Exosomeを用いた「機能分子移植療法」の開発

开发利用外泌体的“功能分子移植疗法”

• 批准号: 17659391
• 负责人: 片野 光男
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659391/
• 关键词: エキソゾーム; 分子移植; 伝達物質; 遺伝子治療; 機能分子; CEA

前年度の研究結果を受け、本研究の第一目標であるexosomeが他の細胞の膜へ移動・融合し新たな機能分子として働くことを確認する作業に焦点を合わせた。方法としては、exosomeの分泌能が高くかつ分離精製が比較的容易なヒト末梢血由来樹状細胞を標的とし、アデノウイルスベクターによるHER2あるいはCEA発現システムを作り、この系を用いて、1)exosome上へのHER2およびCEAの発現および2)Exosomeの他の細胞への移動・接着を検討した。1)遺伝子導入した樹状細胞では膜表面での明らかな発現をFACSにて捕らえることはできなかったが、興味あることに、これら遺伝子導入樹状細胞より分泌されるexosomeへの発現がFACSにて確認された。すなわち、遺伝子導入により細胞膜への発現がなくともexosome上には発現誘導しうる可能性が初めて示唆された。2)さらに、遺伝子導入した樹状細胞の分泌したHER2やCEAを発現するexosomeが標的細胞膜上へ移動する像を共焦点レーザー顕微鏡により捕らえることができた。今回の研究において、exosome上に新たな分子を発現させることが可能であり、この分子が他の細胞膜へ移動・接着することはほぼ確認できた。しかし、本年度もこれら膜上に接着した新たな分子が機能していることは確認できなかった。しかし、本年度の研究成果は、「exosomeによる機能分子移植」といった全く新しい研究領域創生の可能性を支持する結果であり、他の機能測定が容易なレセプター系の遺伝子導入による系を検討中である。

The first objective of this study is to identify new functional molecules in the membrane. Methods: 1) The secretion of exosome is highly efficient and easy to separate and refine. 2) The migration of exosome from dendritic cells of peripheral blood is discussed. 1)Exosomes are secreted from dendritic cells by FACS and confirmed by FACS. The possibility of cell membrane development induced by gene introduction is initially demonstrated. 2) The expression of CEA in dendritic cells is mainly due to the migration of CEA to the target cell membrane. This research is based on the discovery of new molecules on exosome, and the identification of new molecules on other cell membranes. This year's new molecular function was confirmed. This year's research results support the possibility of creating new research areas such as "exosome" functional molecule transplantation,"and other functional assays are easy to detect and discuss in the system of gene introduction.

项目成果

Purification, characterization and biologic significance of tumor-derived exosomes

肿瘤来源的外泌体的纯化、表征和生物学意义

• 发表时间: 2005
• 期刊: Anticancer Reserarch 25
• 作者: Nakashima H;Nakamura M;Yamaguchi H;Yamanaka N;Akiyoshi T;Koga K;Tsuneyoshi M;Tanaka M;Katano M;片野 光男;Nakashima H. et al.;Tanaka T. et al.;Shibata S. et al.;Kubo M.et al.;Onishi H. et al.;Katano M. et al.;Koga K.et al.
• 通讯作者: Koga K.et al.

腫瘍制御学分野における「免疫学を基盤とした腫瘍制御法開発」の現状

肿瘤控制科学领域“基于免疫学的肿瘤控制方法的发展”现状

• 发表时间: 2006
• 期刊: 福岡医学雑誌 97
• 作者: Nakashima H;Nakamura M;Yamaguchi H;Yamanaka N;Akiyoshi T;Koga K;Tsuneyoshi M;Tanaka M;Katano M;片野 光男
• 通讯作者: 片野 光男