乳酸菌組み換え体を用いた頭頸部進行癌の遺伝子治療の研究

重组乳酸菌治疗晚期头颈癌的基因治疗研究

• 批准号: 18659496
• 负责人: 志賀 清人
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659496/
• 关键词: 乳酸菌; 組替え体; 頭頸部癌; 遺伝子治療; 組換え体

細菌ベクターを用いた頭頸部扁平上非癌への特定遺伝子の導入実験1.Lactobacillusをベクターとした組換え体の作成現在Lactobacillus caseiをベクターとしてプラスミドのコンストラクトの導入を準備している遺伝子はcytosine deaminase、 IL2, endostatinなどである。この中でLactobacillus caseiをベクターとしてプラスミドに組み込んだIL2遺伝子を導入し、安定した組換え体を作成することに成功した。IL2は分泌蛋白として細胞外に分泌される形式である。今後はこのコンストラクトを用いて遺伝子治療を検討する。2.In vivoでの検証ヌードマウスに頭頸部扁平上皮癌の可移植株を移植し、ある大きさまで皮下腫瘍が増大した時点を選んで、非組換え体Lactobacillus caseiを局所注射することによりLactobacillus caseiの濃度依存的に抗腫瘍効果が得られることが判明した。そこで、さらに濃度を固定し、投与を5日間連続とする群と1週間間隔で投与する群の2つに分けて検討した。5日間連続投与ではほぼ腫瘍の増殖が抑制された。その効果を病理学的に検討すると、明らかに腫瘍内で乳酸菌が存在することが確認された。また、マウス血清中の種々のサイトカインを測定したところIL5, IL10, IL12, IFN-g, TNF-aなどがコントロールに比べLactobacillus caseiの濃度依存的に増加しており、特にIL12, IFN-g, TNF-aの増加は顕著であった。このように乳酸菌の抗腫瘍効果の一部は宿主の免疫系を活性化することによることが判明した。

1. Lactobacillus casei is prepared for introduction of cytosine deaminase, IL2, endostatin. In this case, Lactobacillus casei was successfully introduced and stabilized into the system. IL-2 is secreted in extracellular form. In the future, we will discuss the use of gene therapy. 2. In vivo identification of transplantable cell lines of squamous cell carcinoma of the head and neck, the selection of time points for subcutaneous tumor growth, and the selection of time points for concentration dependent anti-tumor effects of non-transplantable Lactobacillus casei. For example, the concentration is fixed, and the concentration is 5 days. The concentration is 1 week. 5. During the day, the growth of the disease was inhibited. The presence of lactic acid bacteria in the tumor was confirmed by pathological examination. IL-5, IL-10, IL-12, IFN-g, TNF-a increased in serum concentration dependence compared with Lactobacillus casei. Part of the anti-tumor effect of lactic acid bacteria is identified by the activation of the host immune system.