レーザー細胞破壊技術を用いた寄生蠕虫感染型幼虫の特殊細胞・器官の機能と役割の検証

本研究の目的は、マイクロポイントインターフェースシステムによって特殊器官が破壊された住血吸虫セルカリアと糸状虫感染幼虫の刺激応答反応の変化を観察することにより、特殊器官の機能を明らかにすることである。平成18年度にS.mansoniセルカリアの運動を一時停止させるNaN3の至適濃度を検討し、レーザービームによるacetabular glands破壊条件を検討した。しかし細胞破壊の確実性と幼虫の生存率に問題が残った。平成19年度はさらにビーム照射条件の改善を検討したが、いまだ、他の細胞を破壊せず確実にacetabular glandsを破壊できる、信頼性があり公表できる技術開発にいたってない。しかし、acetabular glands周辺にレーザー照射を受けたセルカリアは脂肪酸刺激による皮膚への侵入運動を発現しないことは確かめられ、acetabular glandsがセルカリアの皮膚侵入に重要な役割をはたしていることは明らかになった。一方B. pahangi感染幼虫のamphidsのレーザーによる破壊は角皮が厚いために不可能と判断した。そこで糸状虫のamphidsの機能を追求する代替実験、amphidsの被覆実験、を行った。感染幼虫に走化性運動を発現させる物質を含む血清中に飼育された幼虫は血清への走化性を失うが、洗浄によって走化性運動は回復することが明らかとなった。この実験結果はamphidsが幼虫の走化性運動発現に重要な機能を果たしていることを示す。本研究により、住血吸虫セルカリアのacetabular glandsと糸状虫感染幼虫のamphidsが刺激応答反応に重要な役割をはたしていることが明らかとなった。

本研究の目的は、マイクロポイントインターフェースシステムによって特殊器官が破壊された住血吸虫セルカリアと糸状虫感染幼虫の刺激応答反応の変化を観察することにより、特殊器官の機能を明らかにすることである。平成18年度にS.mansoniセルカリアの運動を一時停止させるNaN3の至適濃度を検討し、レーザービームによるacetabular glands破壊条件を検討した。しかし細胞破壊の確実性と幼虫の生存率に問題が残った。平成19年度はさらにビーム照射条件の改善を検討したが、いまだ、他の細胞を破壊せず確実にacetabular glandsを破壊できる、信頼性があり公表できる技術開発にいたってない。しかし、acetabular glands周辺にレーザー照射を受けたセルカリアは脂肪酸刺激による皮膚への侵入運動を発現しないことは確かめられ、acetabular glandsがセルカリアの皮膚侵入に重要な役割をはたしていることは明らかになった。一方B. pahangi感染幼虫のamphidsのレーザーによる破壊は角皮が厚いために不可能と判断した。そこで糸状虫のamphidsの機能を追求する代替実験、amphidsの被覆実験、を行った。感染幼虫に走化性運動を発現させる物質を含む血清中に飼育された幼虫は血清への走化性を失うが、洗浄によって走化性運動は回復することが明らかとなった。この実験結果はamphidsが幼虫の走化性運動発現に重要な機能を果たしていることを示す。本研究により、住血吸虫セルカリアのacetabular glandsと糸状虫感染幼虫のamphidsが刺激応答反応に重要な役割をはたしていることが明らかとなった。