プロテオームを基盤とする膠原病関連新規自己抗体の同定・解析法の確立

基于蛋白质组的新型胶原病相关自身抗体鉴定分析方法的建立

• 批准号: 18651097
• 负责人: 小森 浩章
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18651097/
• 关键词: 無細胞蛋白質合成系; AlphaScreen法; 自己抗体; 自己免疫疾患; 疾患モデル動物; 組み換え近交系; 膠原病; 無細胞タンパク質合成系; 疾患モデル; MRL; lprマウス; 組換え近交系; genomics

目的:無細胞タンパク質合成系とAlphaScreen法、ならびに膠原病関連組換え近交系MXH/lprマウスを組合わせ、膠原病の病因・病態解析や病状の把握に有用な新規自己抗体をhigh-throughputに検出、同定する手法の確立を試みた。方法:これまでにMRL/lprマウスとC3H/lprマウス(組換え近交系MXH/lprの親系統)の交配系を用いて同定された膠原病関連疾患感受性遺伝子座から位置的候補遺伝子を120個選び、無細胞タンパク質合成系によりビオチン融合蛋白質を合成した。これらの合成蛋白質に対する血清中自己抗体の有無を、組換え近交系MXH/lprマウスと両親系統の計15系統を対象に、AlphaScreen法を用いて解析した。検出された自己抗体価と血管炎病態の組織学的スコアとの関連を統計学的に解析した。結果:解析の結果、血管炎病態と統計学的に有意な相関(P<0.05)を示す17個の新規自己抗体が認められた。検出された自己抗体は月齢により異なるものであった。今後は無細胞合成蛋白質系を用いたELISA systemの樹立によりAlphaScreen法による解析結果を定量的に検証する実験系の確立を目指す。結論:本systemはhigh throughputな新規自己抗体検出に非常に有用である。

Purpose: Cell-free DNA synthesis system and AlphaScreen method, NANO collagen disease-related group exchange and inbred system MXH/lprマウスを combination system, glue The causes and pathological analysis of the original disease and the grasp of the symptoms are useful, the new rules of autoantibodies are high-throughput, and the same techniques are established and tested. Method: これまでにMRL/lprマウスとC3H/lprマウス (replacement of inbred system MXH/lprのparent system) and mating system using いて同定されたThere are 120 candidates for collagen disease-related disease susceptibility syndrome, and cell-free biomass synthesis system fusion protein synthesis system.これらのSynthetic protein に対するThe presence or absence of autoantibodies in the serum のを、The inbred system MXH/lprマウスと両parent system のmeter 15 system を対Elephant に、AlphaScreen method いてanalysis した.検出されたAutoantibodies and vasculitis pathological histological correlations and statistical analysis of にした. Results: There was a statistically significant correlation (P<0.05) between the analytical results, vasculitis pathology, and the identification of 17 new autoantibodies.検出されたown antibodies は月颢によりisoなるものであった. In the future, the establishment of a cell-free protein synthesis system using the AlphaScreen method and the quantitative analysis results of the ELISA system will be used to prove the establishment of the system. Conclusion: This system has high throughput and is very useful in producing new antibodies.

项目成果

An epistatic effect of the female specific loci on the development of autoimmune vasculitis and antinuclear autoantibody in murine lupus

• DOI: 10.1136/ard.2005.040832
• 发表时间: 2005-09
• 期刊: Annals of the Rheumatic Diseases
• 影响因子: 27.4
• 作者: M-C Zhang;N. Misu;H. Furukawa;Y. Watanabe;M. Terada;H. Komori;T. Miyazaki;M. Nose;M. Ono

Cappuccino mutation in an autoimmune-prone strain of mice suggests a role of platelet function in the progression of immune complex crescentic glomerulonephritis.

• DOI: 10.1002/art.22059
• 发表时间: 2006-09
• 期刊: Arthritis and rheumatism
• 作者: Minako Yoshida;K. Saiga;T. Hato;Shoko Iwaki;T. Niiya;N. Arita;H. Komori;T. Tsubaki;H. Furukawa;M. Terada;K. Maeyama;K. Nemoto;M. Nose;M. Ono

A signal adaptor SLAM-associated protein regulates spontaneous autoimmunity and Fas-dependent lymphoproliferation in MRL-Faslpr lupus mice

• DOI: 10.4049/jimmunol.176.1.395
• 发表时间: 2006-01-01
• 期刊: JOURNAL OF IMMUNOLOGY
• 影响因子: 4.4
• 作者: Komori, H;Furukawa, H;Ono, M
• 通讯作者: Ono, M