiuchi T.

Meiotic recombination-related DNA synthesis and its implications for cross-over and non-cross-over recombinant formation

• DOI: 10.1073/pnas.0611490104
• 发表时间: 2007-04-03
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Terasawa, Masahiro;Ogawa, Hideyuki;Ogawa, Tomoko
• 通讯作者: Ogawa, Tomoko