レトロウイルス構造タンパク質の細胞膜輸送に関与する宿主因子の迅速同定法開発

逆转录病毒结构蛋白细胞膜转运相关宿主因子快速鉴定方法的建立

• 批准号: 18659136
• 负责人: 駒野 淳
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659136/
• 关键词: 発現制御; 生体分子; 蛋白質; ウイルス; 感染症

HIV-1のGagが本来有するミリストイル化シグナルを数々の膜移行シグナルと置換した変異体を作成しその性質を解析した結果、(1)ミリストイル化非依存的にGagが重合する事、(2)ミリストイル化非依存的にGagが細胞膜に到達する事、(3)ミリストイル化非依存的にGagがVLPを産生する事、(4)ミリストイル化非依存的にVLP産生分子メカニズムは野生型同様にVpuおよびVps4感受性である事、(5)Gag間相互作用の強さとVLP産生能力には相関がない事などが明らかとなった。以上より、輸送経路をCD4等に置換する事によってGag細胞膜輸送および出芽を解析する事が可能であり、これをprobeとして簡便な機能的Gag相互作用因子の同定が可能である事が示された。Gagだけでなく、細胞の膜タンパク質と相互作用する諸因子の機能的なスクリーニング系の技術的開発基盤が達成されたと思われる。細胞遺伝子産物であるPLC delta 1 pleckstrin homology domainとGagミリストイル化シグナルを置換したPH-Gagタンパク質は野生型と同等以上の効率でVLP産生するだけでなく、感染性を有するウイルスも産生する事ができた。これはウイルス複製サイクルがミリストイル基がなくても完全に機能することを示した世界で初の例である(論文投稿中)。機能および遺伝子量が類似するパルミトイル化はGagの細胞膜輸送効率が低いためVLP産生効率が著しく悪かった。ウイルス進化におけるミリストイル化シグナル選択の意義は、限られたゲノムに最小限の遺伝子量でGagによる効率的なウイルス産生を可能にするという事であると推測される。レトロウイルス学的に重要な学術的知見が置換型Gag変異体を利用して得られた意義は大きいと思われる。

HIV - 1 の Gag が had す る ミ リ ス ト イ ル change シ グ ナ ル を number 々 の membrane transitional シ グ ナ ル と replacement し た - variant を made し そ の nature を parsing し た results, (1) ミ リ ス ト イ ル not dependent of に Gag が overlap す る, (2) ミ リ ス ト イ ル not dependent of に Gag が membrane に reach す る, (3) ミ リ ス ト イ ル not dependent of に Gag が VLP を produce す る, (4) ミ リ ス ト イ ル not dependent of に VLP produce molecules メ カ ニ ズ ム は wild type with others に Vpu お よ び Vps4 susceptibility で あ る matter, (5) the interaction between the Gag の さ と VLP produce ability に は phase masato が な い matter な ど が Ming ら か と な っ た. Above よ り, conveying 経 road を CD4 に replacement す る matter に よ っ て Gag cell membrane transport お よ び budding を parsing す る could が で あ り, こ れ を probe と し て の simple な function of Gag interaction factors with fixed が may で あ が る things in さ れ た. Gag だ け で な の く, cell membrane タ ン パ ク qualitative と interaction す る の function of the factor な ス ク リ ー ニ ン グ agreement の technology open 発 base plate が さ れ た と think わ れ る. Cellular remnant 伝 offspring であるPLC delta 1 pleckstrin homology Domain と Gag ミ リ ス ト イ ル change シ グ ナ ル を replacement し た PH - Gag タ ン パ ク qualitative は wild-type と equivalent の sharper rate で VLP produce す る だ け で な く, infectious を す る ウ イ ル ス も produce す る matter が で き た. こ れ は ウ イ ル ス copy サ イ ク ル が ミ リ ス ト イ ル base が な く て も に function completely す る こ と を shown し た の example the early で で あ る) in the (article submissions. Function お よ び heritage 伝 child quantity が similar す る パ ル ミ ト イ ル change は Gag の low rate of cell membrane transport services が い た め VLP have sharper rate が し く 悪 か っ た. ウ イ ル ス evolution に お け る ミ リ ス ト イ ル change シ グ ナ ル sentaku の significance は, limit ら れ た ゲ ノ ム に minimum の heritage 伝 child quantity で Gag に よ る sharper rate な ウ イ ル ス possible に を す る と い う matter で あ る と speculation さ れ る. レ ト ロ ウ イ ル ス learn に な important academic knowledge が substitutional Gag - variant を using し て have ら れ た meaning は big き い と think わ れ る.

项目成果

Regulation of Gag trafficiking and functions(Review)

堵嘴广告及其功能的监管（审查）

• 发表时间: 2007
• 期刊: The Journal of AIDS Research 9(2)
• 作者: Murakami T;Gottlinger H;Morikawa Y;Komano J;Ryo A;Sato H.
• 通讯作者: Sato H.

ARVのUniversal Access時代を迎えて;エイズ研究センターの国際研修活動について

进入抗逆转录病毒药物普及时代；关于艾滋病研究中心的国际培训活动

• 发表时间: 2007
• 期刊: 病原微生物検出情報Infectious Agents Surveillance Report(IASR) 28(6)
• 作者: 村上 努;駒野 淳.
• 通讯作者: 駒野 淳.

CD63 and its mutants disrupt CXCR4 trafficking to the plasma membrane and inhibit T-cell tropic HIV-1 entry

CD63 及其突变体破坏 CXCR4 向质膜的运输并抑制 T 细胞嗜性 HIV-1 进入

• 发表时间: 2008
• 期刊: Traffic 9(4)
• 作者: Takeshi Yoshida;Yuji Kawano;Kei Sato;Yoshiharu Miura;Yoshinori Ando;Jun Aoki;Jun Komano;Yuetsu Tanaka;Yoshio Koyanagi.
• 通讯作者: Yoshio Koyanagi.

In vitro translation to study HIV protease activity.

用于研究 HIV 蛋白酶活性的体外翻译。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Methods Mol Biol 375
• 作者: Matsuda Z.;Iga M.;Miyauchi K.;Komano J.;Morishita K.;Okayama A.;Tsubouchi H.
• 通讯作者: Tsubouchi H.

Separate elements are required for ligand-dependent and -independent internalization of metastatic potentiator CXCR4

• DOI: 10.1111/j.1349-7006.2007.00388.x
• 发表时间: 2007-03-01
• 期刊: CANCER SCIENCE
• 影响因子: 5.7
• 作者: Futahashi, Yuko;Komano, Jun;Yamamoto, Naoki
• 通讯作者: Yamamoto, Naoki