汚染環境を生物によって修復するための環境浄化微生物の現位置育種方法の開発

环境净化微生物原位育种方法的开发，用于污染环境的生物修复

基本信息

批准号：
18651039
负责人：
遠藤銀朗
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Tohoku Gakuin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、微生物の遺伝子転移能力を活用することによって、原位置分子育種法(in situ molecular breeding法)という新しい環境汚染浄化生物の育種法を開発することを目的として行った。本年度の研究では、水銀耐性細菌Bacillus megaterium MB1株から発見されたグループIIイントロンのB.me.I1を研究対象とし、細菌性グループIIイントロンのスプライシングに必須と思われた因子の一つであるIEPタンパク質に着目し、in vivo及びin vitroでそれぞれ実験系を組み、B.me.I1のスプライシング現象を検討した。大腸菌のクローニング系を用いた実験結果から、B.me.I1はin vivoでタンパク質非依存的に自己スプライシング現象ヲ行うことが確認された。また、RT-PCR、サーザン法及びノーザン法を用いてin vitroで解析した結果により、これまで報告されてきた細菌性グループIIイントロンと異なり、B.me.IlのスプライシングにはIEPタンパク質は必須とされないことが確認された。さらに、細菌性グループIIイントロン左B.me.I1は、IEP遺伝子領域を環境浄化に関与する遺伝子に置き換えてもin vivoでスプライシングが可能であることが確認できた。ホーミング現象に関する今後の研究の進展によっては、これらのプロセスによる遺伝子伝播を適用することによって、原位置分子育種法に細菌性グループIIイントロンを活用する可能性を示すことができた。

进行这项研究的目的是开发一种新方法，用于通过利用微生物的基因传递能力来为环境污染净化净化生物，称为原位分子繁殖。 In this year's study, we investigated the group II intron B.me.I1, which was discovered in the mercury-resistant bacteria Bacillus megaterium MB1, and focused on the IEP protein, one of the factors that seemed essential for splicing of the bacterial group II intron, and investigated the splicing phenomenon of B.me.I1 in11 by conducting experimental systems in vivo and in vitro.使用大肠杆菌克隆系统的实验证实了b.me.i1在蛋白质独立于体内自拼变现象中起作用。此外，使用RT-PCR，sazanne方法和北部方法的体外分析结果证实，与先前报道的细菌II组内含子不同，IEP蛋白对于B.Me.il的剪接不是必不可少的。此外，可以证实，即使IEP基因区域被参与环境纯化的基因代替，也可以在体内剪接左B.Me.i1的细菌II组内含子。根据未来对归巢现象的研究，可以证明通过通过这些过程应用基因传播来利用细菌II组内含子原位分子育种方法。