骨再生過程における骨髄由来循環幹細胞の役割:parabiosisモデルを用いて

骨髓来源的循环干细胞在骨再生过程中的作用：使用联体共生模型

• 批准号: 17659472
• 负责人: 安井 夏生
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659472/
• 关键词: 未分化間葉系幹細胞; 末梢血; マウス; parabiosis; GFP; 仮骨延長術; 免疫染色; osteocalcin; オステオカルシン

1,parabiosis modelを用いて骨髄由来末梢血中幹細胞の骨折治癒への関与について検討した。全身の組織が緑色に発光するGFP(Green Fluorescent Protein transgenic)マウスと同系統のマウスとの交配から生まれる同腹のGFPマウスおよびwild type (WT)マウスを得た。GFPマウスおよびWTマウスからそれぞれの末梢血を採取した。フローサイトメトリーを用いて末梢血中のGFP陽性細胞の比率を計測した。GFPマウス末梢血中のGFP陽性細胞は約61%であり、WTマウスでは約0.4%であった。さらにこれらのマウスを使ってparabiosis modelを作製すると、手術後2週時点でGFPマウスで39%,WTマウスで35%のGFP陽性細胞がそれぞれの末梢血を循環している(すなわち末梢循環を共有している)ことが確認できた。この時点で、WTマウスの右脛骨を骨折させ、独自に作製したリング型の創外固定器を用いて、骨折部を安定化させ骨折治癒を組織学的に観察した。骨折1、2週の時点で骨折部には仮骨形成を認め、仮骨は軟骨細胞、骨芽細胞から構成されているが、おそらく骨芽細胞と考えられる細胞の一部に抗GFP抗体陽性の細胞が同定された。これにより我々の作製した実験系でも末梢血を循環していた細胞が、骨折部に動員されていることを証明した。骨折後3週の時点では骨は修復されており、骨折部にGFP陽性細胞は同定されなかった。2、骨折部に動員された末梢血由来の細胞が骨芽細胞であるかどうかを証明するために、骨芽細胞および骨細胞に特異的なマーカーである抗osteocalcin抗体を用いて免疫染色を行った。連続切片にてGFP陽性細胞の存在する部位の細胞はすべてosteocalcin陽性であり、骨折部に動員されたGFP陽性細胞は骨芽細胞であると考えられた。今回の研究で骨髄由来末梢血循環幹細胞は、骨折治癒過程において骨芽細胞に分化し、骨折部に動員されると結論した。

1,Parabiosis model is used to investigate the relationship between bone marrow stem cells in peripheral blood and fracture healing. Green Fluorescent Protein Transgenic (GFP) from Whole Body Tissue GFP is the best way to collect blood The percentage of GFP positive cells in peripheral blood was measured using the method. GFP-positive cells in GFP terminal blood were about 61% and WT cells were about 0.4%. In addition, GFP was detected in 39% and 35% of GFP positive cells in peripheral blood circulation at 2 weeks after surgery. At this time, the fracture of the right tibia was observed, the fracture was stabilized, and the fracture was observed histologically. At 1 and 2 weeks after fracture, some of the cells with anti-GFP antibody positive were identified as bone formation, cartilage and bone bud cells. The blood circulation in the peripheral blood and the mobilization in the fracture area are proved. At 3 weeks after fracture, GFP positive cells in bone repair and fracture sites were stable. 2. Mobilization of peripheral blood-derived cells from fracture sites was demonstrated by immunostaining with anti-osteocalcin antibodies specific to bone bud cells. GFP-positive cells were mobilized from bone marrow, bone marrow, and bone marrow. Conclusion: Bone marrow stem cells originated from peripheral blood circulation, bone bud differentiation and bone fracture mobilization during fracture healing.

项目成果

Association between single-nucleotide polymorphisms in the SEC8L1 gene, which encodes a subunit of the exocyst complex, and rheumatoid arthritis in a Japanese population

• DOI: 10.1002/art.21013
• 发表时间: 2005-05-01
• 期刊: ARTHRITIS AND RHEUMATISM
• 作者: Hamada, D;Takata, Y;Itakura, M
• 通讯作者: Itakura, M

Bisphosphonate modulates morphological and mechanical properties in distraction osteogenesis through inhibition of bone resorption.

• DOI: 10.1016/j.bone.2006.03.010
• 发表时间: 2006-09
• 期刊: Bone
• 影响因子: 4.1
• 作者: Mitsuhiko Takahashi;K. Yukata;Y. Matsui;A. Abbaspour;S. Takata;N. Yasui

A novel type of EWS-CHOP fusion gene in myxoid liposarcoma

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2006.07.085
• 发表时间: 2006-09-22
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Matsui, Yoshito;Ueda, Takafumi;Yoshikawa, Hideki
• 通讯作者: Yoshikawa, Hideki

JRAB/MICAL-L2 Is Junctional Rab13-binding Protein Mediating the Endocytic Recycling of Occludin.

JRAB/MICAL-L2 是介导 Occludin 内吞再循环的连接 Rab13 结合蛋白。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Molecular Biology of the Cell 17
• 作者: Tomoaki Kato;et. al.;Yonehiro Kanemura;Kubo T;Takahashi M;Suzue N;Goto T;Matsui Y;Terai T
• 通讯作者: Terai T

MRI Characteristics of Parosteal Lipomas Associated with the HMGA2-LPP Fusion Gene

HMGA2-LPP融合基因相关骨旁脂肪瘤的MRI特征

• 发表时间: 2006
• 期刊: ANTICANCER RESEARCH 26
• 作者: Tomoaki Kato;et. al.;Yonehiro Kanemura;Kubo T;Takahashi M;Suzue N;Goto T;Matsui Y;Terai T;Kubo T
• 通讯作者: Kubo T