多環芳香族炭化水素類(PAH)-DNA付加体を指標とするPAH曝露評価法の開発

以多环芳烃（PAH）-DNA加合物为指标的PAH暴露评估方法的建立

• 批准号: 17659036
• 负责人: 鳥羽 陽
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659036/
• 关键词: 多環芳香族炭化水素; バイオマーカー; DNA付加体; ベンゾ[a]ピレン; LC-MS; MS; シトクロムP450

多環芳香族炭化水素(PAH)のなかで特に強い発がん作用を有するBenzo[a]pyrene(BaP)に着目し、BaPが代謝活性化されて生成する発がん作用の本体であるBaP-DNA付加体を生体指標(バイオマーカー)として用いるために、BaP-DNA付加体の高速液体クロマトグラフ-タンデム質量分析計(LC-MS/MS)を用いた新しい高感度分析法の開発を試みた。DNA付加体関連物質としてdG-BPDE、及びdG-BPDEを加水分解して得られるBaP tetrolをBaP-DNA付加体の分析対象化合物としてLC-MS/MSの条件検討を行った。分子量関連イオンをプリカーサーイオンとしてdG-BPDEのMS/MSスペクトルを得たところ、グアニン残基が脱離したイオンが観察され、このイオンを効率よく生成させるように、移動相条件、電圧等を最適化した。これに順じてBaP tetrolのLC-MS/MS条件を最適化するとともに、蛍光検出HPLCによる分析法も確立した。確立した分析法を培養細胞にBaPを暴露して得られたDNAに適用したところ、発がん作用の本体として知られる代謝生成物のanti-BPDEに由来するBaP-DNA付加体をBaP tetrolとして検出することができた。細胞のBaP処理24時間後からBPDE-DNA付加体が観察され、処理時間に依存して付加体量の増加が見られた。続いてDNA付加体を利用したヒトの曝露評価を行うためのバイオマーカーの開発を行った。被験者への負担(侵襲性)の観点から尿中のBaP-DNA付加体関連物質をバイオマーカー候補として、DNA付加体を加水分解して得られる尿中tetrolの検出を試みたが、前処理法の回収率の低さなどの改善の余地が残った。

The development of a novel high sensitivity analytical method for BaP-DNA adducts and biological indicators (LC-MS/MS) has been tested. DNA additive-related substances such as dG-BPDE and dG-BPDE were hydrolyzed to obtain BaP tetral and BaP-DNA additive-related analytical target compounds and LC-MS/MS conditions. Molecular weight correlation: MS/MS optimization, mobile phase optimization, voltage optimization, etc. The analytical method was established by optimizing the LC-MS/MS conditions for BaP tetrol. To establish the origin of BaP-DNA adducts in cultured cells, BaP tetrol was used to detect the presence of BaP-DNA adducts in cultured cells. After 24 hours of BaP treatment, BPDE-DNA adducts were detected and the amount of adducts increased depending on the treatment time. The development of DNA transfer systems is an important part of the process. The burden (invasiveness) of the affected person is not limited to BaP-DNA additive-related substances in urine. There is room for improvement in the recovery rate of tetrol in urine by pretreatment.

项目成果

Particulate polycyclic aromatic hydrocarbons and their nitrated derivatives in three cities in Liaoning Province, China

• DOI: 10.1080/15275920601180701
• 发表时间: 2007-03-01
• 期刊: ENVIRONMENTAL FORENSICS
• 影响因子: 1.8
• 作者: Hattori, Tetsuyuki;Tang, Ning;Hayakawa, Kazuichi
• 通讯作者: Hayakawa, Kazuichi

Long-range transportation of polycyclic aromatic hydrocarbons and nitropolycyclic aromatic hydrocarbons from China to Japan

多环芳烃、硝基多环芳烃从中国到日本的长途运输

• 发表时间: 2006
• 作者: Yang;X-Y.;Okada;Y.;Tang;N.;Toriba;A.;Hayakawa;K.
• 通讯作者: K.

Evaluation of estrogenic activities of hydroxylated polycyclic aromatic hydrocarbons in cigarette smoke condensate

• DOI: 10.1016/j.fct.2005.02.004
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: FOOD AND CHEMICAL TOXICOLOGY
• 影响因子: 4.3
• 作者: Kamiya, M;Toriba, A;Hayakawa, K
• 通讯作者: Hayakawa, K

Rapid and sensitive determination of tryptophan, serotonin and psychoactive tryptamines by thin-layer chromatography/fluorescence detection.

• DOI: 10.1016/j.chroma.2007.01.061
• 发表时间: 2007-03
• 期刊: Journal of chromatography. A
• 作者: N. Kato;T. Kojima;S. Yoshiyagawa;H. Ohta;A. Toriba;Hideo Nishimura;K. Hayakawa

Determination of 1-nitropyrene metabolites by high performance liquid chromatography with chemiluminescence detection

高效液相色谱化学发光检测法测定 1-硝基芘代谢物

• 发表时间: 2006
• 期刊: J. Chromatogr. A 1107
• 作者: Hayakawa;K.;Lu;C.;Mizukami;S.;Toriba;A.;Tang;N.
• 通讯作者: N.