リンパ濾胞破壊脾組織骨格への肝幹細胞・サイトカイン産生細胞移植による異所性肝作製

通过将肝干细胞和细胞因子产生细胞移植到淋巴滤泡破坏的脾组织骨架中来产生异位肝脏

• 批准号: 18659396
• 负责人: 藤元 治朗
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Hyogo College of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659396/
• 关键词: 肝臓; 幹細胞; サイトカイン; 異所性肝

免疫・分子生物学的手法により脾臓を補助肝臓およびサイトカイン・増殖因子産生工場として作り変えることを目指し研究を行なっている。C57/BL/6マウスに抗CD20抗体20μgおよびCD4抗体25μgを腹腔内投与しB cell zoneであるLynphoid follicle、T cell zoneであるPeriarteriolar lymphoid shathを破壊し脾臓に移殖肝細胞が生着する環境を作成した。CD4PE抗体、CD19PE抗体、B220PE抗体によるFACS解析において、抗CD4抗体、抗CD20抗体投与によって脾臓B cell zoneおよびT cell zoneの破壊を確認しておいた。移殖肝細胞はC57/BL/6マウスをドナーとし肝臓よりコラゲナーゼ灌流法にて肝細胞を分離し、上記前処置を行ったレシピエントマウスを小開腹し脾臓を露出、肝細胞1-4×10^6個を下極より26ゲージ針を用い注入し移殖した。肝細胞移殖後1週間目にレシピエント脾臓を摘出し肝細胞の生着を評価した。PAS染色においてレシピエント脾臓内にわずかではあるがPAS陽性の肝細胞の存在を確認し生着を確認することができた。移殖後1週間の時点で移殖肝細胞が生着していることを確認できたが、今後更に工夫を重ね生着率を高め長期間での肝細胞の生着の評価、肝細胞機能評価を行い、薬剤誘導性障害肝モデルへの移殖へ移行する予定である。

Immune, the technique of molecular biology に よ り splenic を subsidies routine liver お よ び サ イ ト カ イ ン, raised colonization factors produce workshop と し て as り - え る こ と を refers し を line な っ て い る. C57/BL/6 ウスに ウスに anti-CD20 antibody 20μgおよびCD4 antibody 25μgを intraperitoneally administered to <s:1> B cell zoneであるLynphoid follicle and T cell zoneであるPeriarteriolar lymphoid shathを breaks 壊, grafts the spleen に, and transplants hepatocytes が in a する environment を to form a た. CD4PE antibody, CD19PE antibody, B220PE antibody によるFACS analysis にお て て て, anti-CD4 antibody, anti-CD20 antibody administration によって spleen B cell zoneおよびT cell zone <s:1> rupture 壊を confirmation てお てお た た. Emigration hepatocellular は C57 / BL / 6 マ ウ ス を ド ナ ー と し routine liver よ り コ ラ ゲ ナ ー ゼ perfusion method に を separation し て liver cells line, written before 処 を っ た レ シ ピ エ ン ト マ ウ ス を small open し splenic を show, liver cell 1-4 x 10 ^ 6 を under extremely よ り 26 ゲ ー ジ needle を with emigration し い injection し た. One week after hepatocyte transplantation, the liver cells of the lesion were extracted from the spleen を in the にレシピエ ト ト and ト respectively, and the results were を and evaluated 価 and た た. PAS stain に お い て レ シ ピ エ ン ト in splenic に わ ず か で は あ る が PAS positive の hepatocytes exist の を confirmation し born with を す る こ と が で き た. Emigration after 1 week between の point emigration hepatocellular が で with し て い る こ と を confirm で き た が more に, future work を ね gave birth to the ratio between high を め long-term で の の liver cells with の review 価, liver cell function evaluation 価 を い, 薬 tonic induced handicap of liver モ デ ル へ emigration へ の transitional す る designated で あ る.