脳神経系における組替え体CNRゲノミック遺伝子の検索と解析

脑神经系统重组CNR基因组基因的搜索与分析

• 批准号: 13202034
• 负责人: 杉野 英彦
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13202034/
• 关键词: 脳神経; CNR; ゲノミック遺伝子; 組替え

現在我々が解析している、脳神経特異的に発現するカドヘリン様接着分子CNR分子は、シナプス間での神経細胞の結合、特に可塑性に関与していると考えられている。そこでマウスCNRのゲノム構造を明らかにしたところ、全長約250Kbの領域に17個のエキソンと、通常よりかなり高い頻度(約40%,通常の2.8倍)でイントロン中にLINE1が存在していることがデータベースの解析の結果明らかにされた。ほとんどのLINE1は全長を持たず断片化している。しかしCNR領域中には1つ完全なORFとプロモーターを持ち、逆転写能力の高いとされているLINE1ファミリーが挿入されていることを見出した。脳各組織から抽出したRNAを用いたRT-PCR、ノーザンブロットの結果、マウスでは、全長を含むLINE1が他の組織よりかなり高頻度で発現していることを我々は見いだした。さらに興味深いことにCNRゲノム領域に存在するLINE1も脳各領域(特に海馬、小脳)で全長の発現が強く見られた。このことはCNRが発現している神経細胞では同時にLINE1配列も転写され、LINE1の持つ逆転写活性によりその神経細胞中で発現しているCNR分子を逆転写再挿入させている可能性を強く示唆する。さらに現在までに脳組織由来のゲノミックライブラリーとPCRから我々は逆転写再挿入(レトロトランスポジション)したCNRクローンを複数個得ることに成功した。本研究において、レトロランスポジションといったセントラルドグマに逆行し、遺伝子を複製する機能が脳において存在する可能性が示唆された。

Now we have analyzed the relationship between neurocellular binding, neuroplasticity and neurogenesis of CNR molecules. CNR has a structure of about 250Kb, 17 lines, usually with a high frequency (about 40%, usually 2.8 times), and the analysis results show that there are lines 1 in CNR.ほとんどのLINE1は全长を持たず断片化している。In the CNR field, the ability to write in reverse is very high. The results of RT-PCR, PCR and DNA sequencing were analyzed. The results showed that the total length of RNA was higher than that of DNA. In addition, the CNR has a strong presence in all fields (especially hippocampus and small intestine). This suggests that CNR molecules may be reprogrammed into neurons simultaneously with LINE1 alignment, and that LINE1 may be reprogrammed into neurons simultaneously with LINE 1 maintenance activity. Now, the origin of the virus has been determined by PCR, and the reverse transcription of the virus has been determined by PCR. This study indicates the possibility of the existence of a reverse gene duplication function.

项目成果

杉野英彦: "シナプスにおける接着分子の機能"(株)星和書店 脳の科学. 317(49). 317-326 (2001)

杉野秀彦：“突触中粘附分子的功能”Seiwa Shoten Brain Science 317（49）317-326（2001）。

Yamazaki Y, Makino H, Hamaguchi-Hamada K, Hamada S.Sugino H, Kawase E, Miyata T, Ogawa M, Yanagimachi R, Yagi, T.: "Assessment of the developmental totipotency of neural cells in the cerebral cortex of mouse embryo by nuclear transfer"Proc Natl Acad Sci U

Yamazaki Y，Makino H，Hamaguchi-Hamada K，Hamada S.Sugino H，Kawase E，Miyata T，Okawa M，Yanagimachi R，Yagi，T.：“小鼠胚胎大脑皮层神经细胞发育全能性的评估

Hirayama T, Sugino H, Yagi T.: "Somatic mutations of synaptic cadherin (CNR family) transcripts in the nervous system"Genes to Cells.. 6・2. 151-164 (2001)

Hirayama T、Sugino H、Yagi T.：“神经系统中突触钙粘蛋白（CNR 家族）转录物的体细胞突变”Genes to Cells.. 151-164（2001）。